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文档简介
AGS8830-8/16型实时荧光定量PCR仪操作规程.目的规范AGS8830-8/1卵实时荧光定量PCFK使用操作过程,确保仪器的正常运转和检测结果的准确。.范围该产品基于荧光聚合酶链式反应(PCR,与配套的核酸检测试剂共同使用,在临床上可对来源于人体的核酸样本(RNA/DNA进行定量、定性检测,包括病原体和人类基因项目。.职责科主任负责审核制定AGS8830-8/16型实时荧光定量PCRZ操作规程;负责AGS8830-8/16型实时荧光定量PCRZ日常使用、保养的监督和管理。仪器负责人负责起草AGS8830-8/16型实时荧光定量PCR仪操作规程;指导和监督AGS8830-8/16型实时荧光定量PCRZ日常使用和保养,遇特殊情况及时报告。仪器操作人员负责AGS8830-8/16型实时荧光定量PCRZ使用操作;负责AGS8830-8/16型实时荧光定量PCRZ日常维护、保养和仪器故障报修申请。.实验环境温度本仪器应在室内使用,放置仪器的工作台应水平、稳固。仪器要求在海拔2000米以下使用。本仪器应安装在湿度较低、灰尘较少并远离水源(如水池、水管等)的地方,室内应通风良好,无腐蚀性气体或强磁场干扰。不要将仪器安放在潮湿或灰尘较多的地方。本仪器上的开口都是为了通风而设,为了避免温度过热,一定不要阻塞或覆盖这些通风孔。单台仪器使用时,仪器四周的通风孔与最近物体的距离应不小于 30cmi多台仪器同时使用时,每台仪器之间的距离应不小于50cm温度过高会影响仪器的检测性能或引起故障。不要在阳光和强光源直射的地方使用本仪器,以免影响仪器荧光检测,并应远离暖气、炉子以及其它一切热源。环境温度:10〜30c 相对湿度:10〜85%.操作步骤开机前的检查在接通电源以前,应先确认以下内容:电源是否与系统要求相符合;确认电源线插头已正确、可靠的插入电源插座中;确认仪器后侧的升级开关是否处于下端“ Normal”位置;周围工作环境、仪器的放置条件是否符合要求;开机后热盖预热 2min。开机启动界面开机自检通过进入启动界面.AGS5.2.2软件启动后,自动进入主界面。软件界面介绍主界面介绍五个子按键。主界面包含“DNA、”RNA、”自定义”、“文件”和“系统设置”
五个子按键。点击“DNA可进入DNA检测项目,快速运行DNA检测项目程序进行检测。点击“RNA可进入RNA检测项目,快速运行RNA检测项目程序进行检测。点击“自定义”可根据需要自定义设置运行参数进行检测。点击“文件”可进入文件操作界面进行文件的打开、删除、导入和导出操作。参数编辑界面介绍参数编辑界面包含孔位显示区、功能区、按键栏。孔位可通过单击选中。可通过点击孔位前的全选按钮图标进行全选注:16孔位排布界面如下图所示,Al:A3"AJA4A5A&A7A3B1凯的打ES B796可以编辑实验程序参数、染料、样品参数以及查看荧光曲线和标准曲线。程序参数编辑程序选项包含温度步设置、循环步设置、荧光采集点设置、删除和速度设置+循环步:添加循环步,最大循环为99。2个循环之间不能交叉,也不能嵌套。+温度步:添加温度步。删除:可以删除选中的温度步或者循环步。速度:可设置变温速率。读取荧光:设置需要采集荧光的温度步。染料设置包含染料选择和对应染料的增益设置。
报告荧光:可选择需要采集荧光的染料增益设置:设置选中的染料的增益。样本参数编辑选项包括八项分别为:孔位,样本ID,染料,检测项目,样本类型,浓度,检测结果和Ct值样本ID由英文字符和数字组成,最多7位染料显示选择的染料检测项目采用下拉列表的形式,内容是判定标准里的检测项目( DNA口RNM固定项目,不能
修改)o样本类型选择样本的类型。o检测结果根据检测项目来进行判断。浓度是表示样本的浓度标准。针对样本编辑按钮栏增加删除按键,当处于选中状态时,“删除”按键可用,其他状态不可Ct显示分析后的当前染料的Ct值。功能键包括:新建,开始,打开,保存,清除,导出结果,返回。新建:点击新建弹出新建对话框,可编辑文件名称,并在文件存储区域新建该文件开始:运行当前文件,运行之前需要设置热盖温度和增益设置,运行时需实时保存上传数据(拟合后的荧光数据和温度数据)。运行循环少于5个不分析。打开:可打开历史文件。保存:保存当前文件修改。清除:清除选中孔位的样本信息。导出结果:可以将实验的荧光曲线和结果导出到U盘返回:返回主界面。运行开始运行单击运行,“运行”按键变为“停止”按键.点击曲线选项可以查看、导入、导出标准曲线点击曲线选项运行程序采集荧光过程中可以查看当前实验的实时荧光曲线、 运行时间、剩余时间、模块温度、循环次数,可以设置显示的染料和染料荧光颜色;有实验结果时,可以查看实验分析结果,荧光曲线,可以手动分析实验结果。左上角全选框,点击之后可以实现全选孔位,全取消孔位选中,而曲线界面会根据选中的孔位,显示对应的分析曲线。运行过程中,单击“停止”按键,弹出警告对话框,确认“是否停止实验?”,确认实验停止运行,单击“否”取消该动作,继续运行。停止运行后,如果运行的循环大于等于 5个,则自动分析,否则不分析;然后进入到样本界面。在运行中异常断电,系统会在重启之后提示是否继续实验。分析分析界面1)自动分析和手动分析为互斥,只能同时选择一个。可以同时不勾选,都不勾选,表示不分析。2)自动分析选中,基线(开始和结束)和阈值不可设置。3)手动分析时,基线和阈值可设置,输入基线和阈值之后 ,单击键盘确认键,进行手动分析,调用分析算法(算法提供),显示分析后的曲线和结果。通道选择需要查看的染料,只对当前选中染料进行分析,显示当前染料的荧光曲线,样本里显示所有染料的结果值和CT值。基线设置手动分析才可进行基线设置,结束基线设置需大于等于开始基线。范围:最小1,上限当前实验的运行的循环数。阈值手动阈值最小值是4,最大值是1000。手动分析时,阈值可以设置。自动分析时,阈值自动计算,不能手动输入。.检测程序文件的运行试剂样本的准备检测试剂样本的基本要求准备试剂-----实时荧光定量PCR仪使用0.1mL/0.2mL透明离心试管根据试剂要求选用5-100仙L合适的加液量。离心操作-----配置完成试剂样本的试管在放入仪器之前,要用离心机进行离心操作,确保试剂液体处于试管底部,且液体内部不含有气泡。放置试管-----如果样本数量少于模块的孔位数,那么在放置试管时应尽量将样本试管均匀地分
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