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文档简介
1、促红细胞生成素促红细胞生成素基因工程药物促红细胞生成素(EPO)基因工程药物EPO的概念EPO的用途EPo的纯化历EPO的销售情及其疗效史及工艺流程情况及其前景EPO什么是EPO?EPO:是促红细胞生成素( Erythropoietin)的英文简称。e促红细胞生成素:最初是从肾脏中分离出来能刺激前体红细胞增生、分化的一种细胞因子。e人体血液中的促红细胞生成素:是由肾脏和肝脏分泌的一种激素样物质,能够促进红细胞生成。它与其受体EPOR结合后共同介导缺氧的生理反应。什么是EPO?EPO的用途ca医疗用途:增加红血球的数目,用于贫血、组织断离、早产儿,用在癌学和血液学方面ca体育用途(兴奋剂):增加
2、训练耐力和训练负荷,属于国际奧委会规定的违禁药物。在2008年北京奥运会中第一例的兴奋剂。EPO的用途EPO的疗效1、肾性贫血患者EPO水平较低,在进行治疗过程中,往往通过注射EPO来提高体内EPO水平进行治疗,从而帮助病人增加红细胞数量,此时EPO水平有所上升。2、其他贫血如缺铁性贫血、巨细胞性贫血患者EPO水平不降低,但也可以使用EPO治疗,此时浓度也会有所升高。a3、再生障碍性贫血和骨髓造血功能不全患者EPo水平升高。EPO的疗效EPo的纯化历史1、 Miyake的七步法:纯化步骤太多,对设备及操作要求也较高,不适合工业生产的特点2、 Spivak利用凝集素亲和层析纯化EPO:由于凝集素
3、亲和层析凝胶易被杂蛋白不可逆吸附,使得分离效果降低,成本增高,也不利于大规模生产3、近年来则利用三步层析法三步纯化基本流程等EPo的纯化历史EPo的工艺流程三步层析法1、染料配基亲和层析反相疏水层析离子交换层析;2、染料配基亲和层析反相疏水层析分子筛层析;3、反相疏水层析离子交换层析分子筛层析。EPo的工艺流程EPo的工艺流程三步纯化基本流程第一步:反相柱色谱样品浓缩约967%透析第二步:DEAE离子交换色谱第三步:分子筛色谱总回收率30%比活1.5*10U/g蛋白EPo的工艺流程第一步:反相色谱令C6反相柱(2cm*2cm)(创新生物技术公司)令流程:上样50mmin(柱结合量约5mg蛋白m
4、介质)去离子水平衡至检测基线10%80%乙醇胍线性梯度洗脱检测并收集含EPO主峰ELsA测定令结果:60%乙醇1moL盐酸胍洗出EPo第一步:反相色谱透析令透析液:10倍体积的10 mmol/L Tris HCl(pH75)-2%蔗糖缓冲液令透析次数:2令时间:56h透析促红细胞生成素共19张课件促红细胞生成素共19张课件促红细胞生成素共19张课件促红细胞生成素共19张课件促红细胞生成素共19张课件促红细胞生成素共19张课件促红细胞生成素共19张课件谢谢46、我们若已接受最坏的,就再没有什么损失。卡耐基47、书到用时方恨少、事非经过不知难。陆游48、书籍把我们引入最美好的社会,使我们认识各个时代的伟大智者。史美尔斯49、熟读唐诗三
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