药物分析第(9)章

第九章

二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析1第一节二氢吡啶类药物的结构与性质2一常见药物的结构与物理性质苯基-1,4-二氢吡啶3硝苯地平

尼群地平尼莫地平

一常见药物的结构与物理性质4二、主要理化性质1.二氢吡啶环的还原性：二氢吡啶环具有还原性，可用氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法进行含量测定。2.硝基的氧化性：硝基被还原为芳伯氨基，显重氮化-偶合反应。3.二氢吡啶环氨基质子解离性：与碱作用，环上1,4-位氢发生解离，形成p-π共轭而发生颜色变化。5二、主要理化性质4.稳定性：遇光极不稳定，发生光化学歧化作用，因此应避光操作。5.旋光性：C4手性碳原子，具旋光性，但临床所有大多为消旋体。6.吸收光谱特性：芳环，紫外区有特征吸收。6第二节鉴别试验7一、化学鉴别法（一）

与亚铁盐反应

苯环上硝基具有氧化性，可将氢氧化亚铁氧化为红棕色氢氧化铁沉淀。尼莫地平的鉴别：取本品约20mg，加乙醇溶解后，加新制的5%硫酸亚铁铵溶液2ml，硫酸溶液1滴与氢氧化钾溶液1ml，强烈振摇，1分钟内沉淀由灰绿色变为红棕色。8一、化学鉴别法（二）

与氢氧化钠试液反应

二氢吡啶类药物的丙酮溶液与氢氧化钠试液反应显橙红色。硝苯地平、尼群地平、尼索地平硝苯地平的鉴别：取本品约25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氢氧化钠溶液3~5滴振摇，溶液显橙红色。9一、化学鉴别法

（二）

与氢氧化钠试液反应尼群地平:

取本品约50mg，加丙酮1ml，加20％氢氧化钠试液3～5滴，溶液显橙红色。尼索地平：

取本品约30mg，加丙酮2ml溶解，加20％氢氧化钠试液3～5滴，振摇，溶液显橙红色。10一、化学鉴别法（三）

沉淀反应

1,4-二氢吡啶的结构，可与重金属盐类形成沉淀。尼莫地平与氯化汞反应生成白色沉淀。尼群地平与碘化铋钾反应生成橙红色沉淀。

11一、化学鉴别法（四）

重氮化偶合反应二氢吡啶类药物苯环硝基具有氧化性，在酸性下被锌粉还原为芳伯氨基。

BP2010、JP15鉴别硝苯地平12二、分光光度法峰位（cm-1）归属1700~1680υC=O1530/1350υN=O1230~1000υC-O860~600Ar-C-HIR——硝苯地平1.UV2.IR13硝苯地平

(2)取本品适量，加三氯甲烷2ml使溶解，加无水乙醇制成每1ml约含15μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定，在237nm的波长处有最大吸收，在320～355nm的波长处有较大的宽幅吸收。

(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集469图)一致。14尼群地平

(2)避光操作。取本品，加无水乙醇制成每1ml中约含20μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定，在236nm与353nm的波长处有最大吸收，在303nm的波长处有最小吸收。在353nm与303nm的波长处的吸光度比值应为2.1～2.3。

(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集600图)一致。

15尼莫地平

(2)取本品适量，加乙醇制成每1ml含10μg的溶液，照紫外-可见分光光度法测定(附录Ⅳ

A)，在237nm的波长处有最大吸收。

(3)本品的红外光吸收图谱与对照的图谱(光谱集599图)一致。16尼索地平

(2)避光操作。取本品，加无水乙醇制成每1ml中约含10μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定，在237nm的波长处有最大吸收。

(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集1127图)一致。17非洛地平

(2)取本品，加乙醇制成每1ml中含20μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定，在238nm与361nm的波长处有最大吸收。

(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集794图)一致。18三、色谱法1.HPLC2.TLC19

第三节有关物质的检查20二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用，引入杂质，各国药典标准中均规定在避光条件下进行有关物质检查，大多采用HPLC法。21硝苯地平【检查】有关物质避光操作。取本品，作为供试品溶液；另取2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸二甲酯(杂质Ⅰ)对照品与2，6-二甲基-4-(2-亚硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸二甲酯(杂质Ⅱ)对照品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中各约含10μg的混合溶液，作为对照品贮备液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(60:40)为流动相；检测波长为235nm。供试品溶液的色谱图中如有与杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过0.1％；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中硝苯地平峰面积(0.2％)；杂质总量不得过0.5％。22尼群地平有关物质避光操作。取本品用乙腈-水(20:56)混合溶液稀释作为供试品溶液；另取2，6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸甲酯乙酯(杂质Ⅰ)对照品，精密加入供试品溶液1ml，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-四氢呋喃-水(20:24:56)为流动相；检测波长为237nm。理论板数按尼群地平峰计算不低于3000，供试品溶液的色谱图中如有与杂质Ⅰ峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得大于0.1％；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中尼群地平峰面积(1.0％)，其他杂质峰面积的和不得大于对照溶液中尼群地平峰面积的2倍(2.0％)。23尼莫地平【检查】有关物质避光操作。取本品，流动相溶解并定量稀释作为供试品溶液；另取2，6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸-2-甲氧乙酯异丙酯(杂质Ⅰ)对照品，用流动相溶解并定量稀释，作为对照溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水(35:38:27)为流动相；检测波长为235nm。供试品溶液的色谱图中如有与杂质Ⅰ峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.1％；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中尼莫地平峰面积的0.5倍(0.5％)，各杂质峰面积(杂质Ⅰ峰面积乘以1.78)的和不得大于对照溶液中尼莫地平峰面积(1.0％)。供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0.02倍的色谱峰可忽略不计。24尼索地平【检查】有关物质避光操作。取本品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液，作为供试品溶液；另取2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3，5-吡啶二羧酸甲酸甲酯异丁酯(杂质Ⅰ)对照品与2，6-二甲基-4-(2-亚硝基苯基)-3，5-吡啶二羧酸甲酸甲酯异丁酯(杂质Ⅱ)对照品，精密加入供试品溶液1ml，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水(50:15:35)为流动相；检测波长为237nm。供试品溶液的色谱图中如有与杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过0.2％；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中尼索地平峰面积的0.5倍(0.5％)；杂质总量不得过1.5％。

25非洛地平有关物质避光操作。取本品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；另取2，6-二甲基-4-(2，3-二氯苯基)-3，5-吡啶二甲酸甲酯乙酯(杂质Ⅰ)，精密加入供试品溶液1ml，用流动相稀释至刻度。摇匀，作为对照溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水(50:15:35)为流动相；检测波长为238nm。供试品溶液色谱图中如有与杂质Ⅰ保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.1％；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中非洛地平峰面积(0.5％)；杂质总量不得过1.0％。26第四节含量测定27

硝苯地平的测定本品→无水乙醇温热溶解

→加高氯酸溶液

→邻二氮菲指示剂

→立即用硫酸铈（0.1mol/L）滴定至近终点

→水浴加热至50℃左右

→继续滴定至橙红色消失一、铈量法28反应原理：一、铈量法29讨论:1.化学计量关系1：2

每1ml硫酸铈（0.1mol/L）相当于17.32mg的C17H18N2O62.终点指示：

一、铈量法30讨论:3.在强酸性条件进行：酸性较低时Ce4+易水解。4.Ce4+具黄色，Ce3+无色，故Ce4+自身可做指示剂，但不够灵敏。5.Ce(SO4)2标准溶液稳定，长时间放置、曝光、加热不会引起浓度的变化，且Ce4+还原为Ce3+是单电子转移，不生成中间价态的产物，反应简单，副反应少。一、铈量法31讨论:6.大部分有机物不与Ce(SO4)2作用，不干扰测定。7.适合于糖浆剂、片剂等制剂的测定。

一、铈量法32硝苯地平【含量测定】取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇50ml，微温使溶解，加高氯酸溶液(取70％高氯酸8.5ml，加水至100ml)50ml、邻二氮菲指示液3滴，立即用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，在水浴中加热至50℃左右，继续缓缓滴定至橙红色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于17.32mg的C17H18N2O6。33尼群地平【含量测定】取本品约0.13g，精密称定，加冰醋酸20ml及稀硫酸10ml，微温使溶解，放冷；加邻二氮菲指示液2～3滴，用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)缓缓滴定至红色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C18H20N2O6。34尼莫地平【含量测定】取本品约0.18g，精密称定，加无水乙醇25ml，微温使溶解，加高氯酸溶液(取70％高氯酸溶液8.5ml，加水至100ml)25ml，加邻二氮菲指示液4滴，用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由橙红色变为浅黄绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于20.92mg的C21H26N2O7。35尼索地平【含量测定】取本品约0.25g，精密称定，加冰醋酸20ml及稀硫酸10ml，微温使溶解，放冷，加邻二氮菲指示液2滴，用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定至近终点时，在水浴中加热至50℃，继续缓缓滴定至橙红色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于19.42mg的C20H24N2O6。36非洛地平【含量测定】取本品0.3g，精密称定，加冰醋酸40ml溶解后，加稀硫酸20ml与邻二氮菲指示液2滴，用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定至橙色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于19.21mg的C18H19Cl2NO4。37尼群地平软胶囊含量测定避光操作在353nm处测定无水乙醇溶液吸光度采用对照品比较法二、紫外-可见分光光度法38尼群地平软胶囊【含量测定】避光操作，取本品10粒置小烧杯中，用剪刀剪破囊壳，加无水乙醇少量，振摇使溶解后，将内容物与囊壳全部转移至具塞锥形瓶中，用无水乙醇反复冲洗剪刀及小烧杯，洗液并入锥形瓶中，将锥形瓶密塞，置40℃水浴中加热15分钟，并时时振摇，将内容物移入100ml量瓶中，用无水乙醇反复冲洗囊壳和锥形瓶，洗液并入量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)在353nm的波长处测定吸光度；另取尼群地平对照品适量，精密称定，用无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含20μg的溶液，同法测定，计算，即得。39三、HPLC法

高效液相色谱法可消除有关物质及制剂中辅料的干扰，准确测定药物含量。尼莫地平分散片的测定色谱条件与系统适用性试验固定相：十八烷基硅烷键合硅胶流动相：甲醇-乙腈-水（35:38:27）检测波长：235nm理论板数按尼莫地平峰计算不低于8000R符合要求40硝苯地平片【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅴ

D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(60:40)为流动相；检测波长为