葛黄活血胶囊质量控制标准研究

1、葛黄活血胶囊质量操纵尺度研究张裕强朱华旭郭立玮【摘要】：目的创立葛黄活血胶囊的质量操纵尺度。要领创立黄芪、秦艽的薄层色谱区分要领和葛根素含量的高效液相色谱测定要领。结果定性要领能检出黄芪和秦艽,且阴性比拟无滋扰；葛根素在0.020790.6652g/l之间呈精良的线性干系,r1.0000,均匀加样接纳率为100.1%,rsd0.92%。结论该法操纵轻便、结果正确、重现性好,实用于葛黄活血胶囊的质量操纵尺度。【关键词】葛黄活血胶囊薄层色谱法高效液相色谱法葛根素keyrds：gehuanghuxueapsules；tl；hpl；puerarin葛黄活血胶囊由葛根、黄芪、当归、秦艽、丹参等8味中药构

2、成,具有活血化瘀、理气止痛、疏通经络、调和经脉之成果。用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、心绞痛、高血压、高血脂等症。该方处于研制历程中。为了更好地操纵其质量,包管该品的临床疗效,本研究接纳薄层色谱法对方中黄芪、秦艽举行定性区分,接纳高效液相色谱法对方中君药葛根举行定量研究。葛根具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻的成果,葛根素的含量较高,是葛根的重要有用身分。葛根素具有扩张冠脉、落血脂、抗血栓形成、调治血糖、改进脑微循环体系等作用,与本品的成果主治一样等,故将葛根素定为本品含量测定的指标性身分。文献报道的葛根素含量测定要拥有高效液相色谱法1、分光光度法2等。本研究创立了本品制剂中葛根素的高效液相色谱测

3、定法,要领可靠、敏捷、快速。1仪器与试药接纳美国agilent1100hpl体系,dad检测器,主动进样器,agilent色谱事情站。色谱柱：krasil18反相色谱柱(4.6250,5),中国科学院大连化学物理研究所制。葛根素比拟品购自中国药品生物成品检定所,批号110752-200209,供含量测定用。甲醇为色谱纯(江苏汉邦科技),水为重蒸馏水,别的试剂均为阐发纯,硅胶g(青岛海洋化工)。葛黄活血胶囊(批号060817、060818、060819)由南京中医药大学中医药研究院提供。2定性区分2.1黄芪的薄层色谱区分3取本品6粒,倾出内容物,研细,加水饱和的正丁醇120l,超声提取30in,

4、滤过,滤液用0.5%氢氧化钠溶液洗涤3次,每次50l,弃去下层碱液,上层正丁醇液用正丁醇饱和的水洗涤至中性,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2l溶解,作为供试品溶液。黄芪阴性制剂接纳与制剂雷同的处置惩罚要领。取黄芪甲苷比拟品适量,加甲醇制成每1l含0.5g的溶液,作为比拟品溶液。照薄层色谱法2022年版?中华人民共和国药典?(一部)附录b试验,汲取上述3种溶液各30、30、15l,别离点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(1372)的下层溶液为睁开剂,睁开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105加热至斑点显色清楚。供试品色谱中,在与比拟品色谱相应的位置

5、上,日光下显雷同的棕褐色斑点,紫外光灯(365n)下显雷同的橙黄色荧光斑点,阴性在雷同位置无此斑点存在。2.2秦艽的薄层色谱区分4取本品6粒,倾出内容物,加适量浓氨水试液使之润湿,再加三氯甲烷40l,超声提取30in,滤过,滤液蒸干,残渣加三氯甲烷2l溶解,作为供试品溶液。取秦艽药材粉末3g,加水80l,加热回流30in,弃去水液,药渣加适量浓氨水试液使之润湿,再加三氯甲烷25l,超声提取30in,滤过,滤液蒸干,残渣加三氯甲烷5l溶解,作为比拟药材溶液。照薄层色谱法2022年版?中华人民共和国药典?(一部)附录b试验,汲取上述2种溶液各7、3l,别离点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶g薄

6、层板上,以醋酸乙酯-甲醇(41)为睁开剂,睁开,取出,晾干,置紫外光灯(365n)下检视。供试品色谱中,在与比拟药材色谱相应的位置上,显雷同的绿色荧光斑点,阴性在雷同位置无此斑点存在。3含量测定3.1色谱条件5色谱柱：krasil18反相柱(4.6250,5)；活动相：甲醇-0.1%磷酸水(2080)；检测波长：250n；柱温：30；流速：1.0l/in；敏捷度：0.5aufs；理论塔板数均在3000以上。按照上述色谱条件测定,葛根素与别的组分均能到达基线疏散。3.2比拟品溶液的制备细密称取于60枯燥至恒重的葛根素比拟品16.63g,置于25l容量瓶中,加活动相稀释至刻度,配成0.6652g/

7、l的溶液,作为比拟品溶液。3.3供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物,研细,取约0.25g,细密称定,置锥形瓶中,细密加30%乙醇25l,称定重量,超声处置惩罚(50khz,250)10in,放冷,称重,用30%乙醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45)滤过,取续滤液作为供试品溶液。3.4空缺试验原方去葛根药材,按制剂工艺法举行制备,得缺葛根的阴性制剂。取阴性制剂内容物0.25g,按制剂供试液的制备要领制备阴性制剂供试液,依法阐发,阴性制剂色谱图在葛根素相应保存时间位置无滋扰峰,结果见图1。3.5线性干系观察细密称取于60枯燥至恒重的葛根素比拟品16.63g,置于25l容量瓶中,加

8、活动相稀释至刻度,制成葛根素尺度储藏液(0.6652g/l)。别离配成0.3326、0.1663、0.08315、0.04158、0.02079g/l的系列比拟品溶液,别离汲取上述溶液10l,注入液相色谱仪,测定。以峰面积为纵坐标,比拟品浓度(g/l)为横坐标,绘制尺度曲线,得回归方程：a38.1330.889,r1.0000。表白葛根素浓度在0.020790.6652g/l之间呈精良的线性干系。3.6不变性试验同一样品(批号060817)供试液,隔2h测1次,共测7次,结果表白,试供液中葛根素在12h内不变,其不变性结果rsd0.23%。3.7细密度试验同一样品(批号060817)供试液,依

9、法测定,一连进样6次,丈量值根本同等,其细密度结果rsd0.22%。3.8重复性试验同一批号(批号060817)制剂,制备6份供试液,依法测定,重复性试验结果rsd1.25%,切合划定。3.9接纳率试验取含量的制剂(批号060817),举行加样接纳率试验。取本品装量差异项下的内容物,研细,约0.13g,共9份,细密称定,置锥形瓶中,参加浓度为0.3325g/l的尺度品2.4、2.9、3.4l各3份,细密加30%乙醇使成25l,称定重量,超声处置惩罚(50khz,250)10in,放冷,称重,用30%乙醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45)滤过,取续滤液作为供试品溶液。依法测定,并盘算葛

10、根素接纳率为99.68%,rsd0.38%,结果见表1。表1加样接纳率试验结果略3.10样品测定取本品装量差异项下的内容物(批号060817、060818、060819),研细,取约0.25g,细密称定,置锥形瓶中,细密加30%乙醇25l,称定重量,超声处置惩罚(50khz,250)10in,放冷,称重,用30%乙醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45)滤过,取续滤液,依法测定。以0.08315g/l葛根素比拟品溶液进样测定,均匀峰面积为3175.85,按照外标一点法盘算样品含量。结果见表2。表2样品含量测定结果略4讨论在供试品的处置惩罚要领实行中,比拟了回流法和超声法2种提取要领,并比

11、力了10、20、30in差异超声时间。结果表白,超声法与回流法提取结果根本靠近,但超声法操纵轻便,应选用超声法提取；超声提取时间对葛根素提取率根本无影响,应选用超声提取10in。为了包管提取结果,超声时应稍振摇,使制剂样品在溶液中充实疏散,防范结成团影响提取结果。接纳tl法对制剂样品中秦艽举行区分时,实行了以下3种睁开剂：氯仿-甲醇(51)；醋酸乙酯-甲醇(41)；乙醚-甲醇(41)。结果表现,以醋酸乙酯-甲醇(41)作为睁开剂,斑点较清楚,疏散结果好,重复性好,应选用该睁开体系。【参考文献】1张春晖,杨晓云,庞清.高效液相色谱法测定芩莲葛根片中葛根素的含量j.中国当代应用药学杂志,2022,21(5)：396397.2刘逢芹,刘田云,李贵海,等.分光光度法和hpl法测定野葛藤总