疫苗与抗体工程课件

疫苗和抗体工程1303第二小分组

免疫的基本概念免疫是指机体的一种生理性保护功能。它包括机体对异物(病原生物性或非病原生物性的)的识别、排除或消灭等一系列过程。这种过程可能引起自身组织损伤，也可能没有组织损伤。概括起来说，免疫系统的功能主要表现为三方面，即防御功能、稳定功能及免疫监视作用，这些功能一旦失调，即产生免疫病理反应。（以毒攻毒）。免疫的概念归纳为：免疫是机体的一种保护性生理反应，其作用是“识别”和排除抗原性异物(如病原微生物，衰老的自身细胞，突变产生的异常体细胞等)，以维持机体内环境的平衡和稳定。免疫反应在正常的情况下对机体是有利的，但在某些情况下也可能造成不利的后果。

机体的抗感染免疫:

抗感染免疫系统分先天性免疫和获得性免疫两大类。人工免疫分为:人工自动免疫，人工被动免疫；人工自动免疫：输入抗原,使人体产生抗体；

人工被动免疫:输入免疫血清(含有特异性抗体),使人体获得一定的免疫力,可立即发挥免疫作用。疫苗分类（1）减毒活疫苗

（2）灭活疫苗

（3）

多糖疫苗（4）

组分疫苗（5）

基因工程疫苗（6）

合成肽疫苗（7）

抗独特型抗体疫苗（8）

基因疫苗

疫苗的种类目前在我国应用的疫苗有几十种到上百种。最常用的有十种。新型的疫苗正在不断研制乙脑疫苗

用于预防流行性乙型脑炎(简称乙脑)。将流行性乙型脑炎病毒感染地鼠肾细胞，培育后收获病毒液冻干制成减毒活疫苗，用于预防流行性乙型脑炎。乙肝疫苗用以预防乙型肝炎。目前我国使用的主要有乙型肝炎血源疫苗和乙肝基因工程疫苗两种，适用于所有可能感染乙肝者。

乙型肝炎血源疫苗系由无症状乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者血浆提取的HBsAg经纯化灭活及加佐剂吸附后制成。

甲肝疫苗用于预防甲型肝炎。将对人无害，具有良好免疫原性的甲型肝炎病毒减毒株接种于人二倍体细胞，培养后经抽提和纯化溶于含氨基酸的盐平衡溶液，用于预防甲型病毒性肝炎。组合疫苗疫苗作为抗原往往组合起来使用。最常用的组合是白喉-破伤风-百日咳（DTP）；白喉-破伤风-百日咳-乙型肝炎（DTP-HepB）；五价疫苗：白喉-破伤风-百日咳-乙型肝炎-b型流感嗜血杆菌；麻疹-腮腺炎-风疹（MMR）基因工程疫苗基因工程疫苗：如基因工程乙型肝炎疫苗用于乙肝的预防。构建活疫苗：可将外源DNA插入载体，该载体能在宿主内复制，得到减毒疫苗。例：乙型肝炎表面抗原生产工艺功能:乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是乙型肝炎病毒表面包被的抗原（一种蛋白质），是乙肝疫苗的有效成分，预先注射可使人产生抗体，故可预防乙肝病毒的感染。疫苗的接种方法直接注射法：裸质粒DNA或经脂质体包裹的裸质粒DNA直接从肌肉，皮肉，皮下，黏膜，静脉内注射。包裹DNA的脂质体能与组织细胞发生膜融合，而将DNA摄入。减少核酸酶对DNA的破坏。基因枪轰击法：将质粒DNA包被在金微粒子表面，用基因枪将包被DNA的金微粒子高速穿入组织细胞。细菌或病毒携带法：选择一种容易进入某组织器官的细菌或病毒，去除其繁殖基因，形成繁殖缺陷菌株，将质粒DNA转化到该细菌或病毒中，将重组的细菌或病毒转入到组织器官中。由于细菌或病毒不能繁殖，细菌或病毒在体内裂解释放出DNA。1.5.4核酸疫苗的生产抗体抗体（antibody,Ab)是B细胞识别抗原后增殖分化为桨细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原特异性地结合，具有免疫功能。免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。抗体和免疫球蛋白的关系:抗体都是免疫球蛋白，并非所有免疫球蛋白都具有抗体活性。抗体的分类根据生产方法和组成：多克隆抗体单克隆抗体基因工程抗体根据存在的位置：分泌型Ig(sIg)

膜型Ig(mIg)单抗制备步骤抗原的制备；动物的选择；免疫：如脾内一次免疫（在脾内注入抗原，一定时间后，取脾细胞，单细胞）骨髓瘤细胞培养：融合；培养可分泌特异性抗体杂交瘤细胞的筛选：人单克隆抗体制备难题人-人杂交瘤技术：由于伦理学的问题，难于获得人的B淋巴细胞的获得是不允许的，且人的骨髓瘤细胞性能不好，技术上仍未突破；人-鼠杂交瘤技术：小鼠的骨髓瘤细胞和人的B淋巴细胞融合所获得的杂交瘤，可产生人的单克隆抗体。并可在体外长期产生。关键问题是这种杂交瘤在体外传代8周至6个月后，停止分泌人的单克隆抗体。

单克隆和多克隆抗体的比较和用途特异性敏感性均一性McAbPcAb低差无高强有1、用于免疫学检测，辅助临床