大孔吸附树脂吸附纯化甘草酸的工艺研究

大孔吸附树脂吸附纯化甘草酸的工艺研究第1页/共21页甘草主要成分甘草酸(glycyrrhizicacid,GA)可以消炎解毒、防治病毒性肝炎和高血脂症,此外对癌症、艾滋病也有显著疗效.本试验探讨了几种大孔吸附树脂对甘草酸粗品的纯化效果，确定了甘草酸纯化的工艺参数。前言第2页/共21页1.1材料与设备甘草；大孔吸附树脂（CAD-40、DM-130、860021）；紫外可见分光光度计，电脑紫外检测仪；真空冷冻干燥机；高速冷冻离心机；酸度计1材料与方法第3页/共21页甘草→粉碎→浸提→减压蒸馏→酸沉→离心、水洗→甘草酸粗品→萃取、脱色→树脂吸附→洗脱→真空干燥→产品1.2工艺流程

第4页/共21页1.3.1原料预处理将甘草切片烘干粉碎过40目筛，称取一定量甘草粉末，加提取溶剂进行超声或微波处理，再连续回流、离心、抽滤得甘草酸提取液，将提取液减压浓缩至一定体积，加浓盐酸调pH2～3，静置12h后离心，沉淀水洗3次，真空冷冻干燥得甘草酸粗品。再将甘草酸粗品用70%乙醇溶解、脱色、过滤，配成一定浓度的甘草酸溶液，作为上柱液。

1.3方法

第5页/共21页准确称取预处理后5g(湿基)的CAD-40、DM-130、860021吸附剂于100mL锥形瓶中，分别加入准确量取的50mL甘草酸粗提物。在20℃、105r/min的恒温水浴振荡器中振荡，每隔1h测定滤液中残余甘草酸浓度，计算各种吸附剂对甘草酸的饱和吸附量1.3.2静态吸附试验第6页/共21页

1.3.3.1径高比试验配制一定浓度的甘草酸粗提物，在加样量相同的情况下，改变层析柱（Ф2×30cm）不同高度进行动态吸附，每流出3mL流出液测定甘草酸1次，以流出液体积（mL）为横坐标，吸光度（OD）为纵坐标，确定最佳径高比1.3.3动态吸附研究

第7页/共21页配制浓度为7.0mg/mL的甘草酸粗提物，以1.0mL/min的吸附流速通过树脂柱，测定流出液中甘草酸的吸光度，根据泄漏点来确定加样量1.3.3.2加样量试验第8页/共21页准确量取2.5BV体积的液体上柱，使液面高于树脂界面3cm左右，以一定流速洗脱。测量流出液的吸光度值，当吸光度达到甘草酸粗提物的1/10时，停止上柱，此时作为吸附泄漏点。可以认为CAD-40对甘草酸的吸附达到饱和，再用2BV～3BV的中性或弱碱性水洗，洗脱速度控制在0.8mL/min，用不同浓度的乙醇作为洗脱液，收集洗脱液并测定洗脱液的吸光度，确定最佳的解吸剂浓度1.3.3.3解吸剂浓度试验第9页/共21页配制一定浓度的甘草酸粗提物，在加样量相同的情况下，选用不同的解吸流速进行洗脱，考察解吸流速对甘草酸洗脱率的影响。1.3.3.4解吸剂流速试验第10页/共21页2结果与分析

2.1大孔吸附树脂对甘草酸的静态吸附性能研究第11页/共21页可见，CAD-40树脂的洗脱率最高，其吸附量也最大；因此，选用CAD-40树脂为纯化甘草酸的树脂。分析原因，主要是因为：甘草酸为大分子，孔径较大的树脂有利于其吸附；洗脱率的大小主要取决于吸附剂与吸附质的作用力，甘草酸具有多酚结构和糖甙链，具有一定极性和亲水性，DM-130和860021树脂是弱极性树脂，吸附力强，所以洗脱率偏低，CAD-40树脂是非极性树脂，洗脱率较高。所以选择CAD-40树脂来纯化甘草酸第12页/共21页2.2.1径高比对CAD-40树脂吸附效果的影响

可见，树脂装柱太高、太低都对洗脱不利，考虑到工作效率，选用径高比为1∶10来纯化甘草酸。2.2CAD-40大孔吸附树脂的动态吸附性能研究第13页/共21页

可见，当上样量达到5.0mL时，即吸附达到饱和。2.2.2上样量对CAD-40树脂吸附效果的影响第14页/共21页

可见，随着乙醇浓度的减小，洗脱峰的峰值也随之下降，拖尾现象也比较明显。因此，选用95%乙醇洗脱，可达到纯化甘草酸的目的2.2.3解吸剂浓度对CAD-40树脂吸附效果的影响第15页/共21页

可见，根据洗脱曲线的对称性可以看出，流速为1.0mL/min时，洗脱效果较好，拖尾现象也不太明显。考虑到工作效率和吸附效果，选用1.0mL/min为洗脱流速2.2.4解吸流速对CAD-40树脂吸附效果的影响第16页/共21页2.3产品测定第17页/共21页1）根据静态试验结果，选出分离纯化甘草酸的最佳树脂分别是CAD-40，其吸附率是90.91%，此时用95%乙醇解吸，解吸率可达88.53%3结论第18页/共21页2）CAD-40大孔吸附树脂对甘草酸吸附最佳工作条件为：层析柱Ф2×30cm，上柱液浓度7.0mg/mL、加样量5.0mL、装柱径高比1∶10、然后用水洗