第九章动物实验基本操作技术课件

1、2022/10/111第九章 动物实验基本操作技术2022/10/111第九章 动物实验基本操作技术2022/10/1122022/10/112动物实验准备引进动物动物抓取固定动物编号标记给药途径和方法动物麻醉体液采集实验外科技术操作术前准备术中技术术后护理动物处死动物实验基本操作技术动物实验准备引进动物动物抓取固定动物编号标记给药途径和方法动一、大、小鼠的抓取固定第一节 实验动物的抓取与固定一、大、小鼠的抓取固定第一节 实验动物的抓取与固定固定盒固定盒二、豚鼠的抓取固定法二、豚鼠的抓取固定法三、家兔的抓取固定法以上抓取方法都是错误的三、家兔的抓取固定法以上抓取方法都是错误的以上两种固定方法均

2、不正确以上两种固定方法均不正确一、大、小鼠的性别鉴定第二节 性别鉴定外生殖器和肛门距离长，中间有毛的是雄性一、大、小鼠的性别鉴定第二节 性别鉴定外生殖器和肛门距离长Female Male 二、兔的性别鉴定Female Male 二、兔的性别鉴定一、大、小鼠 1. 根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）第三节 年龄的大致判断日龄/d外观形态特征1仔鼠裸体鲜红3耳壳露出表皮4脐带瘢痕脱落5能翻身8能爬行一、大、小鼠第三节 年龄的大致判断日龄/d外观形态特征1仔日龄/d外观形态特征10能听到声音911全身被白毛，门齿长出1315眼皮张开，能跳跃，能抓取东西18以后能自行采食，独立生活日龄/d外观形态

3、特征10能听到声音911全身被白毛，门齿长第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件 2. 根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 5 10 15 20 25 30体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.0 2. 根据体重鉴定日龄日龄/d初生 5 大鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 10 20 30 40 体重/g67 1725

4、3550 5590 100150日龄/d50 60 70 80体重/g150210 170240 210270 240320 大鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 10 2 三、家兔 家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔：门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔：门齿暗黄,厚而长,排列不整齐,有破损1岁家兔趾爪：红色与白色长度相等；1岁以下：红多于白；1岁以上：白多于红。 三、家兔 五、犬 犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。 五、犬年龄 犬齿更换和磨损情况2个月以下仅有乳齿(白、细、尖)24个月更换门齿46个月更换犬齿(白，牙尖圆钝)610个月更换臼齿

5、1岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2岁下门齿尖突部分磨平3岁上、下门齿尖突大部分磨平45岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄68岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损910岁唇部、胡须发白10岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白年龄 犬齿更换和磨损情况2个月以下仅有乳齿(白、细第四节 妊娠检查妊娠诊断(pregnancy diagnosis)：在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发育，避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。第四节 妊娠检查妊

6、娠诊断(pregnancy diagno外部检查法摸胎法阴道检查法直肠检查法超声波检查法孕酮含量测定法青蛙试验妊娠检查方法外部检查法妊娠检查方法第五节 分组与编号动物实验前对实验动物进行随机分组和编号标记 一、随机分组：随机数字表（随机抽样原理） （一） 为二组 例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。 分组方法：随机点落在是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个随机数字，如下：第五节 分组与编号动物实验前对实验动物进行随机分组和编号标随机数字：78 38 69 57 91 0 37 45 66

7、82 65 41随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组：动物编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12组 别：乙 乙 甲 甲 甲 乙 甲 甲 乙 乙 甲 甲乙组5个，甲组7个，两组数字不等继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组，从上面最后一随机数字41，接下去抄一个数为62，以7除之(因甲组原分配7只)得6，即把原分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。随机数字：78 38 69 57 91 0 37 45 如果甲组多两个，则接下去抄两个数。分别以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲，余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后各组鼠的编号为： 组别 鼠的编号 甲组 3

8、 4 5 7 8 12 乙组 1 2 6 9 10 11 如果甲组多两个，则接下去抄两个数。分别以8，7除之， (二) 为三组：A组、B组、C组 分组方法：落点是随机数字表第40行17列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数字， 以3除各随机数字，若余数为l，即该鼠归A组；余数为2，归人B组；余数为3，归入C组。 动物编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 随机数字：08 27 01 50 15 29 39 39 43 79 69 10 除 3 余数： 2 0 1 2 0 2 0 0 1 1 0 1 组 别： B C A B C B C C A A C A 调整组别

9、：B (二) 为三组：A组、B组、C组 （三） 每个动物为一组： 例：设有A，B，C，D，E，F代表的6只家兔，试用完全随机法将其每只分为一组。 分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若为第21行第17列的33，则从33向左抄用6个数字，然后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即将余数写下。 随机数字 33 46 9 52 68 7 除 数 6 5 4 3 2 1 余 数 3 1 1 1 2 1 随机排列 C A B D F E （三） 每个动物为一组： 二、编号标记方法 实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。 1体表颜料着色法 一般对

10、短期试验的白色动物可用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有： 红色：0.5中性红或品红溶液； 黄色：35苦味酸溶液或8090苦味酸酒精饱和液； 咖啡色：2硝酸银溶液； 黑色：煤焦油酒精溶液。 二、编号标记方法 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6， 右侧从前至后依次为7、8、9。用黄色表示个位数，红色表示十位数。 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背 2个体耳号标记法 3. 个体断趾标记法 4. 耳号钳标记法 5. 挂牌法 2个体耳号标记法第九章动物实验基本操作技术课件第六节 常规采血方法 一、大、小鼠的采血方法 1颈静脉或颈动脉采血

11、2股静脉或股动脉采血 3心脏采血 4尾部采血 5眼眶采血 6断头取血第六节 常规采血方法 一、大、小鼠的采血方法2022/10/1139眼窝静脉丛采血尾部采血2022/10/1139眼窝静脉丛采血尾部采血2022/10/1140心脏采血2022/10/1140心脏采血第九章动物实验基本操作技术课件第九章动物实验基本操作技术课件二、豚鼠的采血方法 1耳缘剪口采血 2心脏采血方法同大、小鼠。 3股动脉采血方法同大、小鼠。 4后肢背中足静脉采血二、豚鼠的采血方法第九章动物实验基本操作技术课件三、家兔的采血方法 1.心脏采血 2.耳中央动脉采血 3.耳静脉采血 4.颈总动脉三、家兔的采血方法第九章动物

12、实验基本操作技术课件 四、狗、猫的采血方法 1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血 2股动脉采血 3. 心脏采血同大、小鼠心脏采血。 4耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血。 四、狗、猫的采血方法 采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、Cl-

13、离子浓度，必须采取动脉血液。 采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。1）采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在2528，冬季，1520为宜；2）采血用具有采用部位一般需要进行消毒；3）采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；4）若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。采血时要注意1）采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在2528，冬 部 位 动物种类 a. 尾静脉大鼠、小鼠 b. 耳缘静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 c. 眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠取少量血 部 位 动物种类 a. 部 位 动物种类后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫耳中央动脉兔颈静脉

14、狗、猫、兔心脏豚鼠、大鼠、小鼠断头大鼠、小鼠取中量血 部 位 动物种类后肢外 部 位 动物种类股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔心脏狗、猴、猫、兔颈静脉马、牛、山羊、绵羊摘眼球大鼠、小鼠取大量血 部 位 动物种类股动脉动物种类最大安全采血量 (ml)最小致死采血量 (ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500猎狗50200猴15604. 最大安全采血量与最小致死采血量动物种类最大安全采最小致死采小鼠0.20.3大鼠12豚鼠512022/10/1154第七节 麻醉方法一、实验动物的麻醉方法全身麻醉法：吸入法，注射法局部麻醉法：浸润麻醉，表面麻醉2022/10/1154第七节 麻

15、醉方法一、实验动物的麻醉2022/10/1155（一）全身麻醉法1、吸入法麻醉药：乙醚氯仿三氟乙烷2022/10/1155（一）全身麻醉法1、吸入法麻醉药：2022/10/11562、注射法静脉注射、肌肉注射、腹腔注射麻醉药：巴比妥类药物、 氯胺酮、 乌拉坦、 水合氯醛（一）全身麻醉法2022/10/11562、注射法（一）全身麻醉法2022/10/1157（二） 局部麻醉法麻醉部位：皮肤、肌下组织、深层组织 1% 盐酸普鲁卡因 局部浸润麻醉 0.022盐酸可卡因 表面麻醉2022/10/1157（二） 局部麻醉法麻醉部位：皮肤、肌2022/10/1158麻醉药物应用原则：依据动物体重计算麻醉

16、药物的剂量；依据动物生命体征变化控制给药速度；掌握宁少勿多、分阶段给药的方式；麻醉时需注意保温。针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。2022/10/1158麻醉药物应用原则：针对不同的动物，选2022/10/1159麻醉具体操作：家兔全身麻醉麻醉剂：3%戊巴比妥钠，1ml/kg（30mg/Kg ）前1/2快速推入，使动物能顺利、快速地渡过兴奋期；后1/2速度宜慢，且边注射边注意观察动物的生命体征变化，当确定已达到麻醉效果时，即停止给药，不必急于将剩余的麻醉药物全部推入。给药方法：耳缘静脉注射2022/10/1159麻醉具体操作：家兔全身麻醉麻醉剂：32022/10/1160

17、麻醉成功标志角膜反射迟钝或消失肢体肌肉松弛疼痛反射消失呼吸变深变慢 2022/10/1160麻醉成功标志角膜反射迟钝肢体肌肉松弛第八节 给药途径与方法注射法分为：皮下注射、皮内注射、肌肉注射 腹腔注射、静脉注射脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、关节腔注射和心内注射投入法经消化道投入：口腔、胃腔或肠管经呼吸道投入：鼻腔或气管第八节 给药途径与方法注射法分为：皮下注射、皮内注射、肌肉 （一）皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。 注射部位：狗、猫大腿外侧 兔背部/耳根部 豚鼠后大腿内侧/小腹部；大白鼠侧下腹部 （二）皮内注射局部脱毛消毒绷紧

18、皮肤30度进针挑起针头稍刺入可注射皮肤表面鼓起一小皮丘。 （一）皮下注射第九章动物实验基本操作技术课件 （三）肌肉注射 选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部 （三）肌肉注射 选肌肉发达，无大血管通过的部 （四）腹腔注射 用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推0.30.5cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。 （四）腹腔注射为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，第九章动物实验基本操作技术课件 （五）静脉注

19、射注射时尽量使血管充盈 1兔：兔耳缘静脉 先拔毛，手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈 固定：左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面 进针：6号针头从静脉的远端进针，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入 结束：然后拔出针头，用手压迫针眼片刻 （五）静脉注射注射时尽量使血管充盈2022/10/11682022/10/11682小白鼠和大白鼠尾静脉注射固定动物（鼠筒或烧杯），露出尾巴，4550温水浸润半分钟或酒精擦拭，血管充盈，表皮角质软化固定：以左手食指和中指捏住鼠尾，无名指从下面托起，以大拇指和小指夹住尾巴的末梢注射：进针，先缓注少量药液，无阻力3狗

20、前肢内侧皮下头静脉、后肢小隐静脉 侧卧固定，剪毛，用胶皮带扎紧静脉近端，从远端进针，有回血后，松开绑带（或两手），缓缓注入药液。 2小白鼠和大白鼠尾静脉注射第九章动物实验基本操作技术课件注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.21.01325510515肌肉0.10.20.20.50.20.50.5125静脉0.20.51215310515皮下0.10.50.510.5213310几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升） 注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.21.013255动物种类体重（g）最大容积（ml）小鼠301.025-300.820-240.5大鼠3008.0250-3006.0200-2494

21、.0-5.0100-1993.0豚鼠3006.0250-3004.0-5.0家兔35002002500-35001502000-2400100猫3000100-1502500-300050-80犬10,000-15,000200-500（六）经口给药多用灌胃法 常用动物一次灌胃能耐受的最大容积 见右表动物种类体重（g）最大容积（ml）小鼠301.025-30 1小鼠、大鼠（或豚鼠） 灌胃针安注射器上固定动物成垂直体位经口腔缓慢插入灌胃针针插入时应无阻力注射液体。灌胃针插入位置：小鼠34cm 大鼠或豚鼠46cm 灌胃量：小鼠为0.21ml，大鼠、豚鼠为15ml。 1小鼠、大鼠（或豚鼠）第九章动物实验基本操作技术课件 2狗、兔、猫、猴固定动物将扩口器放入动物口中，用绳固定于嘴部橡皮导管（如导尿管），经扩口器上的小圆孔插入将药液灌入。 2狗、兔、猫、猴 （七）其它途径给药1. 呼吸道给药挥发性类药