中药化学实验

中药化学实验技术”实验教学大纲实验大黄中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚的提取、分离和鉴定一实验目的和要求：pH梯度萃取法的原理和操作技术。学习硅胶柱色谱法分离精制大黄素。醚、大黄酚。了解高速逆流色谱法的分离原理和方法。二实验原理大黄记载于《神农本草经》等许多文献中，用于泻下、健胃、清热、解毒等。（Rheumpalmatclm，药用大黄（R.officinale及唐古特大黄（R.tangutiumRegll）的根茎及根，大黄中含有多种游离的羟基蒽醌类化合物以及它们与糖所形成的苷。羟基蒽醌苷元主要有下列五种：R1R2R1R2OR1 R2

名称 晶 形 熔点-H-CH3-H

-COOH 大黄酸(Rhein)-OH 大黄素(Emodin)-CH2OH 芦荟大黄素(Aloe-emodin)

黄色针晶橙色针晶

318~320℃256~257℃206~208℃-OCH3 CH3 大黄素甲醚(Physcion)-H -CH3 (Chyrsophanol)酸性强弱：极性强弱：大黄酸＞芦荟大黄素＞大黄素＞大黄甲醚＞大黄酚三实验方法

砖红色针晶金色片状结晶

207℃196℃酸水解取大黄粉10g，加20%的硫酸水溶液100ml，直火加热1小时，过滤，滤饼水洗中性，干燥。总羟基蒽醌苷元的提取干燥的滤饼置索氏提取器中，加入乙醚，回流提取小时，得乙醚提取液。pH梯度萃取法分离大黄中的蒽醌苷元乙醚液%NaHCO350ml(分三次)碱液 乙醚液盐酸调pH=2沉淀(大黄酸)

%Na2CO350ml（分三次）碱液 乙醚液盐酸调pH=2沉淀

5%Na2CO360ml(分四次)(大黄素) 碱液 乙醚液盐酸调沉淀

1%NaOH60ml(分四次)(芦荟大黄) 碱液 乙醚液(大黄酚+大黄素甲醚)萃取效果以TLC来确定。五种羟基蒽醌苷元的分离精制大黄酸的精制将%NaHCO310ml黄色针晶为大黄酸，过滤即得纯品。用硅胶柱色谱法分离精制大黄素①装柱：取100－200目的硅胶约10g，按干法或湿法装柱②加样：湿法或干法上样大黄素粗品。③洗脱，鉴定，合并：用石油醚：乙酸乙酯检查。合并大黄素部分。④放置析晶：大黄素部分适当浓缩，放置析晶，得纯品大黄素。芦荟大黄素的精制PH10ml黄素纯品。用离心薄层层析法分离大黄酚和大黄素甲醚①圆形硅胶薄层板的制备：硅胶G-CMC-Na（30g+75~%CMC-Na）②进样：大黄酚和大黄素甲醚混合物③洗脱：石油醚—乙酸乙酯④鉴定：相同瓶合并，甲醇重结晶，得大黄酚、大黄素甲醚。吸附剂：硅胶洗脱剂：石油醚—乙酸乙酯鉴定：相同瓶合并，甲醇重结晶，得大黄酚、大黄素甲醚。大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚的鉴定颜色反应大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚与碱及醋酸镁的颜色反应并与茜草素比较颜色的不同。熔点测定大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚TLC大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚的薄层鉴定IR用溴化钾压片法，测定大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚的红外光谱。四实验指导本实验要点及注意事项。①PH梯度萃取的原理及注意事项。②如何设计萃取分离方案的程序与方法。③蒽醌化合物红外光谱的特点。④分离萃取时一定注意乳化层的分出，不要混入，并且每步最好用新鲜乙醚，回洗碱水液。⑤碱液的配制要准确。⑥每步萃取时，利用色谱检查跟踪萃取效果，如未达到预想效果应及时纠正。⑦硅胶色谱柱的装柱的操作，避免柱中存有气泡。⑧索氏提取器的使用方法、原理、注意事项。⑨用乙醚回流洗脱时应注意防火。实验报