sirna转染方法用于将siRNA入动物细胞

EntransterTM-（siRNA转染入动物细胞）Cat.No.18668-06 Cat.No.18668-07

常温，于生物公司（EngreenBiosystemCo,.）是专业的转染试剂研发生产厂商。EntransterTM是生物公司研发合成的纳米聚合物转染试剂，该试剂采用纳米技术合成，是一代非转染试剂。由于纳米技术的应用，EntransterTM-R在细胞siRNA转染效率，并有很低的细胞毒二条件优化实验（24孔板为例1根据表1推荐的细胞数量和培养基量，提前一天将细胞种植在24孔板中，以．细胞汇合度（Confluence）30-400.45ml7500±225000±106‐well/35150000±5060mm/T25400000±1005100mm/T751000000±250siRNA⑴siRNA浓度和转染试剂量的优化。根据表24EP管，每管加入相应数量siRNA，然后加入一定量无稀释液（建议采用OPTI-MEM无DMEM或1640），充分混匀，制成siRNA稀释液，终体积为25μl。1234注意21ntsiRNAoligo来说平均分子量约13300g/mol，合siRNAODnmol换算关系由于OD值受产物中其他成分影响，具体请询问合成公司，一般1ODduplex≈2.5-5nmols≈33-66ug。⑵再取4个EP管，每管按表2相应加入EntransterTM-R，然后加入一定量 稀释液体（建议采用OPTI-MEM、无DMEM或1640），充分混匀，制成EntransterTM-R稀释液，终体积为25μl。室温静置5分钟。⑶将EntransterTM-R稀释液分别加入到对应siRNA稀释液充分时间静置)。转染复合物完成。注意：在部分，由于和培养条件等差异，转染后镜下培养基中可能出现少量黑点状沉淀，为转染试剂和中蛋白结合产物，不影响转染结果和细胞324-wellEntransterTM--R稀释液总96-48-24-112-26-well/35-560mm/T25100mm/T75注意：siRNAsiRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化根据预实验确定的细胞密度、siRNA有效浓度和转染试剂量等优化条件，固定四其他事项siRNA10nM-200nM优化，siRNA(μg):转染试剂量(μl)比值可以从1:2到1:8进行优化。效果，建议转染时的细胞密度从20%到50%进行不同细胞梯度转染，确定最佳转染稀释用液的选择。必须采用无液体！建议采用OPTI-MEM、无DMEM或1640。培养时间siRNA效率的差异，一般来说，mRNARNAi24-48小时，在蛋白水平观察RNAi效果的最佳时间是转染后48-72小时。细胞生长的培养基。细胞生长的培养基没有特殊要求，可以采用含培养基或转染后沉默照七与安八其他相关试剂EntransterTM-H：用于将DNA转染入HEK293(T)、Hela、CHO细胞 vivo：用于动物体内转染。EnlightTM：高灵敏、低背景ECL发光试剂。九质量保证生物科技对EntransterTM-R转染试剂的每批产品实行严十使用限制Cop