血培养采样、送检、检验方法

血培育的标准化操作血培育检测采血指征：以征时可作为采集血培育的重要指征：1．发热〔≥38℃〕或低温〔≤36℃〕。寒战。白细胞增多〔>10×109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。粒细胞削减〔成熟的多核白细胞<1×109/L〕。血小板削减。皮肤粘膜出血。昏迷。多器官衰竭。〔2岁以下的幼儿〔≥38.5℃〕和白细胞增多〔≥20×109/L〕。老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征。〔碘酊或碘伏〕对皮肤进展严格认真〔。脉血液进展血培育。皮肤消毒严格按以下步骤进展：70%30秒钟以上。然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤〔1%-2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒〕，1.5cm~2cm直径画圈进展消毒。最终用70%酒精脱碘。严格执行三步消毒后，可行静脉穿刺采血。留意对碘过敏的患者，只能用70%60秒钟，待穿刺部位酒精挥发枯燥后穿刺采血。70%酒精或碘溶液〔不要使用碘〕消毒血培育瓶橡皮塞子。60秒。注入血液。等。然而，在抱负的消毒条件下，仍有3%~5%血培育中混有污染菌，它们来源〔〔革兰阳性芽孢杆菌属，不动杆菌属〕，这些微生物有时有致病作用。对两次不同部生物快速生长〔48h内〕。上述状况下，应考虑是真正的感染。临床试验室工作人员和医生之间应常常争论血培育结果，建立良好的沟通关系对各方面都有益1995~199970例凝固酶阴性葡萄球菌，入院48h内检出者，39.3%〔24例〕为污染菌，48h后检出者〔9例〕100%为污染菌，污染菌检出时间显著长于病原菌。提示血培育中凝固酶阴性葡萄球菌污染率较高。因此，采血前严格执行皮肤消毒程序格外重要。2ml20ml时，血培育的阳性率增加30%~50%1ml3%~5%。1ml~5ml用于血培育，当细菌浓度足够高时，血液少于1ml也足以检测菌血症。标本量大于1ml，细菌量也增加，对于感染的儿童没毫升血液比成人有更多的微生物。对于成人血培育的标本量少于10ml不易培育出细菌，每瓶最低限量应是10ml血液，20ml~30ml最适宜，血1:51:1010ml30ml可增加细菌量，但这不太切合实际，这很简洁造成医院获得性贫血。血培育的数量和采血时间：2~3瓶血培1h，在发烧时血液可能没有细菌，实际上，血培育通常是在寒战或发烧后进展。24h内同一时间或2~320ml~30ml物延迟生长更为常见。治疗，血培育的阳性率从97%下降到91%。由于有很好的血培育技术，对感染95%以上。对特别的全身性和局部感染患者采集血培育的建议：23份血培育瓶，快速进展血培育。23份血培育。24h36h后，估量温度上升之前〔通常在下午〕2份以上血培育。获得罕见的或苛养的微生物。1h〔2h内〕3份血培育，假设24h3份血培育瓶。入院前两周内承受抗生素治疗的2份。机不适宜，通常在患者体温高热时，24h内采集一瓶血培育，降低了血培育的阳性率，不符合才学的根本规程，试验室应当做大量宣传沟通工作。35℃~37的危急。试验室收到血培育瓶后马上进展肉眼观看微生物生长状况。〔尽管微生物生长不受影响〕，目前很少有人留意瓶在运送过程中还应尽量削减延迟。试验室收到血培育后，应按以下步骤操作：检查培育瓶确保它们被安全地放置。或深层有白色颗粒等，如有上述状况产生提示有微生物生长。检查瓶子上的标签，确认资料是否齐全，与申请单上的患者资料是否全都。保证获得适量的血液。检查血液是否超过要求的基线。放置在孵箱中或上机进展检测。报告单上注明血量，有可能延误菌血症或真菌菌血症的检测。建议发生以下不标准的血培育时应当准时处理。12h以上、用不适当的培育瓶或培育管收集标本。处理方法：马上与临床医师联系，报告：“标本不标准的具体理由”。用失效的培育瓶或培育管收集标本。]“用过期培育瓶收集血标本，请用效期内的培育瓶收集标本并送检。送交血标本的量缺乏或只送一瓶血培育。“送交的血培育标本量缺乏，请补送足量血液培育瓶”。未送推举的培育瓶数或类型“只送需氧瓶不符合规程，血培育的根本规程推举送两种培育瓶：需氧瓶和厌氧瓶”。后，应当即使同志临床医生以便重复采集血培育进展补救。细菌室工作人员，在全部的血培育处理过程中都应戴乳胶手套。拒收不符合安全标准的血培育瓶或培育管。〔于丙烯酸酯膜后或戴上口面罩〕。在生物安全柜内操作肉眼观看有微生物生长迹象的培育瓶。技术实行正确的自我保护措施。用于培育基的塞子和胶带可能含有高浓度的致病菌，应防止接触。正确处理与血培育有关的污染物。血培育检测——阳性结果的处理：传统手工法血培育应当每天至少检查一次，对48h~72h未生长的培育瓶至少应长：血与肉汤混合物消灭浑浊。“棉球样”生长。肉汤内消灭浑浊生长。肉汤外表有薄膜生长。消灭溶血。现象。血液层外表或深层有白色颗粒。液体培育基凝固。2~3生为患者阅历选择抗生素治疗，并作为试验室进展细菌鉴定补充试验的参考依1。表1。血培育阳性后依据革兰染色特点应传种培育基种类的建议染色特点5%~10%CO2孵育 厌氧气体孵育ªEMB血琼脂PEA或CAN革兰阳性××××××革兰阴性b×××××cａ全部培育至少至48h；EMB；伊红美蓝琼脂；PEA；苯乙基醇琼脂；CAN；多粘菌素-萘啶酮酸琼脂。ｂ增加真菌培育基〔如：沙保弱葡萄糖琼脂〕30℃培育。ｃ接种硫羟乙酸盐肉汤中。染色阴性的血培育瓶，再次上机检测之前都应传种厌氧和需氧培育皿。DNA酶，乳胶凝集分型试验等。美国临床试验室标准化委员会〔NCCLS〕推举的抗生素敏感试验没有血培育直选择抗生素进展直接抗生素药敏试验。5h-7h细菌鉴定和标准的抗生素敏感试验。DNA扩增技术可以鉴定血培育中的细菌和检测抗生素敏感性，但这种技术不有用，价格昂贵，FDA不推举常规使用。菌可以接种到巧克力琼脂斜面上并用矿物油封存。为长期储存，细菌可悬浮于15%甘油肉汤中并-70℃冷冻。血培育阳性结果的报告程序：24h48h后，对阴性血培育结果在最短的时间内发出初步报告。有些试验室以培育的时间长短发初步报告，例如：“3天后无细菌生长”。基、裂解-离心技术和特别养分的肉汤培育基〔如脑心侵液肉汤等〕。裂解-离心