DB11-T677-2009动物防疫抽样规范

北京DB市地方标准DB11/T677—2009动物防疫抽样规范specificationsforanimalepidemicprevention12发布4-01实施北京市质量技术监督局发布IDBT77—2009 6抽样范围 27抽样数量 28抽样 2 一般脏器 3组织 38.4食道/咽部刮取物(O-P液) 3 粘膜 4髓液 4 10样本的保存运输 6 DBT77—2009前言京市农业局提出。准化技术委员会养殖业分会归口。农业局组织实施。：靳兴军、梁明珍、李志军、张跃、沈光年、吴惠明、郭峰、胡楠、赵春颖。1DBT77—2009疫病实验室血清学监测、分子生物学监测、病原学监测等抽样工作。2术语和定义epticoperation微生物进入动物体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作。动物防疫抽样Samplingforanimalepidemicprevention一定的规则采集动物体液、脏器等样本的行为。portion3一般要求3.1根据国家和北京市动物防疫的抽样计划，设定常规监测、疫点、疫区、受威胁区疫病监测抽样种具。时，要选取有代表性的样品，进行多点、全面的采集。止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和病害尸体的处理。份样本，使用一套器械与容器，使用过的用具应先消毒后清洗。4抽样前准备准备口罩、帽子、防护眼镜、防护服、手套、胶靴等人员防护用品。.2准备灭菌处理的解剖刀、镊子等抽样用器具。5抽样动物种类家禽。5.3宠物(犬、猫)。2DBT77—20096抽样范围域包括规模化种畜禽场、商品畜禽场、养殖小区、养殖户等。6.2流通区域包括从事动物及动物产品交易活动的批发市场、零售市场、宠物交易市场及动物隔离场域包括畜禽屠宰场、公园、动物园、野禽栖息地等。抽样数量规监测抽样数量1000~5000500~1000100~500宠物(犬、猫)物.2疫点监测抽样数量数宠物(犬、猫)物区监测抽样数量宠物(犬、猫)物区监测抽样数量宠物(犬、猫)物8抽样.1血液.1.1抽样部位.1.2抽样方法3DBT77—2009.1.3处理方法8.1.3.1全血8.1.3.2血清全血凝固后，在室温下静置至自然析出。方法二：全血凝固后，1500r/min~2500r/min，离心10min，吸取上清液。8.1.3.3血浆静置，待细胞下沉后，吸取上清液。.2一般脏器.2.1抽样部位2.1.7淋巴结。.2.2抽样方法.2.3处理方法放在无菌容器内。8.2.3.2用于病毒分离的组织，放在装有病毒保存缓冲液的容器内,病毒保存缓冲液的配制见附录A.2。脑组织.3.1抽样部位.1.3脑干。.3.2抽样方法.3.3处理方法方法二：将组织样本-20℃~-70℃冷冻。8.4食道/咽部刮取物(O-P液)4DBT77—2009.4.1抽样部位.4.2抽样方法8.4.2.1被检动物在抽样前禁食(可饮少量水)12h，探杯用0.2%柠檬酸浸泡5min，再用接近动物体的清水冲洗探杯后使用，每采完一份样本，探杯要进行消毒并充分清洗。8.4.2.2动物站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部10cm~15cm处，轻轻来回移动2~3次，然后将探杯拉出，采集8mL~10mLO-P液。.4.3处理方法呼吸道分泌物.5.1抽样部位.1.1鼻腔。.1.2咽喉。.1.3气管。.5.2抽样方法.5.3处理方法8.6眼睛.6.1抽样部位8.6.1.1眼结膜表面。.6.2抽样方法.6.2.2取病变组织碎屑，置载玻片上，制成玻璃触片。7皮肤及粘膜法：脊髓液1)抽样使用特制的专用消毒穿刺针。汁.9.1抽样部位5DBT77—2009.9.2抽样方法用消毒药水洗净取乳者的手和动物乳房，弃去最初所挤的3mL~4mL乳汁，采集10mL乳汁于灭菌。.9.3处理方法或强烈震动。0胃内容物.10.1抽样部位.10.2抽样方法液即可自动流入手深入口腔取出8.10.2.3对死亡的动物直接剖检采集。.10.3处理方法取出的胃内容物应即放在0℃~4℃中保存。1肠内容物.11.1抽样部位.11.2抽样方法，从肠腔内吸取两端剪断，单独放在已消毒的容器内。.11.3处理方法。8.12粪便.12.1抽样部位.12.2抽样方法地插到直肠粘膜表面转一圈采集。.12.3处理方法3胎儿4动物尸体将病死动物尸体装入两层不漏水的塑料袋内，放入有冰袋的冷藏箱。精液.15.1抽样方法法采取精液。.15.2处理方法5.2.2样本中不得加入防腐剂。生殖道分泌物.16.1抽样方法DBT77—2009有灭菌纱布条的长钳子采取阴道粘液。用灭菌生理盐水浸湿)的尿道敷料钳或尿道探子插入尿道轻轻转动采尿道黏液。.16.2处理方法6.2.2制成玻璃触片。环境病原微生物.17.1抽样地点.17.2抽样方法8.17.2.1空气样本采样器直接采集。.17.2.2水样本8.17.2.3土壤样本过的勺或铲取土样约200g~300g，装于灭菌容器内，混合后送检。.17.3处理方法9抽样的记录9.1对所有样本统一编号，确保统一编号与原始编号相对应，每份样本上标注唯一标识，疑似人畜共9.3各类动物样本的记录，可按照附录表B.1~表B.3的格式填写。h藏。的样本，应置于-20℃以下冷冻，但要尽量避免反复冻融。应避免使用化学防腐剂。10.4样本运送应符合生物安全要求，应遵循世界卫生组织对传染性物质和诊断性标本的安全运送指的条件下运送。签并做“上、下”标记箭头。67DBT77—2009(规范性附录)用溶液的配制A.1阿(Alserer)氏液A.2病毒保存缓冲液(0.01mol/L、PH7.2磷酸盐缓冲盐水)的配制mol/LA液14mLmol/LB液36mLNaCl8.5g释至1000mLA.330%甘油盐水缓冲液油(CH2OHCHOHCH2OH)O(C19H14O5S)A.4Earle细胞培养液8DBT77—2009KCl酸氢钠(NaHCO3)*Cl酚红液A.5肉汤(broth)A.6磷酸盐缓冲液(0.04mol/L、pH7.4)O加双蒸水至1000.0mL，pH7.4~7.6A.7汉克氏(Hanks)液9溶液(1)KCl溶液(2)DBT77—2009将上述(1)、(2)两种溶液混合后，加双蒸水至500mL，再加氯仿1mL作为防腐剂，放置0C~4CO酚红液将上述甲、乙二溶液混合后，加双蒸水至500mL，加氯仿1mL，置0C~4C中保存。此溶液保存于0C~4C，可使用1个月。用前以5.6%碳酸氢钠液(70kPa10min灭菌)调整pH为7.4~7.6。DBT77—2009(规范性附录)录表格地点村街道小区(只)场名次日期□肉鸭□蛋鸭□鹅□鸽□其它日龄量份号号子份号场种类□散养户□市场疫苗名称次数型年月日次年月日次年月日次型年月日次年月日次年月日次年月日次场户负责人签字：年月日字：年月日年月日.样本序号指采样管上所标示的号码。4.疫苗接种类型填写单价、多价等型。DBT77—2009地点村街道小区(只)场名次日期殖小区□散养户□屠宰场□犬场□其它日龄量份号——号份——号份——号份——号OP液份——号份——号它份——号疫苗名称次数型年月