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文档简介

大肠菌群检测方法进入无菌室步骤1．进入无菌室前应翻开紫光灯进行灭菌，时间为0。5—1小时。2．关灯后05小时后放可进入。3．进入换衣间改换衣服，佩戴口罩、帽子、鞋套实验步骤1，进入无菌室后，先把酒精灯点燃，而后在用酒精棉进行手部消毒。（酒精棉是用75%的酒精加入脱脂棉中制成）2，准备双料管3根，单料管6根，培育皿7个。3，直接从原液中汲取10ml放入双料管，3根每根各10ml）4，再汲取原液1ml放入单料管中（3根每根各1ml）5，再汲取原液1ml放入培育皿中（2个培育皿各1ml）6，再汲取原液1ml放入盐水管中制成－梯度的样液7，改换一根吸管，从－1梯度的样液吸取1ml样液放入单料管中（3根每根各1ml）8，再汲取－1梯度样液1ml放入培育皿中（2个培育皿各1ml）9，再把每个培育皿中到入营养琼脂平铺底部摇允（注另作3个培育皿：空气空白，把培育皿翻开十分钟倒入营养琼脂平铺底部摇匀。琼脂空白，把培育皿中倒入营养琼脂平铺底部摇匀。盐水空白，吸1ml生理盐水放入培育皿中，倒入营养琼脂平铺底部摇匀。）10，把所有作好的放入培育箱中，温度36C＋－1×C，大肠24H＋－2H，菌落48H＋－2H，（待培育皿中的琼脂凝结后反转过来放入培育箱中）11，梯度：－1梯度为1ml原液加入9ml生理盐水配成2梯度为1ml－1梯度样液加入9ml生理盐水配成3梯度－4梯度配制方法和－1、－2梯度的配制方法同样12，假如大肠初发酵产生气泡，用接种笔沾一个产气的液在伊红美兰平板上画之字形而后放入培育箱中36C，24H＋－2H。（接种笔在每次使用前一定在酒精灯上消毒。所画之形不可以划破伊红美兰琼脂表面）13，拿出后在用接种笔在伊红美兰平板之字形上挑菌，放入乳糖复发酵管中，而后再培育36C＋－1C，24H＋＋－2H。14，再在伊红美兰平板之字形上挑菌，放到载玻片上作镜检。（方法见标准）15，只有镜检成紫红色和乳糖复发酵管产气同时建立的状况下，才能判定这根管是

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