均匀设计法优选老鹳草中芦丁和槲皮素提取工艺

1、均匀设计法优选老鹳草中芦丁和槲皮素提取工艺【关键词】均匀摘要：目的优选出老鹳草中芦丁和槲皮素提取最正确工艺。方法采用均匀设计安排实验，以芦盯槲皮素含量作为指标，考察了乙醇浓度、回流时间、回流温度及溶剂用量对芦丁和槲皮素提取率的影响，优选出合理的提取工艺。结果芦丁：用乙醇浓度为75%，乙醇用量为药材的24倍量，提取温度80，提取时间为60in为最正确。槲皮素：用乙醇浓度为90%，乙醇用量为药材的24倍量，提取温度80，提取时间为60in为最正确。结论经历证性实验证明所优化条件可靠，合适老鹳草中芦丁和槲皮素的提取工艺参考。关键词：老鹳草；芦丁；槲皮素；均匀设计ptiizatinftheExtrat

2、inTehnlgyfRutinandQueretinfrGeraniuilfrdiiaxibyUnifrDesignAbstrat:bjetiveTexplreanptiuextratintehnlgyfrutinandqueretinfrGeraniuilfrdiiaxi.ethdsUsingrutinandqueretinastheindexes,theeffetsfalhlnentratin,slventaunt,extratintieandextratinteperaturenextratintehnlgyereevaluatedbyunifrdesignethd.ResultsThe

3、superirtehnlgyfrutinasasflls:75%alhl,24fldslventaunt,60inutesandtherefluxteperatureis80；Thesuperirtehnlgyfqueretinasasflls:90%alhl,24fldslventaunt,60inutesandtherefluxteperatureis80.nlusinTheptiuextratinpressisprvedstableandauratebyverifiatedtest,anditissuitablefrextratinfrutinandqueretinfrGeraniuil

4、frdiiaxi.Itanbeusedfrthetheretialbasis.Keyrds:Geraniuilfrdiiaxi；Rutin；Queretin；Unifrdesign老鹳草是牛儿苗科植物牛儿苗及多种老鹳草的全草，是我国和其他一些国家常用的药材，是多年生草本，性辛、苦、平，归肝、肾、脾经，为少常用中药，具有祛风湿、通经络、筋骨酸痛、泄泻痢疾1等作用。?中国药典?2000版中收载牛儿苗科植物牛儿苗Erdiustehaianuilld.、老鹳草Geraniuilfrdiiaxi.或野老鹳草GerniuarlinianuL.的枯燥地上局部为老鹳草2。其主要成分为鞣质、黄酮类化合物3，芦丁

5、和槲皮素为老鹳草中一种黄酮类化合物。研究说明，槲皮素具有抗炎、抗抑郁、抗自由基等药理活性4，芦丁具有多种生物活性，主要用于防治心脑血管疾病等作用5。本实验采用均匀设计法安排实验，优选出合理的提取工艺，为消费工艺参数的选择提供实验数据。1仪器、试剂和药品S22P分光光度计上海棱光技术；TG238B电光分析天平上海上平仪器公司；P200B电子天平上海良平仪器仪表；AS3120A型超声波清洗脱气器奥特宝恩斯仪器。甲醇分析纯；槲皮素对照品，中国药品生物制品检定所；芦丁对照品，中国药品生物制品检定所；样品采自吉林省延吉市市郊，由延边大学药学院刘永镇教授鉴定为真品。2方法2.1因素与程度根据文献及预实验结

6、果，考察的因素与程度确定为乙醇浓度A、回流时间B、回流温度及溶剂用量D，详细因素与程度见表。采用U776均匀设计，以老鹳草中主要成分芦丁和槲皮素得率作为评价指标，挑选芦丁和槲皮素乙醇回流提取的最正确条件，见表1，表2。表1均匀设计因素程度略表2均匀设计因素程度表略2.2提取与别离将老鹳草粉碎，准确称取20.00g置250l圆底烧瓶中浸泡2h，“2.1表工艺条件进展提取，回收乙醇得浸膏、枯燥，精细称取粉末0.1000g，用60%乙醇溶解并定容50l量瓶中，作为供试品。利用紫外分光光度法测定芦丁和槲皮素得率见表1，表2。转贴于论文联盟.ll.2.3标准曲线的绘制2.3.1芦丁和槲皮素对照品溶液的制

7、备精细称取芦丁和槲皮素对照品各为20g，置于100l量瓶中，参加60%乙醇溶解，定容于100l，所得浓度均为0.20g/l，备用。2.3.2线性范围精细量取上述芦丁对照品溶液为2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0l，置于50l量瓶中，参加60%乙醇溶解，定容。在最大波长360n处，利用紫外分光光度法测得芦丁浓度Y与吸光度X的关系，Y=0.0403X-0.0002，相关系数r=0.9991；取上述槲皮素对照品溶液为1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0l，置于50l量瓶中，参加60%乙醇溶解，定容。在最大波长370n处，利用紫外分光光度法测槲皮素浓度Y与吸光度X

8、的关系，Y=0.0158X+0.0008，相关系数r=0.9992。结果说明，芦丁溶液浓度在0.00820.0246g/l；槲皮素溶液浓度在0.003960.01188g/l内，浓度Y与吸光度X之间呈良好的线性关系。2.4数据处理与结果分析将表数据用均匀设计软件进展多元回归分析处理，得出线性回归方程芦丁：Y=-0.72-2.37A-0.198B+0.503+5.49D，其中S=0.0250，R=0.9998，Ft=125.17F0.1(1,1)；槲皮素：Y=0.210+1.51A+0.711B+3.88，其中S=0.0477，R=0.9980，Ft=17.184F0.1(1,2)，检验通过，方

9、程有意义。根据回归方程可知对于芦丁的提取，影响最大的是溶剂用量和回流温度，而乙醇浓度和回流时间对实验结果影响不太大，其影响因素顺序为DBA，即溶剂用量回流温度回流时间乙醇浓度，由直观分析可知最正确工艺为A6B42D1。根据实验经济和时间方面考虑，采取溶剂用量为24倍量，回流温度为80，回流时间为1h，乙醇浓度为75%即可。根据回归方程可知槲皮素的提取剔除B因素回流时间，重新进展多元回归，可知其影响因素顺序为DA，即回流温度溶剂用量乙醇浓度。由直观分析可知最正确工艺为A62D1，即乙醇浓度为90%，溶剂用量为24倍量，回流温度为80。从方差分析说明影响提取效果的主要因素是回流温度，溶剂用量,乙醇

10、浓度，根据专业知识和经历，回流时间取1h即可。2.5工艺条件验证根据优化的最正确工艺条件得芦丁得率预期实验结果最大值为Y=8.56%；槲皮素得率预期实验结果最大值为Y=3.15%。按优化条件重复实验3次，测定芦丁含量为8.61%，8.48%，8.59%，平均值为8.56%；槲皮素含量为3.21，3.11，3.07%，平均值为3.13%。3讨论按均匀设计安排实验条件，明显减少了多因素实验的次数，得出实验方程，指导以后的实验。根据回归方程，结合专业知识，对于芦丁的提取，影响最大的是溶剂用量和回流温度，而乙醇用量和回流时间对实验结果影响不太大，根据实验经济和时间方面考虑所以采取溶剂用量为24倍量，回流温度为80，回流时间为1h，乙醇浓度为75%；对于槲皮素影响提取效果的主要因素是回流温度，溶剂用量,乙醇浓度，所以采取溶剂用量为24倍量，回流温度为80，乙醇浓度为90%，回流时间为1h。均匀设计实验验证结果与预测结果根本接近，说明该提取工艺稳定、可行。参考文献：1国家药典委员会.中国药典，部S.北京:化学出版社,2000:91.2刘娟,王良信.老鹳草的本