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文档简介

章病毒感染的检查方法与防治原则详解演示文稿当前1页,总共39页。(优选)章病毒感染的检查方法与防治原则当前2页,总共39页。标本的采集与送检

1.标本中常加入抗生素。2.低温保存,尽快送检。3.血清学标本:两份当前3页,总共39页。二、病毒的分离与鉴定标本分离培养动物接种鸡胚培养细胞培养病毒形态观察光镜电镜包涵体病毒体CPETCID50,PFU当前4页,总共39页。(一)病毒的分离培养

1.动物接种

应用:尚无敏感细胞的病毒培养动物:兔、鼠、黑猩猩、猴等优点:结果易观察,可建立动物模型缺点:有饲养条件要求,费用高,动物体内常带有潜伏病毒当前5页,总共39页。动物接种当前6页,总共39页。2.鸡胚培养

采用孵化9-14天的鸡胚

绒毛尿囊膜(allantocherion)痘苗病毒、人类疱疹病毒

尿囊腔(allantoiccavity)接种部位流感病毒、腮腺炎病毒

羊膜腔(amnioticcavity)流感病毒的初次分离

卵黄囊(yolksac)嗜神经病毒当前7页,总共39页。当前8页,总共39页。优点:易管理,不带微生物,成本较低缺点:操作程序复杂当前9页,总共39页。当前10页,总共39页。3.细胞培养

单层细胞培养(monolayercellculture)悬浮细胞培养(suspendedcellculture)

原代细胞(primarycell)细胞种类二倍体细胞(diploidcell)传代细胞系(continuouscellline)当前11页,总共39页。病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞当前12页,总共39页。

病毒增殖的指征

1.细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)

①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等(多数病毒);②形成多核巨细胞或称融合细胞(麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等);③在培养细胞中形成包涵体(狂犬病病毒、麻疹病毒等)。当前13页,总共39页。当前14页,总共39页。麻疹病毒感染细胞呼吸道合胞病毒感染细胞形成多核巨细胞或称融合细胞当前15页,总共39页。形成包涵体(inclusionbody)当前16页,总共39页。腮腺炎病毒感染细胞2.红细胞吸附(hemadsorption)病毒囊膜表面血凝素(HA)+红细胞表面HA受体当前17页,总共39页。3.干扰现象(interference)4.细胞代谢改变

细胞代谢变慢pH变化减慢当前18页,总共39页。

(二)病毒的鉴定

病毒形态学鉴定病毒血清学鉴定

病毒分子生物学鉴定当前19页,总共39页。(三)病毒数量与感染性测定1.血凝试验:病毒总量(活病毒+死病毒)2.空斑形成试验(plaqueformationtest)3.50%组织细胞感染量(50%tissuecultureinfectiousdose,TCID50)感染性病毒量当前20页,总共39页。空斑试验当前21页,总共39页。三、病毒感染的血清学诊断应用:①采取标本分离病毒为时已晚②目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒③为证实所分离的病毒的临床意义④进行血清流行病学调查等当前22页,总共39页。1.中和试验(neutralizingtest)病毒+中和抗体病毒失去感染性

特点:特异性高,抗体维持时间长应用:人群免疫情况的调查临床诊断少用当前23页,总共39页。

2.血凝抑制试验(hemagglutinationinhibitiontest)—正粘病毒型与亚型鉴定

病毒+鸡红细胞=凝集(血凝试验)

病毒+特异性抗体+鸡红细胞=不凝集(血凝抑制试验)

当前24页,总共39页。3.补体结合试验

(complementfixationtest)

用已知病毒可溶性补体抗原检测病人血清中相应的补体抗体

特点:特异性低,抗体出现早,消失快应用:近期感染指标。当前25页,总共39页。四、病毒感染的快速诊断数小时内出结果病毒颗粒病毒成分(抗原或核酸)早期抗体检测(IgM)当前26页,总共39页。(一)形态学检查电镜和免疫电镜检查普通光学显微镜检查包涵体当前27页,总共39页。(二)病毒成分检测1.病毒蛋白抗原检测

免疫标记技术2.病毒核酸检测

核酸扩增技术核酸杂交技术基因芯片技术基因测序当前28页,总共39页。(三)早期抗体检测

可诊断急性感染特异性IgM抗体:孕妇感染风疹病毒EBV早期抗原抗体

当前29页,总共39页。第二节病毒感染的特异性预防当前30页,总共39页。人工主动免疫(artificialactiveimmunization):将疫苗(vaccine)或类毒素(toxoid)接种于人体,使机体主动产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施。主要用于预防当前31页,总共39页。疫苗

第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗活疫苗亚单位疫苗基因工程疫苗重组载体疫苗合成肽疫苗DNA疫苗转基因植物疫苗当前32页,总共39页。当前3

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