标准解读

《GB/T 28630.3-2012 白斑综合征(WSD)诊断规程 第3部分：原位杂交检测法》是针对白斑综合征（WSSV，Whitespot Syndrome Virus）的一种特定诊断方法——原位杂交技术所制定的标准。该标准详细描述了使用原位杂交技术对疑似感染白斑综合征病毒的水生生物样本进行检测的方法流程。以下是对该标准主要内容的概述：

  • 标准首先定义了适用范围，明确指出其适用于通过组织学切片上的原位杂交来识别白斑综合征病毒感染情况。
  • 在术语和定义部分，明确了与本标准相关的关键概念和技术术语，如“原位杂交”、“探针”等，为理解后续内容奠定基础。
  • 材料与试剂章节列出了实验所需的所有材料及其质量要求，包括但不限于核酸探针、标记物、固定剂等，并强调了这些材料的选择对于保证实验准确性的重要性。
  • 实验步骤详述了从样品采集到最终结果分析的整个过程，其中包括样品处理、固定、脱蜡、预处理、杂交反应、洗涤以及显色等多个环节的具体操作指南。
  • 对于结果判读，《GB/T 28630.3-2012》提供了清晰的标准，帮助实验人员准确判断是否存在WSSV感染。
  • 此外，还特别指出了实验过程中需要注意的安全事项及预防措施，确保实验室工作人员的安全。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2012-07-31 颁布
  • 2012-11-01 实施
©正版授权
GB/T 28630.3-2012白斑综合征(WSD)诊断规程第3部分：原位杂交检测法_第1页
GB/T 28630.3-2012白斑综合征(WSD)诊断规程第3部分：原位杂交检测法_第2页
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文档简介

ICS6502030

B41..

中华人民共和国国家标准

GB/T286303—2012

.

白斑综合征WSD诊断规程

()

第3部分原位杂交检测法

:

Diagnosticprotocolsforwhitespotdisease—

Part3Insituhbridizationmethod

:y

2012-07-31发布2012-11-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T286303—2012

.

前言

白斑综合征诊断规程分为五个部分

GB/T28630《(WSD)》:

第部分核酸探针斑点杂交检测法

———1:;

第部分套式检测法

———2:PCR;

第部分原位杂交检测法

———3:;

第部分组织病理学诊断法

———4:;

第部分新鲜组织的染色法

———5:T-E。

本部分为的第部分

GB/T286303。

本部分按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本部分由中华人民共和国农业部提出

。

本部分由全国水产标准化技术委员会归口

(SAC/TC156)。

本部分起草单位中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部全国水产技术推广总站

:、。

本部分主要起草人黄倢杨冰陈爱平宋晓玲史成银杨丛海魏琦刘莉

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T286303—2012

.

白斑综合征WSD诊断规程

()

第3部分原位杂交检测法

:

1范围

的本部分规定了白斑综合征原位杂交检测法所需试剂与材料仪器设备操作步骤和

GB/T28630、、

结果判定

。

本部分适用于进行对虾及白斑综合征的其他敏感宿主组织细胞的感染程度及病毒扩增状况的评估

和疾病的确诊不适于对病毒的非感染性携带的标本进行病毒检测

。。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡不注日期的引用文件其最新版本包括所有修改单适用于本文件

。,()。

白斑综合征诊断规程第部分核酸探针斑点杂交检测法

GB/T28630.1—2012(WSD)1:

白斑综合征诊断规程第部分组织病理学诊断法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3原理

31白斑综合征的病原和病理学特征

.

见的

GB/T28630.4—20122.1。

32技术原理

.

原位杂交检测方法是以非放射性标记物地高辛标记的白斑综合征病毒核酸探

———(DIG)(WSSV)

针与存在于切片中的进行核酸分子杂交并通过抗原抗体反应和酶底物的化学显色反应

WSSVDNA,--

在组织切片上显示出的存在位点原位杂交可完整保持组织与细胞形态能在复杂组织中对单

WSSV。,

一细胞进行病毒检测准确反映组织细胞中病毒的分布

,。

4试剂和材料

41除非另有说明在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水

.,。

42核酸探针按中的规定

.GB/T28630.1—20126.2。

43碱性磷酸酶偶联的抗体抗生化试剂

.DIG(AP-DIG,0.75U/μL,4℃):。

44二甲苯

.。

45无水乙醇

.。

46乙醇

.95%。

47中性树胶生物染色用

.:。

48石蜡熔点切片级

.

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