【人教版】生物选修一21微生物的实验室培养教案设计

1、【人教版】生物选修一：2.1微生物的实验室培育教课设计设计【人教版】生物选修一：2.1微生物的实验室培育教课设计设计7/7【人教版】生物选修一：2.1微生物的实验室培育教课设计设计文档根源为:从网络采集整理.word版本可编写.支持.专题2微生物的培育与应用课题2.1微生物的实验室培育一、【课题目标】（一）知识与技术认识相关培育基的基础知识；掌握培育基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法剖析实验思路确实定和形成的原由，剖析实验流程，对照前面的实验设计，概括共性，剖析差异，增添印象（三）感情、态度与价值观形成勇于实践、谨慎务实的科学态度和科学精神二、【课题要点】无菌技术

2、的操作三、【课题难点】无菌技术的操作四、【教课方法】启迪式教课五、【教课工具】多媒体课件六、【教课过程】（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，此中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提升发酵的质量，需要获取优秀菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要波及到微生物的培育、分别、鉴识等基本技术。此刻我们开始学习微生物的培育和应用专题。（二）进行新课1基础知识11培育基的种类包含固体培育基和液体培育基等。思虑1琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培育基顶用作为凝结剂。【增补】培育基的种类及其应用：标准培育基种类配制特色主要应用12培育基的化学成分包含水、无机盐、

3、碳源、氮源四类营养成分。固体培育基加入琼脂许多菌种分别,判定,计数物理性质半固体培育基加入琼脂较少菌种保留思虑2从细胞的化学元素构成来看，培育基中为何都含有这些营养成分？液体培育基不加入琼脂工业生产，连续培育C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97以上。化学构成合成培育基由已知成分派制而成，培育基成分明确菌种分类、判定【增补】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的构造物质和分泌物，并供给能量。天然培育基由天然成分派制而成，培育基成分不明确工业生，产降低成本氮源：如N2鉴、别氨培盐养、基硝酸盐、牛肉膏添、加蛋某白种胨指等示，剂主或要化用学来药合剂成蛋白质

4、、核酸及含菌氮种代的谢鉴物别等。含有目的用途C、H、O、N的化合物既能够作为碳源，又能够作为氮源，如氨基酸等。菌种的分别选择培育基增添（或缺乏）某种化学成分13培育基除知足微生物生长的pH、特别营养物质和氧气等要求。【增补】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中一定从培育基中汲取的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。思虑3牛肉膏和蛋白胨主要为微生物供给糖、维生素和有机氮等营养物质。思虑4培育乳酸杆菌时需要增添维生素，培育霉菌时需要将培育基pH调理为酸性，培育细菌时需要将pH调理为中性或微碱性。活动2：阅读“无菌技术”，议论回答以下问题：文档根源为:从网络采集整理.word版本可编写.

5、支持.14获取纯净培育物的要点是防备外来杂菌的入侵。15无菌技术包含：（1）对实验操作空间、操作者的穿着和手进行洁净和消毒；（2）将培育器皿、接种器具和培育基等器具进行灭菌；（3）为防止四周微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰邻近旁进行；（4）防止已灭菌办理的资料器具与四周物件相接触。16比较消毒和灭菌（填表）比较项理化要素的作用强度消灭微生物的数目芽孢和孢子可否被消灭思虑5无菌技术除了防备培育物被污染外，还拥有的目的是防备感染实验操作者。消毒较为平和部分生活状态的微生物不可以17消毒方法：灭菌激烈所有微生物能（1）平时生活常常用到的是煮沸消毒法；（2）对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法（作

6、简要介绍）；（3）对接种室、接种箱或超净工作台第一喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以加强消毒成效，而后使用紫外线进行物理消毒。4）实验操作者的双手使用酒精进行消毒；5）饮水水源用氯气进行消毒。18灭菌方法：（1）接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；（2）玻璃器皿、金属器具等使用干热灭菌法，所用器材是干热灭菌箱；（3）培育基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器材是高压蒸汽灭菌锅。（4）表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器材是紫外灯。思虑6对接种环灭菌时要用酒精灯的充分焚烧层火焰灼烧可能伸入试管或培育皿的部位。思虑7利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物件不可以摆得太挤，目的是防止阻碍热空气流通。思

7、虑8物件装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，利于锅内温度高升；随后封闭排气阀持续加热，最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至要第一翻开排气阀，煮沸并清除锅内冷空气，其目的是有气压升至100kPa，温度为121，并保持1530min；零时翻开锅盖，其目的是防备容器中的液体暴沸。【增补】培育基的配制原则：目的要明确：依据培育的微生物种类、培育的目的等确立培育基的种类和配制量。营养要协调：培育基中各样营养物质的浓度和比率要适合。比如：碳氮比41菌大批生殖而产生谷氨酸少；碳氮比为31时，菌体生殖受克制而谷氨酸合成量大增。时，谷氨酸棒状杆pH要适合：细菌培育基pH中性或偏碱性，霉菌培育基呈酸性。2实验操作21

8、计算：依据配方比率，计算100mL培育基各成分用量。22称量：正确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要快速，目的是防备牛肉膏汲取空气中水分。23熔解：加水加热融化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化钠持续加热；加入琼脂；用蒸馏水定容到100mL。整个过程不停用玻棒搅拌，目的是防备琼脂糊底而致使烧杯破碎。24调pH：用1mol/LNaOH溶液调理pH至偏碱性。25灭菌：将配制好的培育基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌；所用培育皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。26倒平板：待培育基冷却至50左右时在酒精灯火焰邻近操作进行。其过程是：文档根源为:从网络采集整理.word版本可编写.支持.在火焰旁右

9、手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口快速经过分焰；左手将培育皿翻开一条空隙，右手将培育基倒入培育皿，马上盖上皿盖。待平板冷却凝结后，将平板倒过来搁置。思虑1锥形瓶的瓶口经过分焰的目的是消灭瓶口的杂菌，防备杂菌感染培育基。思虑2倒平板的目的是防备培育基冷却过程中形成的水滴落到培育基表面。思虑3若皿盖和皿底之间粘有培育基，则该平板可否培育微生物？为何？不可以。空气中杂菌会在这些粘附培育基上生殖，并污染皿内培育基。思虑4配制斜面培育基中，试管要加塞棉塞的目的是保持通气并防备杂菌感染。思虑5试管培育基形成斜面的作用是增大接种面积。27接种271微生物接种的最常用方法是平板划线法和稀释

10、涂布法，此外还有穿刺接种和斜面接种等。272平板划线法：经过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作，将齐集的菌种逐渐稀释分别到培育基表面。其操作步骤是：将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。在酒精灯火焰旁冷却接种环，并翻开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口经过分焰达到消灭试管口杂菌的目的。将冷却的接种环伸入到菌液中拿出一环菌种。将菌种试管口再次经过分焰后塞上棉塞。将皿盖翻开一条空隙，把接种环伸入平板内划35条平行线，盖上皿盖，不要划破培育基。灼烧接种环，冷却后从第一区划线尾端开始向第二地区内划线。重复上述过程，达成三、四、五地区内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。将平板倒置放在

11、培育箱中培育。思虑6取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防备高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防备细菌污染环境和操作者。思虑7在第1次划线后都从上一次划线尾端开始的目的是获取由单个细菌形成的标准菌落。273稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培育基长进行培育。当稀释倍数足够高时，即可获取单个细菌形成的标准菌落。274系列稀释操作：取盛有9mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。用灼烧冷却的

12、移液管汲取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次，使之混匀。从101倍液中汲取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打平均，获取102倍液。依此类推。思虑8操作中试管口和移液管应在离火焰12cm处。整个操作过程中使用了1支移液管。3结果剖析与评论31培育未接种培育基的作用是比较，如有菌落形成，说明培育基灭菌不完全。32在肉汤培育基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，圆滑有光彩，边沿齐整。33培育12h和24h后的菌落大小不一样（同样、不一样）；菌落散布地点同样（同样、不一样）。原由是时间越长，菌落中细菌生殖越多，菌落体积越大；菌落的地点不动，但菌落数增加。思虑9在某培育基上出现了3种特色不一样

13、的菌落，原由有培育基灭菌不完全或杂菌感染等。思虑10屡次使用的菌种利用暂时收藏法保留，长久保留菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培育基培育后，保留在4冰箱中，每36个月转种培育一次，弊端是保留时间较短，简单发生污染文档根源为:从网络采集整理.word版本可编写.支持.和变异；后者将菌种与无菌体积等量混淆后保留在20冷冻箱中。（三）讲堂总结、评论微培育基（四）实例研究生例1关微生物营养物质的表达中，正确的选项是物配制培育基的原则A.是碳源的物质不行能同时是氮源B.凡碳源都供给能量的培育基的配制计算称量熔解实D.无机氮源也能供给能量C.除水之外的无机物只供给无机盐验配制培育基的方法调pH分装

14、加棉塞灭菌倒平板A、B选项，室NH4HCO3；有的碳源它的表达是不完好的。有的碳源只好是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如培平板划线法C选项，除水之外的无机物种同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。关于养纯化大肠杆菌NaHCO，可作为自养型微生物的碳源和3无机盐；而NaCl则只好供给无机盐。关于D选项，无机氮源供给能量的状况仍是存在的，如NH3可为硝化稀释涂布法系列稀释平板涂布细菌供给能量和氮源。答案：D例2下边对发酵工程中灭菌的理解不正确的选项是A.防备杂菌污染B.消灭杂菌C.培育基和发酵设施都一定灭菌D.灭菌一定在接种前分析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环

15、节。A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不可以混入其余微生物（杂菌），因此是正确的；B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实质操作中不行能只消灭杂菌，而是消灭所有微生物。C是正确的，因为与发酵相关的所有设施和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后特意接种的，灭菌一定在接种前，假如接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。答案：B综合应用例3右表是某微生物培育基成分，请据此回答：（1）右表培育基可培育的微生物种类编号成分含量是。粉状硫10g（2）若不慎将过度NaCl加入培育基中。（NH）SO0.4g如不想浪费此培育基，可再加入，424用于培育。K2HPO44.0g（

16、3）若除掉成分，加入（CH2O），该培MgSO9.25g养基可用于培育。4（4）表中营养成分共有类。FeSO0.5g4（5）无论何种培育基，在各样成分都熔解CaCl20.5g后分装前，要进行的是。100ml26）右表中各成分重量确立的原则是。（7）若右表培育基用于菌种判定，应当增添的成分是。分析：关于一个培育基，它能培育何种微生物，要看它的化学成分。自然这只合用于合成培育基，假如是一个天然培育基就不可以从培育基的成分上划分它是培育何种微生物的。剖析化学成分要从营养物质的种类出发。右表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特别营养物质。对特别营养物质，有的微生物是不需要的，但没有微生物是

17、不需要碳源的。该培育基中没有碳源，说明培育的微生物是从空气中获取碳源的，即可培育的微生物就是自养型微生物了。该培育基中加入了过度食盐，就能够成为金黄色葡萄球菌鉴识培育基，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培育基就还需要加入有机碳源。该培育基若加入（CH2O），培育基中就有了碳源，但除掉成分，却使培育基中没有了氮源，这时就只好用于培育固文档根源为:从网络采集整理.word版本可编写.支持.氮微生物了。关于菌种判定，常常用的是固体培育基，而表中没有凝结剂，需要加入常有的凝结剂琼脂。答案：自养型微生物含碳有机物金黄色葡萄球菌固氮微生物3调整pH依微生物的生长需要确立琼脂（或凝结剂）（五）稳固练习1

18、不行能作为异养微生物碳源的是A牛肉膏B含碳有机物C石油D含碳无机物2根瘤菌能利用的营养物质的组别是ANH，（CHO），NaClBN，（CHO），CaCl23222C铵盐，CO，NaClDNO，CO，CaCl22223配制培育基的表达中正确的选项是A制作固体培育基一定加入琼脂B加入青霉素可获取放线菌C培育自生固氮菌不需氮源D发酵工程一般用半固体培育基4自养型微生物与异养型微生物的培育基的主要差异是A碳源B氮源C无机盐D特别营养物质5下表是相关4种生物的能源、碳源、氮源和代谢种类的概括。此中正确的选项是()生物硝化细菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒状杆菌能源氧化NH3N2的固定分解糖类等有机物光能碳源C0糖

19、类糖类糖类2氮源NHN+-尿素NH、NO3243代谢种类自养需氧型异养需氧型异养兼性厌氧型自养需氧型A根瘤菌、谷氨酸棒状杆菌B硝化细菌、酵母菌C酵母菌、谷氨酸棒状杆菌D硝化细菌、根瘤菌6甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培育微生物的三种培育基。甲、乙、丙都能在种正常生长生殖；甲能在中正常生长生殖，而乙和丙都不可以；乙能在中正常生长生殖，甲、丙都不能。以下说法正确的选项是（）粉状硫K2HPO4FeSO4蔗糖（NH4）2SO4H2OMgSO4CaCl210g4g0.5g10g0.4g100ml9.25g0.5g+-+-+A、甲、乙、丙都是异养微生物B、甲、乙、丙都是自养微生物、丙是异养微生物C、

20、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物7微生物（除病毒外）需要从外界汲取营养物质并经过代谢来保持正常的生长和生殖。以下相关微生物营养的说法正确的选项是文档根源为:从网络采集整理.word版本可编写.支持.A乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是同样的B微生物生长中不行缺乏的一些微量的无机物称为生长因子C培育基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有益D生长因子一般是酶或核酸的构成成分，微生物自己合成这些生长因子的能力常常不足。8某一种细菌株要从环境中提取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂办理此菌株，想挑选出表中细菌菌株种类。依据实验年目的，采用的培育基种类是（）注：亮氨酸链霉素“”加入“”不加入如：不加亮氨酸：加入链霉素选项挑选出不需要亮氨酸的挑选出抗链霉素的挑选出不需要亮氨酸的抗链霉素菌株菌株的菌株9要将从土壤中