铜绿假单胞菌课件

铜绿假单胞菌蒋月婷

铜绿假单胞菌非发酵菌(NonfermentativeBacilli)定义----一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌非发酵菌(NonfermentativeBacilli)发酵型氧化型产碱型发酵型氧化型概述非发酵菌：G-b葡萄糖O/－需O2或兼性厌O2动力+/－

氧化酶+/－分类：假单胞菌属产碱杆菌属不动杆菌属黄杆菌属莫拉杆菌属窄食单胞菌属金氏杆菌属艾肯菌属土壤杆菌属丛毛单胞菌属等概述非发酵菌：G-b葡萄糖O/－非发酵菌分离率非发酵菌分离率假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群

rRNAⅠ群/假单胞菌属

rRNAⅡ群/伯克菌属

rRNAⅢ群/丛毛单胞菌属、食酸菌属

rRNAⅣ群/短波毛单胞菌属

rRNAⅤ群/窄食单胞菌属

其它：鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群假单胞菌属Pseudomonas种类：铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)荧光假单胞菌(P.fluorescence)恶臭假单胞菌(P.putica)斯氏假单胞菌(P.stutizeri)曼多辛假单胞菌(P.mendocina)产碱假单胞菌(P.alcaligenes)假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)假单胞菌属Pseudomonas种类：假单胞菌属Pseudomonas共同特点：G-b菌体细长单端鞭毛无芽胞

专性需O2

营养要求不高

35℃生长，少数4℃、42℃生长葡萄糖O/－动力+氧化酶+可产多种色素：绿脓素荧光素脓玉红素

假单胞菌属Pseudomonas共同特点：各种菌产生的色素

菌名色素颜色铜绿假单胞菌绿脓素、红脓素、青脓素、荧光素蓝、红、黑、黄色荧光假单胞菌荧光素黄绿色恶臭假单胞菌荧光素黄绿色斯氏假单胞菌未定名黄色素黄色洋葱伯克霍尔德菌未定名黄色素、紫色素黄色、紫色腐败希瓦讷拉菌未定名色素淡红褐色各种菌产生的色素抵抗力：较强，对多种抗生素耐药临床意义：分布广泛，条件致病菌，主要引起皮肤粘膜受损部位感染和各种医院内感染假单胞菌属Pseudomonas抵抗力：较强，对多种抗生素耐药假单胞菌属Pseudomona

各种标本血平板和Mac平板可疑菌落涂片革兰染色革兰阴性杆菌氧化酶(+)、OF：O

非发酵菌鉴定系统鉴定到种

微生物检验程序各种标本药敏试验

假单胞菌属和不动杆菌属可做K-B法药敏试验，嗜麦芽窄食单胞菌只有3种药物的K-B法药敏标准，其余需用稀释法或Etest法药敏试验抗生素敏感试验：A组：头孢他啶、美洛西林或替卡西林、哌拉西林、庆大霉素B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星C组：头孢噻肟或头孢曲松、氯霉素、奈替米星U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星或氧氟沙星、磺胺甲基异恶唑抗生素敏感试验：铜绿假单胞菌P.aeruginosa铜绿假单胞菌形态：G-b菌体长短不一球杆状或长丝状

单端单鞭毛动力+无芽胞特性：专性需氧

营养要求不高35℃+4℃－

42℃+可形成多种不同形态的菌落产多种色素(主要为绿脓素、荧光素)铜绿假单胞菌形态：G-b菌体长短不一球杆状或长丝状铜绿假单胞菌生化反应：氧化酶+OF：O硝还+N2+

液化明胶+枸橼酸盐+精双水解+乙酰胺酶+吲哚-生化反应：革兰染色铜绿假单胞菌革兰染色铜绿假单胞菌电镜图铜绿假单胞菌电镜图铜绿假单胞菌抗原：O抗原(外膜蛋白-保护性抗原脂多糖-型特异性)

H抗原

血清学分型

抵抗力：抵抗力强耐干燥不耐热

多重耐药

在室温水中长期生存4℃不生长

铜绿假单胞菌抗原：O抗原(外膜蛋白-保护性抗原铜绿假单胞菌致病性广泛存在环境中的条件致病菌，是院内感染主要病原菌可引起皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染、囊性纤维变性等有多种毒力因子：包括菌毛、荚膜多糖、内毒素、外毒素、绿脓菌素、蛋白酶、磷脂酶等铜绿假单胞菌致病性铜绿假单胞菌粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵入荚膜：多糖类物质抗吞噬细胞的吞噬作用；使细菌锚泊在细胞表面，与呼吸道感染有关内毒素、外毒素绿脓菌素：绿色色素，由铜绿假单胞菌的RpoS基因编码产生的代谢产物，具有氧化还原活性的化合物，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基团，引起组织损伤。在致病中起重要作用弹性蛋白酶：降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和出血；降解补体和白细胞蛋白酶抑制物；可与相应抗体形成复合物，沉积于感染组织中磷脂酶C粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵微生物检验采集标本：各种临床标本

医疗器械

环境用品检验方法：直接镜检

分离培养(血平、MAC平板)

鉴定分型：血清学分型、质粒指纹图谱分型、脉冲场凝胶电泳分型等微生物检验采集标本：各种临床标本

脓液痰尿液等血液环境用品分离培养直接涂片染色肉汤增菌血平板37℃18-24h可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味）初步鉴定最后鉴定菌落色素非发酵菌鉴定系统鉴定

革兰阴性杆菌氧化酶(+)血清分型检验程序

分离培养普平：18-24h圆形大小不一边缘不整扁平湿润常呈融合态琼脂被染成绿或黄绿血平：扁平湿润有金属光泽琼脂被染成蓝绿或灰绿有溶血环MAC平：微小无光泽半透明

48h后菌落呈棕色

分离培养普平：18-24h圆形大小不一边缘不整鉴定初步鉴定

菌体形态菌落特征产色素气味氧化酶最终鉴定非发酵菌生化鉴定系统

API-NE试条

鉴定初步鉴定细菌耐药机制外膜通透性降低产生灭活酶或钝化酶主动外排系统将抗生素泵出胞外抗菌药物作用靶位改变膜孔蛋白突变生物膜屏障作用各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中都可能发生耐药。初代敏感菌株在治疗3－4天后可能发生耐药，有必要重复分离菌株本菌对多种抗生素天然耐药，常用三代头孢和氨基糖苷类联合治疗细菌耐药机制鉴定结果分析从临床标本中分离出来的铜绿假单胞菌，需要排除污染因素铜绿假单胞菌下呼吸道感染需连续三次痰培养阳性才能确立。鉴定结果分析典型型大肠菌样型粘液型侏儒型粗糙型铜绿的菌落分型典型型铜绿的菌落分型粘液型（麦康凯平板）粘液型（血平板）菌落光滑凸起成粘液状粘液型（麦康凯平板）粘液型（血平板）菌落光滑凸起侏儒型（麦康凯平板）细小，无光泽半透明菌落侏儒型（麦康凯平板）细小，无光泽半透明菌落典型型（麦康凯平板）菌落呈灰绿色大小不一扁平湿润边缘不规则呈伞状伸展表面常可见金属光泽

典型型（麦康凯平板）菌落呈灰绿色大小不一扁平湿润典型型（普通平板上）产绿脓素琼脂染成黄绿色典型型（普通平板上）产绿脓素粗糙型（麦康凯平板）菌落中央凸起边缘扁平表面粗糙粗糙型（麦康凯平板）菌落中央凸起大肠型（麦康凯平板）菌落圆形凸起似大肠埃希菌菌落大肠型（麦康凯平板）菌落圆形凸起常见非发酵菌初步分群鉴定试验假单胞不动杆产碱杆黄杆莫拉菌属菌属菌属菌属菌属氧化酶+-

+++葡萄糖O/FO/-O/--O/F-动力+-+--MAC平板生长++++/--

常见非发酵菌初步分群鉴定试验假知识回顾KnowledgeReview祝您成功！知识回顾KnowledgeReview祝您成功！铜绿假单胞菌蒋月婷

铜绿假单胞菌非发酵菌(NonfermentativeBacilli)定义----一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌非发酵菌(NonfermentativeBacilli)发酵型氧化型产碱型发酵型氧化型概述非发酵菌：G-b葡萄糖O/－需O2或兼性厌O2动力+/－

氧化酶+/－分类：假单胞菌属产碱杆菌属不动杆菌属黄杆菌属莫拉杆菌属窄食单胞菌属金氏杆菌属艾肯菌属土壤杆菌属丛毛单胞菌属等概述非发酵菌：G-b葡萄糖O/－非发酵菌分离率非发酵菌分离率假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群

rRNAⅠ群/假单胞菌属

rRNAⅡ群/伯克菌属

rRNAⅢ群/丛毛单胞菌属、食酸菌属

rRNAⅣ群/短波毛单胞菌属

rRNAⅤ群/窄食单胞菌属

其它：鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群假单胞菌属Pseudomonas种类：铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)荧光假单胞菌(P.fluorescence)恶臭假单胞菌(P.putica)斯氏假单胞菌(P.stutizeri)曼多辛假单胞菌(P.mendocina)产碱假单胞菌(P.alcaligenes)假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)假单胞菌属Pseudomonas种类：假单胞菌属Pseudomonas共同特点：G-b菌体细长单端鞭毛无芽胞

专性需O2

营养要求不高

35℃生长，少数4℃、42℃生长葡萄糖O/－动力+氧化酶+可产多种色素：绿脓素荧光素脓玉红素

假单胞菌属Pseudomonas共同特点：各种菌产生的色素

菌名色素颜色铜绿假单胞菌绿脓素、红脓素、青脓素、荧光素蓝、红、黑、黄色荧光假单胞菌荧光素黄绿色恶臭假单胞菌荧光素黄绿色斯氏假单胞菌未定名黄色素黄色洋葱伯克霍尔德菌未定名黄色素、紫色素黄色、紫色腐败希瓦讷拉菌未定名色素淡红褐色各种菌产生的色素抵抗力：较强，对多种抗生素耐药临床意义：分布广泛，条件致病菌，主要引起皮肤粘膜受损部位感染和各种医院内感染假单胞菌属Pseudomonas抵抗力：较强，对多种抗生素耐药假单胞菌属Pseudomona

各种标本血平板和Mac平板可疑菌落涂片革兰染色革兰阴性杆菌氧化酶(+)、OF：O

非发酵菌鉴定系统鉴定到种

微生物检验程序各种标本药敏试验

假单胞菌属和不动杆菌属可做K-B法药敏试验，嗜麦芽窄食单胞菌只有3种药物的K-B法药敏标准，其余需用稀释法或Etest法药敏试验抗生素敏感试验：A组：头孢他啶、美洛西林或替卡西林、哌拉西林、庆大霉素B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星C组：头孢噻肟或头孢曲松、氯霉素、奈替米星U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星或氧氟沙星、磺胺甲基异恶唑抗生素敏感试验：铜绿假单胞菌P.aeruginosa铜绿假单胞菌形态：G-b菌体长短不一球杆状或长丝状

单端单鞭毛动力+无芽胞特性：专性需氧

营养要求不高35℃+4℃－

42℃+可形成多种不同形态的菌落产多种色素(主要为绿脓素、荧光素)铜绿假单胞菌形态：G-b菌体长短不一球杆状或长丝状铜绿假单胞菌生化反应：氧化酶+OF：O硝还+N2+

液化明胶+枸橼酸盐+精双水解+乙酰胺酶+吲哚-生化反应：革兰染色铜绿假单胞菌革兰染色铜绿假单胞菌电镜图铜绿假单胞菌电镜图铜绿假单胞菌抗原：O抗原(外膜蛋白-保护性抗原脂多糖-型特异性)

H抗原

血清学分型

抵抗力：抵抗力强耐干燥不耐热

多重耐药

在室温水中长期生存4℃不生长

铜绿假单胞菌抗原：O抗原(外膜蛋白-保护性抗原铜绿假单胞菌致病性广泛存在环境中的条件致病菌，是院内感染主要病原菌可引起皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染、囊性纤维变性等有多种毒力因子：包括菌毛、荚膜多糖、内毒素、外毒素、绿脓菌素、蛋白酶、磷脂酶等铜绿假单胞菌致病性铜绿假单胞菌粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵入荚膜：多糖类物质抗吞噬细胞的吞噬作用；使细菌锚泊在细胞表面，与呼吸道感染有关内毒素、外毒素绿脓菌素：绿色色素，由铜绿假单胞菌的RpoS基因编码产生的代谢产物，具有氧化还原活性的化合物，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基团，引起组织损伤。在致病中起重要作用弹性蛋白酶：降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和出血；降解补体和白细胞蛋白酶抑制物；可与相应抗体形成复合物，沉积于感染组织中磷脂酶C粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵微生物检验采集标本：各种临床标本

医疗器械

环境用品检验方法：直接镜检

分离培养(血平、MAC平板)

鉴定分型：血清学分型、质粒指纹图谱分型、脉冲场凝胶电泳分型等微生物检验采集标本：各种临床标本

脓液痰尿液等血液环境用品分离培养直接涂片染色肉汤增菌血平板37℃18-24h可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味）初步鉴定最后鉴定菌落色素非发酵菌鉴定系统鉴定

革兰阴性杆菌氧化酶(+)血清分型检验程序

分离培养普平：18-24h圆形大小不一边缘不整扁平湿润常呈融合态琼脂被染成绿或黄绿血平：扁平湿润有金属光泽琼脂被染成蓝绿或灰绿有溶血环MAC平：微小无光泽半透明

48h后菌落呈棕色

分离培养普平：18-24h圆形大小不一边缘不整鉴定