临床血液学检验第二节 血小板止血作用

1、2022/10/61一、血小板的结构二、血小板的活化三、血小板的止血功能 第十章 血栓与止血检验的基础理论第二节 血小板止血作用(P291-300)2022/10/62普通显微镜下血小板扫描电镜图下血小板主要功能：参与机体止血与凝血2022/10/63一、血小板的结构血小板是一种无核的细胞2022/10/64（一）血小板的表面结构血小板膜 血小板膜蛋白 血小板膜脂质2022/10/65 血小板膜血小板膜 糖蛋白（glycoprotein，GP）糖脂膜蛋白(57)膜脂质 (35)糖类(8)鞘磷脂、甘油磷脂2022/10/66血小板膜糖蛋白结构模式图膜蛋白膜脂质2022/10/67主要血小板膜糖蛋

2、白国际名称CD名称特性GPaCD49b与GPa形成复合物，是胶原的受体GPbCD42c与GP形成复合物，是wWF受体，参与血小板粘附反应，缺乏或减少时血小板粘附功能减低GPcCD49f与GPa形成复合物，是Fn的受体，也是层素的受体GPaCD29与GPa和c形成复合物，是胶原和Fn的受体GPb和aCD41a（b/a）GPb与a形成复合物，是Fg的受体，参与血小板聚集反应；也是wWF和Fn的受体GPCD36是凝血酶敏感蛋白（TSP）受体GPCD42d是凝血酶受体，异常见于巨大血小板综合征GP是胶原的受体，免疫球蛋白超家族成员，血小板活化的主要激动剂，参与血小板粘附和聚集 GP CD42a GPb

3、形成复合物，作用同GPb2022/10/681膜蛋白：主要是糖蛋白（1）GPIb-IX复合物：最主要的糖蛋白之一。 GPIb：是血小板膜上含糖量 GPIb： 最多的GP，超过60%。结构： GPIb GPIX功能： A. VWF受体功能，如缺乏会引起“粘附功能障碍”。 （巨大血小板综合症） B凝血酶受体功能。 C维持血小板膜结构完整性的功能。2022/10/69（2）GPIIb-IIIa复合物: 是血小板上含量最多的膜糖蛋白。 GPIIb结构： GPIIIa 复合物是一个完整的功能单位，解 离导致此受体功能的完全丧失。 功能： 与GPIb-IX相似，是Fg的受体，如缺乏 会引起血小板无力症，聚

4、集功能障碍。2022/10/610Fn凝血酶TSP vWF胶原 FIBGPIa、Ib、IIb、IIIa（被ICSH统一命名）GPIc/IIaGPVGPIVGPIa/IIaGPIb/IXGPIIb/IIIa血小板主要糖蛋白受体：粘附功能聚集功能2022/10/6112、膜脂质由磷脂（鞘磷脂和甘油磷脂）、胆固醇、糖脂组成甘油磷脂磷脂酰胆碱 （PC ）磷脂酰乙醇胺 （PE ）磷脂酰丝氨酸 （PS）磷脂酰肌醇 （PI）血小板在未活化时PC 、PE和PI主要分布在血小板膜外侧面， 而PS主要分布在血小板膜内侧面，活化时，PS可转向外侧面， 可能成为PF3。 2022/10/612（二）血小板骨架系统和收

5、缩蛋白由微管、微丝及膜下细丝组成它们在维持细胞形态、收缩、释放中起着重要 的作用骨架系统又称为溶胶-凝胶区2022/10/613血小板膜收缩结构模式图1. 微 管 Microtubule2. 微 丝 Microfilaments 3. 膜下细丝 Submembrane filaments血小板的骨架系统模式图2312022/10/614（三）血小板细胞器和内容物a颗粒致密颗粒溶酶体2022/10/6151.a颗粒（a-granules）每个血小板中有十几个，圆形，直径为250-500nm，颗粒有界膜包围，内容物呈中等电子密度它是血小板可分泌的蛋白质的主要贮存部位这些蛋白质在促进血小板黏附、聚集

6、、细胞生长、血块收缩及血块溶解中起着重要的作用2022/10/616血小板三种颗粒内容物致密颗粒 a颗粒 溶酶体ADP血小板第4因子（ PF4）酸性水解酶ATP-血小板球蛋白（-TG） -半乳糖苷酶5-HT血小板衍生促生长因子（PDGF）-葡萄醛酸酶Ca2+ 凝血酶敏感蛋白（TSP） 弹性硬蛋白酶抗纤溶酶因子、Fg、vWF、HMWK、 a亚单位胶原酶焦磷酸盐通透因子、杀菌因子、趋化因子肝素酶a1抗胰蛋白酶（a1-AT）a2巨球蛋白（a2-M）C1-抑制剂（a2-INH）纤溶酶原活化抑制剂（PAI-1）蛋白S（PS）、白蛋白纤维连结蛋白(Fn)、玻连蛋白(Vn)2022/10/617a颗粒部分蛋

7、白质特点(上)血小板特有蛋白质 血小板第4因子（platelet factor 4，PF4） 能中和肝素的抗凝活性 -血小板球蛋白（-thromboglobulin，-TG）， 能抑制血管内皮细胞合成PGI2 当血小板被活化时，两者从a颗粒中释放到血中凝血酶敏感蛋白（thrombospondin，TSP） 是血小板的主要糖蛋白，主要由血小板合成，其主要作用是促进血小板聚集血小板活化分子标志物2022/10/618a颗粒部分蛋白质特点(下)纤维连接蛋白（fibronectin，Fn） 是一种高分子量糖蛋白。当血小板被胶原或凝血酶活化后，Fn从颗粒中释放并结合到血小板膜表面，介导了血小板对胶原的黏

8、附作用血小板衍生生长因子 （platelet derived growth factor，PDGF） 是一种碱性糖蛋白，具有细胞分裂活性。2022/10/6192.致密颗粒（dense granules）又称为颗粒每个血小板中有4-8个颗粒，直径为200-300nm，圆形，颗粒有界膜包围，颗粒与界膜之间常有一层透亮的间隙主要贮存低分子量的活性物质2022/10/620血小板三种颗粒内容物致密颗粒 a颗粒 溶酶体ADP血小板第4因子（ PF4）酸性水解酶ATP-血小板球蛋白（-TG） -半乳糖苷酶5-HT血小板衍生促生长因子（PDGF）-葡萄醛酸酶Ca2+ 凝血酶敏感蛋白（TSP） 弹性硬蛋白酶

9、抗纤溶酶因子、Fg、vWF、HMWK、 a亚单位胶原酶焦磷酸盐通透因子、杀菌因子、趋化因子肝素酶a1抗胰蛋白酶（a1-AT）a2巨球蛋白（a2-M）C1-抑制剂（a2-INH）纤溶酶原活化抑制剂（PAI-1）蛋白S（PS）、白蛋白纤维连结蛋白(Fn)、玻连蛋白(Vn)2022/10/621致密颗粒中的活性物质钙离子：较多，约占血小板钙离子的60，所以密度很高，血小板被活化后能释放到血中ADP和ATP：血小板中大约65的ATP、ADP贮存其中。 ATP是维持血小板形态、功能和代谢活动所需的能量来源； ADP与血小板聚集有关，当血小板被活化时，可释放出而引起血小板聚集5-HT：是血小板从血浆中主动

10、摄取的，当血小板被活化时，释放到血中，具有促进血小板聚集和血管收缩的作用2022/10/6223.溶酶体（lysosome）又称为颗粒每个颗粒血小板数目少，直径为175-250nm，颗粒有界膜包围，形态上不易与a颗粒区分是血小板的消化结构，其中含有丰富的水解酶及蛋白酶溶酶体的内容物只有在强诱导剂作用下才发生释放反应2022/10/623血小板三种颗粒内容物致密颗粒 a颗粒 溶酶体ADP血小板第4因子（ PF4）酸性水解酶ATP-血小板球蛋白（-TG） -半乳糖苷酶5-HT血小板衍生促生长因子（PDGF）-葡萄醛酸酶Ca2+ 凝血酶敏感蛋白（TSP） 弹性硬蛋白酶抗纤溶酶因子、Fg、vWF、HM

11、WK、 a亚单位胶原酶焦磷酸盐通透因子、杀菌因子、趋化因子肝素酶a1抗胰蛋白酶（a1-AT）a2巨球蛋白（a2-M）C1-抑制剂（a2-INH）纤溶酶原活化抑制剂（PAI-1）蛋白S（PS）、白蛋白纤维连结蛋白(Fn)、玻连蛋白(Vn)2022/10/6244.其他线粒体：主要功能是进行生物氧化，产生ATP过氧化酶体：与脂类代谢有关糖原：是一种细颗粒状内含物还可见内质网、小泡和高尔基膜囊结构等2022/10/625（四）血小板特殊膜系统开放管道系统 致密管道系统 2022/10/626 1、开放管道系统（open canalicular system，OCS）OCS的膜来源于巨核细胞的质膜，是

12、血小板膜凹陷于血小板内部形成的曲折管道系统OCS不仅增加了与外界接触的面积，将外界的刺激信息传递到血小板内部，而且也是血小板与血浆之间物质交换的通道血小板释放反应中颗粒内容物的释放，就是通过OCS释放到血小板外2022/10/627 2、致密管道系统（ dense tubular system，DTS ）DTS的膜来源于巨核细胞的粗面内质网，它散在于血小板胞质中，与外界不相通DTS是血小板贮存钙离子的场所，也是合成TXA2的场所DTS具有巨核细胞和血小板所特有的一种酶即血小板过氧化物酶（platelet peroxidase ，PPO），通过检测PPO对鉴别巨核细胞和其他细胞有重要的价值202

13、2/10/628二、血小板的活化血小板形态改变血小板表面特殊蛋白的表达血浆特异产物水平增高血小板活化的表现血小板收缩的基础血小板表面物质表达基础血小板活化的分子基础血小板活化的代谢基础：花生四烯酸代谢2022/10/6291、血小板形态改变变成球形，出现突起，使血小板变形、伸展和伪足形成活化激活剂:thrombin、collagen、TXA2、PAF、ADP等（一）血小板活化的表现2022/10/6302、血小板表面特殊蛋白的表达GPIIb/IIIapleteletP- selectin颗粒膜蛋白-140 (granule membrane protein-140,GMP-140)血小板活化分

14、子标志物2022/10/6313、血浆血小板特异产物水平增高 血小板释放-TGPF4TXA2血小板活化分子标志物活化2022/10/632是血小板在活性物质作用下发生了骨架蛋白的收缩运动1.血小板收缩的基础（二）血小板活化的分子基础常见活性物质：凝血酶、胶原、TXA2、PAF、ADP、肾上腺素等2.血小板表面物质表达基础血小板活化后一些特殊蛋白的表达或数量明显增多明显增多的特殊蛋白： P-选择素、GPb/a2022/10/633葡萄糖glucose糖酵解丙酮酸乳酸三羧酸循环CO2 1.能量代谢（三）血小板活化的代谢基础2022/10/634 AA代谢图异构酶异构酶TXA2PGI22.膜磷脂代谢

15、图 10-5 花生四烯酸代谢示意图2022/10/635三、血小板的止血功能黏附功能释放反应聚集功能血块收缩促凝作用2022/10/636（一）黏附功能(adhension)是指血小板粘附于血管内皮下组分或其他物质表面的能力， 它在血管初期止血（即一期止血）中起着重要的作用参与血小板黏附的因素包括血小板、血浆中桥联物质和非血小板表面 在体内，主要是血管内皮下组分 如：胶原、微纤维及基底膜等 在体外，为带负电荷的物质上 如玻璃、白陶土、金属等非血小板表面2022/10/637血小板黏附功能的主要因素：vWF是血浆中的桥联物质（vWF至关重要）血小板质膜上的GPIb/复合物，是vWF的受体。血小板

16、GPb/a也可通过与vWF、Fn等 黏附蛋白作用参与黏附。2022/10/638（二）释放反应（release reaction）是指血小板被活化后，血小板储存颗粒中的内容物通过OCS释放到血小板外的过程正常血小板在聚集诱导剂作用下均能引起释放反应致密体内容物在受弱刺激如ADP、低浓度胶原作用下，即可诱导释放反应；溶酶体内容物需要在强刺激物作用下才可诱导释放反应血小板的功能2022/10/639血小板释放反应机理一般认为诱导剂作用于血小板膜上的相应受体，胞质中钙离子浓度增加，使收缩蛋白收缩，颗粒中的内容物趋向中央，颗粒膜与OCS膜融合，内容物即通过OCS释放出来血小板释放反应的产物ADP、TX

17、A2等可进一步引起血小板活化和聚集 血小板的功能2022/10/640血小板诱聚和促释放反应物质低分子物质蛋白水解酶颗粒或巨分子凝集素ADP凝血酶胶原瑞斯托霉素肾上腺素胰蛋白酶微纤维多聚赖氨酸5-HT纤溶酶内毒素酵母多糖血管加压素蛇毒细菌牛因子花生四稀酸病毒抗血小板抗体PGG2/PGH2肿瘤细胞TXA2免疫复合物PAF乳胶颗粒A23187IgG聚集物2022/10/641（三）聚集功能（aggregation）是指血小板与血小板之间的黏附形成聚集体聚集可有两类不同机制诱发 一类是诱导剂 另一类是流动状态下的剪切变应力血小板的聚集诱导剂分为两类： 非生理性和生理性2022/10/642参与血小板

18、聚集的因素GPIIb/IIIa、Ca2+及Fg（三者缺一不可） 静息血小板上的GPIIb/IIIa并不与Fg结合，诱导剂作用于膜上受体后，使血小板被活化，GPIIb/IIIa的空间构型变化，使Fg受体暴露除Fg外的一些其他大分子黏附蛋白如vWF、Fn也可与GPIIb /IIIa 结合介导血小板聚集反应血小板聚集还可流动状态下的剪切变应力直接作用而不需要任何诱导剂，其机理与诱导剂者不同。2022/10/643血小板聚集类型初发聚集(又称为第一相聚集): 指在外源性诱导剂作用下发生的血小板聚集，是可逆的，它依赖GPIIb/IIIa 和Fg的相互作用，在一定条件下血小板可重新散开。血小板的功能2022/10/644血小板聚集类型次发聚集(又称为第二相聚集): 指在血小板释放的内源性诱导剂作用下的聚集，是不可逆的。它不仅依赖GPIIb/IIIa和Fg的相互作用，还依赖血小板释放反应，如释放反应障碍，则无第二相聚集出现。血小板的功能2022/10