湖南版高中生物总复习专题22 微生物的培养与发酵工程（试题练）教学讲练

1、高中生物总复习PAGE PAGE 30成功的大门为你而开。第七单元生物技术与工程专题22微生物的培养与发酵工程【考情探究】课标解读考情分析备考指导考点考向1传统发酵技术果酒、果醋的制作考查内容:本专题考查的热点内容是微生物的培养与应用,集中在微生物的实验室培养、特定微生物数量的测定方法、培养基对微生物的选择作用等;传统发酵技术方面主要考查运用发酵加工食品的基本方法测定食品加工中可能产生的有害物质,题目情境贴近生活和科技进展,但试题答案落脚于教材主干知识命题规律:命题体现了对科学探究与科学素养的考查。对微生物的培养与应用的考查多以特定情景为背景,通过对目标微生物的筛选、纯化,考查微生物的营养、代

2、谢;传统发酵技术考查的内容较简单,常延伸到必修一,如生物的结构与功能、呼吸作用等,进行学科内综合考查1.本专题复习时注意,在掌握各种生物技术的方法和原理的基础上进行归纳、比较2.平常注意掌握实验设计思路、实验方法、实验分析与评价等基本知识3.复习时注意与必修知识(生物的结构、代谢等)相联系腐乳制作与泡菜的腌制2微生物的实验室培养培养基与微生物的纯化3微生物的分离与计数微生物的分离与计数【真题探秘】基础篇【基础集训】考点一传统发酵技术考向1果酒、果醋的制作1.蓝莓富含花青素等营养成分,具有保护视力、软化血管、增强人体免疫力等功能。某同学尝试用蓝莓来制作蓝莓果酒和蓝莓果醋。(1)制酒中利用的微生物

3、是,取样后可用观察该微生物。发酵时一般要先通气,通气的原理是。制酒过程中可在酸性条件下用橙色的重铬酸钾溶液检验酒精的存在,检验后颜色变成。(2)为鉴定蓝莓果醋是否酿制成功,除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外,还可以通过检测和比较发酵前后的做进一步的鉴定。(3)酿制蓝莓果酒时,并不需要对蓝莓进行严格的消毒处理,这是因为在的发酵液中,绝大多数微生物无法适应这一环境而受抑制。(4)酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味,尤其是在气温高的夏天更易如此,分析其原因是醋酸菌最适生长温度为。醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖原(填“充足”或“缺少”)。答案(1)酵母菌(光学)显微镜酵母菌可

4、在有氧条件下大量繁殖灰绿色(2)pH(醋酸含量)(3)缺氧、成酸性(4)3035 缺少考向2腐乳制作与泡菜的腌制2.回答下列有关腐乳制作的问题:(1)腐乳是经微生物发酵后制成的食品,多种微生物参与了该发酵过程,其中起主要作用的微生物是,其产生的蛋白酶可以使豆腐中的蛋白质被分解为和。(2)发酵完成后,需装瓶加盐腌制,瓶子一般采用的消毒方法是,加盐的目的是 。腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配制而成的卤汤,卤汤除使腐乳具有一定的外,还具有防腐作用。(3)封瓶的时候,需要把瓶口在酒精灯火焰上过一下,原因是。(4)含水量高的豆腐不适合用来制作腐乳,原因是。答案(1)毛霉肽氨基酸(2)煮沸消毒法析出

5、豆腐中的水分,抑制微生物生长风味(3)防止瓶口被微生物污染(4)含水量太高的豆腐在制作过程中容易破碎,不易成形3.泡菜和腐乳是我国的传统食品,请回答有关问题:(1)制作泡菜时,泡菜坛一般用水密封,目的是。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是。(2)乳酸发酵第一阶段的产物是。泡菜制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害,影响亚硝酸盐含量的因素有(至少两项)等。(3)腐乳是豆腐经多种微生物发酵后制成的食品,其中起主要的作用的微生物是毛霉。制作的后期可加入卤汤,卤汤除具有一定的防腐作用外,还能使腐乳具有独特的。实验室制作的腐乳可能,不宜直接食用。(4)

6、乳酸菌和毛霉在细胞结构上最主要的区别是。答案(1)创造无氧环境增加乳酸菌含量(2)丙酮酸温度、食盐用量、腌制时间(3)风味灭菌不彻底(4)有无以核膜为界限的细胞核考点二微生物的实验室培养考向培养基与微生物的纯化1.琼脂是一种多糖类物质,由于很少有微生物能将其降解而成为配制固体培养基时常用的凝固剂之一。某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现,几乎全部培养基上的微生物都已死亡,但在其中一个培养基上存在一个正常生长的菌落。对此,研究人员提出了以下假说:此培养基内的营养未被消耗殆尽;形成此菌落的为自养型微生物;形成此菌落的微生物能利用琼脂。(1)从研究人员所提的假说可以推测所说的“

7、营养”指的最可能是(填“碳源”“氮源”或“无机盐”)。(2)配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括、调pH、灭菌、倒平板。倒平板所用的培养皿的灭菌方法是。(3)为了检验上述假说是否正确,研究人员分别使用两种培养基对上述微生物进行培养,其中一种为牛肉膏蛋白胨培养基(a),则另一培养基b中不能加入下列的。A.牛肉膏B.蛋白胨C.氯化钠D.琼脂(4)用上述a、b培养足够时间,菌落生长情况为,证明假说正确。(5)若上述实验否定了假说,为进一步检验假说和,研究人员想要配制一种新的培养基c,并通过b与c上是否出现菌落作为观察指标,则与b相比,c的成分需要做出的变化是。答案(1)碳源(2)计算称量溶化干热灭菌法(

8、3)A、B(4)a培养基上长出菌落,b培养基上不长菌落(5)将琼脂换用其他凝固剂2.为了调查银川市自来水水源地的水质情况,某研究小组对该地自来水水样中的大肠杆菌进行了测定,请回答下列问题:(1)该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌,划线时在培养基上共画了4个区域,则需要次灼烧接种环。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是 。(2)在纯化菌种时,所用的培养基都需要在接种前用法进行灭菌。将1 mL水样稀释1 000倍,在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL稀释液,在适宜条件下培养后,3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数约为。

9、要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。(3)菌种需临时保藏时,要先将菌种接种到试管的培养基上,在合适的温度下培养。当菌落长成后,将试管放入冰箱中保藏。但此方法存在的缺点是 。 (4)在培养时,需将培养皿倒置并放在中。实验结束时,使用过的培养基应该进行处理后才能丢弃。答案(1)5将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌种的菌落(2)高压蒸汽灭菌5.0108等量的无菌水(3)固体斜面4 保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异(4)恒温培养箱灭菌考点三微生物的分离与计数考向微生物的分离与计数1.幽门螺杆菌是一种微厌氧菌,它是引发胃炎的主要原因。胃总是在不停地蠕动,里面还有胃

10、酸(pH为1.5左右),绝大部分的细菌都适应不了,幽门螺杆菌能产生尿素酶,它将尿素分解成氨和二氧化碳,氨可以中和胃酸保护幽门螺杆菌。请回答以下问题:(1)人体的胃可以为幽门螺杆菌的生长繁殖提供水、无机盐、等营养物质,按功能分类,人体胃中的内容物相当于 培养基。(2)根据题干信息可知,若要在体外培养幽门螺杆菌,培养温度的要求是。氧气条件是。可在添加了尿素的培养基中加入指示剂观察菌落周围是否变红,以对幽门螺杆菌进行初步鉴定。(3)中国人饮食习惯中的不分餐也不常使用公筷很可能会导致胃幽门螺杆菌交叉传播,为了验证这一假说,有人提取了某胃炎患者家庭的100 g剩菜,加入无菌水稀释至1 000 mL。取0

11、.1 mL上述稀释液分别接种到3个适宜的培养基中置于适宜的条件下进行培养,三个平板上胃幽门螺杆菌菌落数均介于30300之间且相差不大,求平均值得到菌落数为A个。实验过程中,接种的方法一般为,由实验可知每克剩菜中胃幽门螺杆菌数量为 个。本方法测得的结果一般小于实际值,原因最可能是 。答案(1)碳源、氮源(或有机物)(合理即可)选择(2)37 左右低氧酚红(3)稀释涂布平板法A102当两个或两个以上的细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落2.自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐,对水体有一定的净化作用,请回答:(1)培养硝化细菌时,将含固体培养基的培养皿倒置的目的是。培养基中加入的铵盐为硝

12、化细菌的生长提供,培养基中没有加入有机碳,从功能上看这种培养基属于 培养基。(2)硝化细菌纯化并计数时,对照组应该涂布等量的。样液稀释103倍后,取0.1 mL涂布到四个平板,统计其菌落数分别为251、265、276、348个,可推测原样液中硝化细菌的浓度为个/mL,该方法测定的硝化细菌的含量和实际值相比,一般(填“偏大”或“偏小”)。(3)若要探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小,现提供足量含某铵盐的液体培养基及pH分别为5、9的弱酸和弱碱缓冲液,写出你的实验设计思路: 。答案(1)防止冷凝形成水滴,污染培养基(或防止培养基表面的水分过快挥发)氮源(或氮源和能量)选择(2)无菌水2

13、.64106偏小(3)将含铵盐的液体培养基均分成三等份,分别加入等量的弱酸、弱碱缓冲液和无菌水(作为对照),将其pH依次调节为5、9、7,培养相同时间后,测定培养基中的铵盐的剩余量来判断硝化细菌对铵盐转换能力的大小应用篇【应用集训】应用制作酸奶的微生物学原理1.关于酸奶制作,下列说法正确的是()A.含抗生素的牛奶更容易发酵B.温度越高,制作酸奶需要的时间越长C.牛奶变酸的同时,其中的糖类发生了变化D.制作过程中需不断通入无菌空气答案C2.酸奶不仅美味,还含有丰富的蛋白质、钙以及多种维生素等,酸奶制作也比较简单,所以广受人们的喜欢。请结合实际生活回答下列问题:(1)对奶牛养殖厂售出的新鲜牛奶消毒

14、常用法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是。(2)某同学将超市买来的某品牌老酸奶加入鲜奶中,搅拌均匀后,放入酸奶机中,也可制作美味可口的酸奶,该同学加入适量老酸奶的目的是。(3)若要分离纯化得到发酵效果相对较好的乳酸菌种,所用的培养基中要加入碳酸钙(有CaCO3的培养基不透明,无CaCO3的培养基透明),其作用除中和产生的乳酸外,还可以,分离纯化时应挑选出 的菌落作为候选菌。(4)乳酸菌菌种若要长期保存,菌液中常需要加入一定量的,并在-20 的环境中存放。答案(1)巴氏消毒在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(2)接种(3)鉴别乳酸菌透明圈大(4)甘油【五年高考】考点一 传

15、统发酵技术1.(2017课标全国,37,15分)豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素,某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀,再将两者置于适宜条件下进行发酵,并在32 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题:(1)该实验的自变量是、。(2)如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌是。(3)如果在实验后,发现32 h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系,则无法确定发酵的最佳时间;若要确定最佳发酵时间,还需要做的事情是 。(4)从大豆到豆豉,大豆中的成分会发生一定的变化,其中,蛋白质转变为,脂肪转变为 。答案(

16、1)菌种发酵时间(2)好氧菌(3)延长发酵时间,观测发酵效果,最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油2.(2016课标全国,39,15分)苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题:(1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程和是苹果醋生产的第一阶段,在酵母菌细胞的中进行,其产物乙醇与试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验;过程在酵母菌细胞的 中进行。与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖速度。(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程,根据醋酸杆菌的呼吸作用类型,该过程需要在条件下才能完成。(3)在生产过程中,第一阶

17、段和第二阶段的发酵温度不同,第一阶段的温度(填“低于”或“高于”)第二阶段的。(4)醋酸杆菌属于核生物,其细胞结构中(填“含有”或“不含有”)线粒体。答案(1)细胞质基质重铬酸钾线粒体快(2)有氧(3)低于(4)原不含有3.(2016天津理综,10,12分)天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。淀粉类原料成熟酒醅成熟醋醅(1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度,这是因为酶。(2)在酒精发酵阶段,需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。(3)在醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵30天。工艺如下。发酵过

18、程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如图。据图分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是,由此推测,影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因是 。乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵缸中层的醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少,主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的改变,加剧了不同种类乳酸菌的,淘汰了部分乳酸菌种类。答案(12分)(1)在最适温度条件下催化能力最强(2)酵母菌(3)先快速增长后趋于稳定氧气、营养物质、pH颠倒前的B层和颠倒后的A(或不翻动,或下)种间竞争(或竞争)4.(2015广东理综,29,16分)泡菜是我国的传统食

19、品之一,但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”,查阅资料得到图。(1)制作泡菜时,泡菜坛一般用水密封,目的是。乳酸菌发酵第一阶段的产物有 。(2)据图,与第3天相比,第8天后的泡菜更适于食用,因为后者;pH呈下降趋势,原因是。(3)该小组得到一株“优选”乳酸菌(亚硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍),拟参照资料的实验方案和食盐浓度(4%10%),探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低,并确定其最适条件。请你设计一个实验结果记录表,并推测实验结论。答案(16分)(1)创造无氧环境(1分)丙酮酸、H、ATP(3分)(2)亚硝

20、酸盐含量已接近最低水平(1分)乳酸积累(2分)(3)结果记录表(6分) 亚硝酸盐含量(单位:mg/kg)食盐浓度(%)乳酸菌发酵时间(d)123456789104普通优选7普通优选10普通优选注:其他合理答案酌情给分。推测实验结论:用“优选”乳酸菌制作泡菜,亚硝酸盐含量更低(1分)最适条件是亚硝酸盐含量最低时的食盐浓度和发酵时间(2分)考点二 微生物的实验室培养5.(2019课标全国,37,15分)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。号培养基:氯化钠(5

21、 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(15 g/L)。号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(45 g/L)。回答下列问题。(1)在号培养基中,为微生物提供氮源的是。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是。(2)若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会,其原因是。(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是。(4)假设从号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供和。答案(1)牛

22、肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法(4)能量合成其他物质的原料6.(2019课标全国,37,15分)物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是。(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌,应该选择菌落进一步纯化,选择的依据是 。(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确

23、定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期结果和结论,即 。(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,请完善相关内容。在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加,三处滴加量相同。一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明。答案(1)W(2)乙乙菌落周围出现透明圈,说明乙菌能降解W(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上,若细菌能生长,则说明该细菌能利用空气中

24、的氮气作为氮源(4)缓冲液缓冲液不能降解W酶E与天然酶降解W的能力相近7.(2019课标全国,37,15分)回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是 。硝化细菌在没有碳源的培养基上(填“能够”或“不能”)生长,原因是 。(2)用平板培养细菌时一般需要将平板(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是。(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过处理,

25、这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。答案(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌8.(2018课标全国,37,15分)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是 。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能。在照射前,适量喷洒,可强

26、化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是 。答案(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽 9.(2018课标全国,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分离培养酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是。(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进(填“

27、菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是。答案(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软考点三 微生物的分离与计数10.(2018课标全国,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基

28、中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培养基属于 培养基。(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的

29、菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是 。答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差11.(2018江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培养基时,按照培养基配方准确

30、称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的,及时对培养基进行分装,并进行灭菌。(2)取步骤中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤中将温度约(在25 、50 或80 中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤所示进行划线。下列叙述合理的有。a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和供应。为监测酵母的活细

31、胞密度,将发酵液稀释1 000 倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用2516型血细胞计数板计数5 个中格中的细胞数,理论上色细胞的个数应不少于,才能达到每毫升3109个活细胞的预期密度。答案(8分)(1)pH高压蒸汽(湿热)(2)50 (3)a、b、d(4)氧气无3012.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有。(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐

32、,以达到富集酚降解菌的目的。若如图平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加。(3)如图为连续划线法示意图,在图中(填图中序号)区域更易获得单菌落。(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为。管号123456苯酚浓度(mg/L)1如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释(填序号:51020)倍后,再进行比色。答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0

33、.813.(2016课标全国,39,15分)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);制作无菌平板;设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;将各组平板置于37 恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:(1)该培养基中微生物所需的氮来源于 。若要完成步骤,该培养基中的成分X通常是。(2)步骤中,实验组的操作是。(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个

34、菌落,这种结果说明在此次调查中出现了现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法(填“正确”或“不正确”)。答案(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间(3)污染不正确14.(2016课标全国,39,15分)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题:(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是 。(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有和。分离纯化时应挑选出的菌落作为候选

35、菌。(3)乳酸菌在-20 长期保存时,菌液中常需要加入一定量的(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。答案(1)无菌水(2分)泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落(3分)(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透明圈(2分)(3)甘油(2分)15.(2015课标全国,39,15分)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题:(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用 (填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单

36、菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用直接计数;若要测定其活菌数量,可选用法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕设计后续实验。答案(1)苏丹(或苏丹)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血细胞计数板稀释涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)教师专用题组1.

37、(2014课标,39,15分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将分解成。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注:“+”表示有,“-”表示无。据表判断,培养基甲(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素

38、分解菌,原因是;培养基乙(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 。答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌2.(2014课标,39,15分)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释

39、液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是 。(3)示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高的利用率。答案(15分)(1)检测培养基平板灭菌是否合格3.8107(每空2

40、分,共4分)(2)灼烧(2分)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3分)(3)B(2分)(4)溶解氧营养物质(每空2分,共4分)3.(2013课标,39,15分)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用法或法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用法接种于固体培养基表面,在37 培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四

41、种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明 ;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素。答案(15分)(1)划线稀释涂布(或涂布)(每空2分,共4分)(2)涂布(1分)(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(每空2分,共8分)(4)A(2分)4.(2011课标,39,15分)有些细菌可分解

42、原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。答案(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰【三年模拟

43、】时间:70分钟分值:100分一、选择题(每小题5分,共10分)1.(2020届山东等级考模拟,13)在实验室中可利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒,下列说法正确的是()A.葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内被分解B.制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖C.制作过程中酵母菌始终处于碱性环境D.酵母菌的发酵产物不会抑制自身的代谢活动答案B2.(2020届山东等级考模拟,20)生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域

44、,培养结果如图所示。下列说法正确的是(不定项选择)()A.倒成平板后直接培养可判断有无污染B.倒成平板后需要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌需要生长因子为乙或丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选答案AD二、非选择题(共90分)3.(2020届山东临沂阶段检测,36)微生物在自然界中无处不在,随人类对微生物认识的加深,人类对其利用越来越广泛。请回答下列问题:(15分)(1)生活中人们利用酵母菌、醋酸菌分别酿制果酒、果醋,与酵母菌相比,醋酸菌在结构上最明显的特点是。给予适宜的条件,即使没有经过严格的灭菌过程,也能够获得果酒、果醋,这是因为。(2)在制作腐乳时,需将长满毛霉的豆腐用盐腌制,其作用是

45、 和。(3)在工业生产中,可从被石油污染的土壤中分离出能分解石油的细菌。在分离时需用作唯一碳源的培养基培养土壤中提取的细菌,可采用的接种方法是。(4)经分离得到的菌种,通常再进行处理才可能得到更高效分解石油的微生物。为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力。答案(1)无核膜包被的细胞核酵母菌、醋酸菌的发酵产物会抑制其他微生物的生长(2)析出豆腐中的水分抑制杂菌的生长(3)石油稀释涂布平板法和平板划线法(4)诱变强4.(2020届湖南省长沙一中月考,38)牛奶是日常生活中经常食用的乳制品,对人体健康有很大好处。环保科技兴趣小组从某牛奶厂排污口获取水样,希望从

46、中筛选出能高效降解蛋白质的细菌。据有关知识回答下列问题:(15分)(1)有人认为食用高温加热的牛奶更易消化,理由是 。(2)为实现筛选目的,该兴趣小组使用了如下配方的培养液。蛋白质、K2HPO4、KH2PO4、(NH4)2SO4、CaCl2 、NaCl、 MgSO47H2O,加水定容该配方中,K2HPO4和KH2PO4的作用是 。试分析能否将该配方中的蛋白质换成葡萄糖?说明理由。 。(3)为实现目的菌株的分离和计数,应配制固体培养基,制成平板,再使用的方法接种。为检测所使用的平板灭菌是否彻底或是否被污染,操作方法是 。答案(1)高温使牛奶中蛋白质分子的空间结构变得伸展、松散,易被蛋白酶水解,更

47、易消化(2)为细菌生长提供无机盐,作缓冲剂维持细菌生长过程中pH的稳定不能,因为要筛选出能高效降解蛋白质的细菌,配制培养液时必须以蛋白质为唯一碳源和氮源,所以不能把蛋白质换成葡萄糖(3)稀释涂布平板选择未接种的平板在适宜条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生5.(2020届湖南衡阳一中期末,37)传统生物技术与我们现代的生活依旧很贴近,下面是几则实例,请分析回答下列问题。(15分)(1)图为某位同学设计的果酒制作装置。通气口一侧开关应(“打开”或“关闭”)才能达到目的。经过一段时间后,b处有气泡产生,该气体是。整个果酒制作过程中,酵母菌先进行有氧呼吸再进行无氧呼吸,进行有氧呼吸的目的是

48、。 (2)腐乳生产工艺:豆腐块长满菌丝的豆腐加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制参与a过程的微生物主要是,加盐的作用是,最后的腌制要密封的原因是 。 (3)某兴趣小组为了研究泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量变化,选取三只相同的泡菜坛,操作均正确,得出如图所示的结果。了解泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的目的是,据图可知,腌制到约第天以后再食用可以较好地避免亚硝酸盐对人体健康的危害。答案(1)关闭CO2使酵母菌大量繁殖(2)毛霉析水、调味、杀菌避免杂菌污染(3)掌握取食泡菜的时间106.(2019重庆渝高中学月考一,37)近年来,纪录片舌尖上的中国引发全民关注美食的热潮,其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。根据相关知识,回答关于果酒、果醋和腐乳制作的相关问题