2023生物化学知识点版

第一章蛋白质化学

教学目标：

1.掌握蛋白质的概念、重要性和分子组成。

2.掌握a-氨基酸的结构通式和20种氨基酸的名称、符号、结构、分类；掌握氨基酸的重要性质；熟悉肽和活性肽的概念。

3.掌握蛋白质的一、二、三、四级结构的特点及其重要化学键。

4.了解蛋白质结构与功能间的关系。

5.熟悉蛋白质的重要性质和分类

第一节蛋白质的分子组成

一、蛋白质的元素（化学）组成

主要有C（50%〜55%）、H（6%〜7%）、0（19%~24%）4N（13%〜19、）、S（0%〜4%）。有些蛋白质还含微量的P、Fe、Cu、Zn、Mn、

Co、Mo、I等。

各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16%,因此，可以用定氮法来推算样品中蛋白质的大致含量。

每克样品含氮克数X6.25X100=100g样品中蛋白质含量（g%）

二'蛋白质的基本组成单位一氨基酸

蛋白质在酸'碱或蛋白酶的作用下，最终水解为游离氨基酸（aminoacid）,即蛋白质组成单体或构件分子。存在于自然界中的氨基酸有

300余种，但合成蛋白质的氨基酸仅20种（称编码氨基酸），最先发现的是天门冬氨酸（1806年），最后鉴定的是苏氨酸（1938年）。

（三）氨基酸的重要理化性质

1.一般物理性质

a-氨基酸为无色晶体，熔点一般在200°C以上。各种氨基酸在水中的溶解度差别很大（酪氨酸不溶于水）。一般溶解于稀酸或稀碱,

但不能溶解于有机溶剂，通常酒精能把氨基酸从其溶液中沉淀析出。

芳香族氨基酸（Tyr、Trp、Phe）有共聊双键，在近紫外区有光吸收能力，Tyr、Trp的吸收峰在280nm,Phe在265nm。由于大多数

蛋白质含Tyr、Trp残基，所以测定蛋白质溶液280nm的光吸收值，是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。

2.两性解离和等电点（isoelectricpoint,pl）

氨基酸在水溶液或晶体状态时以两性离子的形式存在，既可作为酸（质子供体），又可作为碱（质子受体）起作用，是两性电解质，

其解离度与溶液的pH有关。

在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势和程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液的pH称为该氨基酸的等

电点。氨基酸的Pl是由a-艘基和a-氨基的解离常数的负对数pK1和pK2决定的。计算公式为：p1=1/2（pK1+pK2）。

若1个氨基酸有3个可解离基团，写出它们电离式后取兼性离子两边的pK值的平均值，即为此氨基酸的等电点（酸性氨基酸的等电

点取两拨基的PK值的平均值，碱性氨基酸的等电点取两氨基的pK值的平均值）.

第二节蛋白质的分子结构

蛋白质是生物大分子，结构比较复杂，人们用4个层次来描述，包括蛋白质的一级、二级、三级和四级结构。一级结构描述的是蛋白

质的线性（或一维）结构，即共价连接的氨基酸残基的序列，又称初级或化学结构。二级以上的结构称高级结构或构象（conformation）。

—V蛋白质的一级结构（primarystructure）

1953年，英国科学家F.Sanger首先测定了胰岛素（insulin）的一级结构，有51个氨基酸残基，由一条A链和一条B链组成，分子

中共有3个二硫键，其中两个在A、B链之间，另一个在A链内。

蛋白质的一级结构测定或称序列分析常用的方法是Edman降解和重组DNA法。Edman降解是经典的化学方法，比较复杂。首先要纯化

一定量的待测蛋白质，分别作分子量测定、氨基酸组成分析、N-末端分析、C-末端分析；要应用不同的化学试剂或特异的蛋白内切酶水解

将蛋白质裂解成大小不同的肽段，测出它们的序列，对照不同水解制成的两套肽段，找出重叠片段，最后推断蛋白质的完整序列。重组DNA

法是基于分子克隆的分子生物学方法，比较简单而高效，不必先纯化该种蛋白质，而是先要得到编码该种蛋白质的基因（DNA片段），测

定DNA中核昔酸的序列，再按三个核昔酸编码一个氨基酸的原则推测蛋白质的完整序列。这两种方法可以相互印证和补充。

目前，国际互联网蛋白质数据库已有3千多种一级结构清楚。蛋白质一级结构是空间结构和特异生物学功能的基础。

二、蛋白质的二级结构（secondarystructure）

蛋白质的二级结构是指其分子中主链原子的局部空间排列，是主链构象（不包括侧链R基团）o

构象是分子中原子的空间排列，但这些原子的排列取决于它们绕键的旋转，构象不同于构型，一个蛋白质的构象在不破坏共价键情况

下是可以改变的。但是蛋白质中任一氨基酸残基的实际构象自由度是非常有限的，在生理条件下，每种蛋白质似乎是呈现出称为天然构象

的单一稳定形状。

20世纪30年代末，L.Panling和R.B.Corey应用X射线衍射分析测定了一些氨基酸和寡肽的晶体结构，获得了一组标准键长和键角，

提出了肽单元（peptideunit）的概念，还提出了两种主链原子的局部空间排列的分子模型（a-螺旋）和-折叠）。

1.肽单位

肽键及其两端的a-C共6个原子处于同一平面上，组成了肽单位（所在的平面称肽键平面）。

肽键C-N键长为0.132nm,比相邻的单键（0.147nm）短，而较C=N双键（0.128nm）长，有部分双键的性质，不能自由旋转。肽键平

面上各原子呈顺反异构关系，肽键平面上的0、H以及2个a-碳原子为反式构型（transconfiguration）„

主链中的Ca—C和Ca—N单键可以旋转，其旋转角0、W决定了两个相邻的肽键平面相对关系。由于肽键平面的相对旋转，使主链

可以以非常多的构象出现。事实上，肽链在构象上受到很大限制，因为主链上有1/3不能自由旋转的肽键，另外主链上有很多侧链R的影

响。蛋白质的主链骨架由许多肽键平面连接而成。

2.a-螺旋（a-heIix）

a-螺旋是肽键平面通过a-碳原子的相对旋转形成的一种紧密螺旋盘绕，是有周期的一种主链构象。其特点是：

①螺旋每转一圈上升3.6个氨基酸残基，螺距约0.54nm（每个残基上升0.15nm,旋转1000）。

②相邻的螺圈之间形成链内氢键，氢键的取向几乎与中心轴平行。典型a-螺旋一对氢键。与N之间共有13个原子（3.613）,前后间隔

3个残基。

③螺旋的走向绝大部分是右手螺旋，残基侧链伸向外侧。R基团的大小、荷电状态及形状均对a-螺旋的形成及稳定有影响。

3.B-折叠（。-pleatedsheet）

P-折叠是一种肽链相当伸展的周期性结构。

①相邻肽键平面间折叠成1100角，呈锯齿状。

②两个以上具。-折叠的肽链或同一肽链内不同肽段相互平行排列，形成折叠片层，其稳定因素是肽链间的氢键。

③逆向平行的片层结构比顺向平行的稳定。

a-螺旋和（J-折叠是蛋白质二级结构的主要形式。毛发中的a-角蛋白和蚕丝中的丝心蛋白是其典型，在许多球蛋白中也存在，但所

占比例不一样。

胶原蛋白中存在的螺旋结构不同于一般的a-螺旋，是由3条具有左手螺旋的链相互缠绕形成右手超螺旋分子。链间氢键以及螺旋和

超螺旋的反向盘绕维持其稳定性。

4.（3-转角（（J-turn）

为了紧紧折叠成球蛋白的紧密形状，多肽链1800回折成发夹或（3-转角。其处由4个连续的氨基酸残基构成，常有Gly和Pro存在，

稳定转角的作用力是第一个氨基酸残基粉基氧（0）与第四个氨基酸残基的氨基氢（H）之间形成的氢键。B-转角常见于连接反平行B

-折叠片的端头。

5.无规卷曲（randomcoil）

多肽链的主链呈现无确定规律的卷曲。典型球蛋白大约一半多肽链是这样的构象。

6.超二级结构和结构域

超二级结构和结构域是蛋白质二级至三级结构层次的一种过渡态构象。

超二级结构指蛋白质中两个或三个具有二级结构的肽段在空间上相互接近，形成一特殊的组合体，又称为模体（motif）。通常有a

a,（3p,Ba（3等，例如钙结合蛋白质中的螺旋-环-螺旋模序及锌指结构。

结构域是球状蛋白质的折叠单位，是在超二级结构基础上进一步绕曲折叠有独特构象和部分生物学功能的结构。对于较小的蛋白质分

子或亚基，结构域和三级结构是一个意思，即这些蛋白质是单结构域的；对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个或两个以上的

相对独立的结构域缔合成三级结构。

三、蛋白质的三级结构（tertiarystructure）

指一条多肽链中所有原子的整体排布，包括主链和侧链。维系三级结构的作用力主要是次级键（疏水相互作用、静电力、氢键等）。

在序列中相隔较远的氨基酸疏水侧链相互靠近，形成“洞穴”或“口袋”状结构，结合蛋白质的辅基往往镶嵌其内，形成功能活性部位，

而亲水基团则在外，这也是球状蛋白质易溶于水的原因。1963年Kendrew等从鲸肌红蛋白的X射线衍射图谱测定它的三级结构（153个氨

基酸残基和一个血红素辅基，相对分子质量为17800）。由ATH8段a-螺旋盘绕折叠成球状，氨基酸残基上的疏水侧链大都在分子内部

形成一个袋形空穴，血红素居于其中，富有极性及电荷的则在分子表面形成亲水的球状蛋白。

四、蛋白质的四级结构（quaternarystructure）

有些蛋白质的分子量很大，由2条或2条以上具有独立三级结构的多肽链通过非共价键相互结合而成，称为蛋白质的四级结构。构成

四级结构的每条多肽链称为亚基（subunit）,亚基单独存在时一般没有生物学功能，构成四级结构的几个亚基可以相同或不同。如血红蛋

白（hemoglobin,Hb）是由两个a-亚基和两个B-亚基形成的四聚体（a202）。

五、蛋白质分子中的化学键

蛋白质的一级结构是由共价键形成的，如肽键和二硫键。而维持空间构象稳定的是非共价的次级键。如氢键、盐键、疏水键、范德华

引力等。

第三节蛋白质结构与功能的关系

一、蛋白质一级结构与功能的关系

(-)一级结构是空间构象的基础

20世纪60年代初，美国科学家C.Anfinsen进行牛胰核糖核酸酶的变性和复性实验，提出了蛋白质一级结构决定空间结构的命题。

核糖核酸酶由124个氨基酸残基组成，有4对二硫键。用尿素和筑基乙醇处理该酶溶液，分别破坏次级键和二硫键，肽链完全伸

展，变性的酶失去催化活性；当用透析方法去除变性剂后，酶活性几乎完全恢复，理化性质也与天然的酶一样。

概率计算表明，8个半胱氨酸残基结合成4对二硫键，可随机组合成105种配对方式，而事实上只形成了天然酶的构象，这说明一级

结构未破坏，保持了氨基酸的排列顺序就可能回复到原来的三级结构，功能依然存在。

(-)种属差异

大量实验结果证明，一级结构相似的多肽或蛋白质，其空间结构和功能也相似，不同种属的同源蛋白质有同源序列，反映其共同进化

起源，通过比较可以揭示进化关系。

例如哺乳动物的胰岛素，其一级结构仅个别氨基酸差异(A链5、6、10位，B链30位)，它们对生物活性调节糖代谢的生理功能不

起决定作用。

从各种生物的细胞色素C(cytochromec)的一级结构分析，可以了解物种进化间的关系。进化中越接近的生物，它们的细胞色素c

的一级结构越近似。

(三)分子病

分子病是指机体DNA分子上基因缺陷引起mRNA分子异常和蛋白质生物合成的异常，进而导致机体某些功能和结构随之变异的遗传病。

在1904年，发现镰刀状红细胞贫血病。大约化费了40多年才清楚患病原因，患者的血红蛋白(HbS)与正常人的(HbA)相比，仅0-链

的第6位上，Vai取代了正常的Glu。目前全世界已发现有异常血红蛋白400种以上。

二、蛋白质空间结构与功能的关系

蛋白质的空间结构是其生物活性的基础，空间结构变化，其功能也随之改变。肌红蛋白(Mb)和血红蛋白(Hb)是典型的例子。

肌红蛋白(Mb)和血红蛋白(Hb)都能与氧进行可逆的结合，氧结合在血红素辅基上。然而Hb是四聚体分子，可以转运氧；Mb是单

体，可以储存氧，并且可以使氧在肌肉内很容易地扩散。它们的氧合曲线不同，Mb为一条双曲线，Hb是一条S型曲线。在低p(02)下，

肌红蛋白比血红蛋白对氧亲和性高很多，p(02)为2.8t。rr(1t。rry133.3Pa)时，肌红蛋白处于半饱和状态。在高p(02)下，如在肺部(大

约100torr)时，两者几乎都被饱和。其差异形成一个有效的将氧从肺转运到肌肉的氧转运系统。

Hb未与氧结合时，其亚基处于一种空间结构紧密的构象(紧张态，T型)，与氧的亲和力小。只要有一个亚基与氯结合，就能使4个

亚基间的盐键断裂，变成松弛的构象(松弛态，R型)。T型和R型的相互转换对调节Hb运氧的功能有重要作用。一个亚基与其配体结合

后能促进另一亚基与配体的结合是正协同效应，其理论解释是Hb是别构蛋白，有别构效应。

第四节蛋白质的理化性质

蛋白质的理化性质和氨基酸相似，有两性解离及等电点、紫外吸收和呈色反应。作为生物大分子，还有胶体性质、沉淀、变性和凝固

等特点。要了解和分析蛋白质结构和功能的关系就要利用其特殊的理化性质，采取盐析、透析、电泳、层析及离心等不损伤蛋白质空间构

象的物理方法分离纯化蛋白质。

一、蛋白质的高分子性质

蛋白质的相对分子质量在1万~100万，其颗粒平均直径约为4.3nm(胶粒范围是1~100nm)。准确可靠的测定方法是超离心法，蛋白

质的相对分子质量可用沉降系数(S)表示。

在球状蛋白质三级结构形成时，亲水基团位于分子表面，在水溶液中与水起水合作用，因此，蛋白质的水溶液具有亲水胶体的性质。

颗粒表面的水化膜和电荷是其稳定的因素，调节pH至pl、加入脱水剂等，蛋白质即可从溶液中沉淀出来。

透析法是利用蛋白质不能透过半透膜的性质，去掉小分子物质，达到纯化的目的。

大小不同的蛋白质分子可以通过凝胶过滤分开。又称分子筛层析。

二、蛋白质的两性解离

蛋白质和氨基酸一样是两性电解质，在溶液中的荷电状态受PH值影响。当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋

势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为该蛋白质的等电点。pH>pl时，该蛋白质颗粒带负电荷，反之则带正电荷。

在人体体液中多数蛋白质的等电点接近PH5,所以在生理pH7.4环境下，多数蛋白质解离成阴离子。少量蛋白质，如鱼精蛋白、组蛋白的

pl偏于碱性，称碱性蛋白质，而胃蛋白酶和丝蛋白为酸性蛋白。

三、蛋白质的变性、沉淀和凝固

蛋白质在某些理化因素的作用下，空间结构被破坏，导致理化性质改变，生物学活性丧失，称为蛋白质的变性(denaturation)。

蛋白质变性的本质是多肽链从卷曲到伸展的过程，不涉及一级结构的改变(如加热破坏氢键，酸碱破坏盐键等)。变性作用不过于剧

烈，是一种可逆反应，去除变性因素，有些蛋白质原有的构象和功能可恢复或部分恢复，称为复性（denaturation）.

蛋白质变性的主要表现是失去生物学活性，如酶失去催化能力、血红蛋白失去运输氧的功能、胰岛素失去调节血糖的生理功能等。变

性蛋白溶解度降低，易形成沉淀析出；易被蛋白水解酶消化。蛋白质变性具有重要的实际意义。

蛋白质自溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。盐析、有机溶剂、重金属盐、生物碱试剂都可沉淀蛋白质。盐析沉淀蛋白质不变性，

是分离制备蛋白质的常用方法。如血浆中的清蛋白在饱和的硫酸铁溶液中可沉淀，而球蛋白则在半饱和硫酸镂溶液中发生沉淀。乙醇、丙

酮均为脱水剂，可破坏水化膜，降低水的介电常数，使蛋白质的解离程度降低，表面电荷减少，从而使蛋白质沉淀析出。低温时，用丙酮

沉淀蛋白质，可保留原有的生物学活性。但用乙醇，时间较长则会导致变性。重金属盐（Hg2+、Cu2+、Ag+）,生物碱（如三录乙酸、苦

味酸、鞅酸）与蛋白质结合成盐而沉淀，是不可逆的。

蛋白质变性不一定沉淀（如强酸、强碱作用变性后仍然能溶解于强酸、强碱溶液中，将pH调至等电点，出现絮状物，仍可溶解于强

酸、强碱溶液，加热则变成凝块，不再溶解）。凝固是蛋白质变性发展的不可逆的结果。沉淀的蛋白质不一定变性（如盐析）。

四、蛋白质的紫外吸收和呈色反应

蛋白质含芳香族氨基酸，在280nm波长处有特征性吸收峰，用于定量测定。

蛋白质分子中的多种化学基团具有特定的化学性能，与某些试剂产生颜色反应，可用于定性、定量分析。如蛋白质分子中含有许多和

双缩麻结构相似的肽键，在碱性溶液与硫酸铜反应产生红紫色络合物（双缩服反应）。酪氨酸含酚基，与米伦试剂生成白色沉淀，加热后

变红色。Folin-酚试剂与酪氨酸反应生成蓝色。色氨酸与乙醛酸反应，慢慢注入浓硫酸，出现紫色环。

第五节蛋白质的分类

自然界蛋白质分布广泛，种类繁多，有1012ro13种。目前仍无法按蛋白质的化学结构进行精确的分类，一般按蛋白质的分子形状、

分子组成、生物功能进行分类。

1.按分子形状分为球状蛋白质和纤维状蛋白质。

2.按分子组成分为简单蛋白质和结合蛋白质。

简单蛋白质完全水解的产物仅为a-氨基酸。这类蛋白质按其溶解度等理化性质分为7类。包括清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白、精

蛋白'组蛋白和硬蛋白。

结合蛋白质由简单蛋白质和非蛋白质（辅基）组成。根据辅基的不同，这类蛋白质可分为5类。如核蛋白、糖蛋白、脂蛋白、色蛋白

和磷蛋白。

细胞核中的核蛋白是DNA与组蛋白结合而成，细胞质中的核糖体是RNA与蛋白质组成的，已知的病毒也是核蛋白。免疫球蛋白是一类

糖蛋白，由蛋白质与糖以共价键相连而成；脂蛋白由蛋白质与脂类通过非共价键相连，存在生物膜和动物血浆中。

3.按蛋白质功能分为活性蛋白质和非活性蛋白质。

活性蛋白质包括有催化功能的酶、有调节功能的激素、有运动、防御、接受和传递信息的蛋白质以及毒蛋白、膜蛋白等。胶原、角蛋

白、弹性蛋白、丝心蛋白等是非活性蛋白质。

第二章核酸的化学

教学目标：

1.掌握DNA和RNA在化学组分、分子结构和生物功能上的特点。

2.掌握DNA双螺旋结构模型和t-RNA二级结构的要点，了解核酸的三级结构。

3.熟悉核酸的性质（一般性质、DNA热变性、复性与分子杂交）。

4.掌握基因组的概念，原核生物和真核生物基因组的特点。了解DNA测序的原理。

导入：核酸是生物遗传的物质基础。它的发现和研究进展如何？

1868年瑞士青年医生Miescher从脓细胞核中分离出一种含磷量很高的酸性化合物，称为核素。其继任者Altman发展了从酵母和动物

组织中制备不含蛋白质的核酸的方法，于1889年提出核酸（nucleicacid）这一名称。早期核酸研究因“四核昔酸假说”的错误进展缓

慢。

1943年Chargaff等揭示了DNA的碱基配对规律，1944年美国Avery利用致病肺炎球菌中提取的DNA使另一种非致病性的肺炎球菌的

遗传性状发生改变而成为致病菌，发现正是DNA携带遗传信息。Astbury、FrankIin和WiIkins用X射线衍射法研究DNA分子结构，得到

清晰衍射图。Watson和Crick在此基础上于1953年提出了DNA双螺旋结构模型，说明了基因结构、信息和功能三者之间的关系，奠定了

分子生物学基础。1958年Crick提出“中心法则”；60年代破译遗传密码，阐明3类RNA参与蛋白质生物合成的过程；70年代诞生了基

因重组和DNA测序生物技术，90年代提出人类基因组计划，21世纪进入后基因组时代。核酸的研究成了生命科学中最活跃的领域之一。

第一节核酸的化学组成

天然存在的核酸有两类，即脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)和核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)。DNA分子是生物

体的遗传信息库，分布在原核细胞的核区，真核细胞的核和细胞器以及病毒中；RNA分子参与遗传信息表达的一些过程，主要存在于细胞

质。

一、核酸的基本组成单位

核酸是一种多聚核昔酸，用不同的降解法得到其组成单位一核昔酸。而核昔酸又由碱基、戊糖和磷酸组成。

(-)戊糖

DNA含0-D-2-脱氧核糖，RNA含(3-D-核糖。这是核酸分类的依据。核糖中的C记为1'……5'.

(二)碱基(base)

核酸中的碱基有两类：瞟吟碱和喀喷碱。有5种基本的碱基外，还有一些含量甚少的稀有碱基。DNA和RNA中常见的两种喋吟碱是腺

口票岭(adenine,A)、鸟喋口令(guanine,G)。而喀口定碱有所不同：RNA主要含胞口密口定(cytosine,C)、尿嘴口足(uraciI,U),DNA主

要含胞喀口定、胸腺嗓口定(thymine,T),,

tRNA中含有较多的稀有碱基(修饰碱基)，多为甲基化的。

(三)核昔

是碱基和戊糖生成的糖昔。通过C1：N9或C1；N1糖昔键连接，用单字符表示，脱氧核昔则在单字符前加d。常见的修饰核昔有：

次黄首或肌昔为I、黄口票岭核普X、二氢尿喀咤核昔D、假尿昔甲等。注意符号的意义，如tn5dC。

(四)核昔酸

是核昔的磷酸酯。生物体内游离存在的多是5核苜酸(如pA、pdG等)。常见的核昔酸为AMP、GMA、CMP、UMP。常见的脱氧

核昔酸有dAMP、dGMA、dCMP、dTMP.AMP是一些重要辅酶的结构成分(如NAD+、NADP+、FAD等)；环化核昔酸(cAMP/cGMP)是细胞功能

的调节分子和信号分子。ATP在能量代谢中起重要作用。

核甘酸是两性电解质，有等电点。核昔酸有互变异构和紫外吸收。(含氧的碱基有酮式和烯醇式两种互变异构体，在生理pH条件下

主要以酮式存在)

二、核昔酸的连接方式

RNA和DNA链都有方向性，从5'T3、前一位核昔酸的3'-0H与下一位核昔酸的5'位磷酸基之间形成3，，5'-磷酸二酯键，

从而形成一个没有分支的线性大分子，两个末端分别称为5'末端和3,末端。大分子的主链由相间排列的戊糖和磷酸构成，而碱基可看

作主链上的侧链基团，主链上的磷酸基是酸性的，在细胞pH下带负电荷；而碱基有疏水性。

讨论：列表说明DNA和RNA在化学组成、分子结构和生物功能方面的主要特点。

第二节DNA的分子结构

一、DNA的一级结构(primarystucture)

DNA的一级结构是指分子中脱氧核甘酸的排列顺序，常被简单认为是碱基序列(basesequence)。碱基序有严格的方向性和多样性。

一般将5磷酸端作为多核苜酸链的“头”，写在左侧，如pACUGA(5〜3')。

在DNA一级结构中，有一种回文结构的特殊序列，所谓回文结构即DNA互补链上一段反向重复顺序，正读和反读意义相同，经反折可

形成“十字形”结构，在转录成RNA后可形成“发夹”样结构，有调控意义。

TGCTAGTTCACTCTGAACAATT-»

-CGATCAAGTGAGACTTGTTAA-

DNA分子很大，最小的病毒DNA约含5000b。1965年Holley用片段重叠法完成酵母tRNAala76nt序列测定；1977年Sanger利用双

脱氧法(酶法)测定了0X174单链DNA5386b的全序列。1990年实施的人类基因组计划(HGP),用15年，投资30亿美元，完成人类单

倍体基因组DNA3X109bp全序列的测定。该计划由美、英、日、法、德、中六国科学家合作，于2003年提前完成，生命科学进入后基因

组时代，研究重点从测序转向对基因组功能的研究。

二、DNA的二级结构——双螺旋(doublehelix)

1953年,Watson和Crick根据WiIkins和Franklin拍摄的DNAX-射线照片(DNA有0.34nm和3.4nm两个周期性变化)以及Chargaff

等人对DNA的碱基组成的分析(A=T,G=C,A+G=C+T),推测出DNA是由两条相互缠绕的链形成。Watson-Crick双螺旋结构模型如下图：

1.两条反向平行的多核昔酸链形成右手螺旋。一条链为5，T3',另一条为3，T5,.(某些病毒的DNA是单链分子ssDNA)

2.碱基在双螺旋内侧，A与T,G与C配对，A与T形成两个氢键，G与C形成三个氢键。糖基-磷酸基骨架在外侧。表面有一条大沟

和一小沟。

3.螺距为3.4nm,含10个碱基对(bp),相邻碱基对平面间的距离为0.34nm。螺旋直径为2nm。

氢键维持双螺旋的横向稳定。碱基对平面几乎垂直螺旋轴，碱基对平面间的疏水堆积力维持螺旋的纵向稳定。

4.碱基在一条链上的排列顺序不受限制。遗传信息由碱基序所携带。

5.DNA构象有多态性。

Watson和Crick根据Wilkins和Franklin拍摄的DNAX-射线照片是相对湿度92%的DNA钠盐所得的衍射图,因此Watson-Crick双

螺旋结构称B-DNA。细胞内的DNA与它非常相似。另外还有A-DNA、C-DNA、D-DNA.

1979年Rich发现Z-DNA（左手螺旋、螺距4.5nm、直径1.8nm）

三、DNA的三级结构

DNA双螺旋进一步盘曲所形成的空间构象称DNA的三级结构。

某些病毒、细菌、真核生物线粒体和叶绿体的DNA是环形双螺旋，再次螺旋化形成超螺旋；在真核生物细胞核内的DNA是很长的线形

双螺旋，通过组装形成非常致密的超级结构。

1.环形DNA可形成超螺旋

当将线性过旋或欠旋的双螺旋DNA连接形成一个环时，都会自动形成额外的超螺旋来抵消过旋或欠旋造成的应力，目的是维持B构象。

过旋DNA会自动形成额外的左手螺旋（正超螺旋），而欠旋形成额外的右手螺旋（负超螺旋）。

一段双螺旋圈数为10的B-DNA连接成环形时，不发生进一步扭曲，称松弛环形DNA（双螺旋的圈数=链绕数，即T=L,超螺旋数W=0；

L=T+W）,但将这一线形DNA的螺旋先拧松一圈再连接成环时，解链环形DNA存在的扭曲张力，可导致双链环向右手方向扭曲形成负超螺

旋（T=10,L=9,W=-1）。

在生物体内，绝大多数超螺旋DNA以负超螺旋的形式存在，也就是说，一旦超螺旋解开，则会形成解链环形DNA,有利于DNA复制或

转录。

螺旋具有相同的结构，但L值不同的分子称为拓扑异构体。DNA拓扑异构酶切断一条链或两条链，拓扑异构体可以相互转变。W的正

表示双链闭环的螺旋圈在增加，W的负表示减少。L和T的正负表示螺旋方向，右手为正，左手螺旋为负；L值必定是整数。

2.真核细胞染色体

真核细胞DNA是线形分子，与组蛋白结合，其两端固定也形成超螺旋结构。DNA被紧密地包装成染色体来自三个水平的折叠：核小体、

30nm纤丝和放射环。

核小体是染色体的基本结构单位，是DNA包装的第一步，它由DNA结合到组蛋白上形成复合物，在电镜下显示为成串的“念珠”状。

组蛋白是富含精氨酸和赖氨酸的碱性蛋白质，其氨基酸序列在进化中是高度保守的。组蛋白有5种，H2A、H2B、H3和H4各两分子组成的

八聚体是核小体核心颗粒，DNA缠绕其上，相邻核小体间的DNA称为连接DNA且结合H1。200bpDNA的长度约为68nm,被压缩在10nm的

核小体中。压缩比约为7。30nm纤丝是第二级压缩，每圈含6个核小体，压缩比是6。30nm螺旋管再缠绕成超螺旋圆筒，压缩比是40。再

进一步形成染色单体，总压缩近一万倍。典型人体细胞的DNA理论长度应是180cm,被包装在46个5um的染色体中。

四、DNA和基因组

1.DNA分子中的最小功能单位称作基因，为RNA或蛋白质编码的基因称结构基因，DNA中具调节功能而不转录生成RNA的片段称调节

基因。基因组（genome）是某生物体所含的全部基因，即全部DNA或完整的单套遗传物质（配子中的整套基因）。

2.细菌、噬菌体、大多数动植物病毒的基因组即指单个DNA分子■最小病毒如SV40的基因组仅有5226b,含5个基因。大肠杆菌含

4.6X106bp,有3000~4000个基因，DNA完全伸展总长约1.3mm。

原核生物基因组的特点是：结构简炼，绝大部分为蛋白质编码（结构基因）；有转录单元，即功能相关的基因常串联一起，并转录在

同一mRNA（多顺反子mRNA）中；有基因重叠现象，即同一段DNA携带两种不同蛋白质的信息。

3.真核生物基因一般分布在若干条染色体上，其特点是：有重复序列（按重复次数分单拷贝序、中度重复序和高度重复序）；有断

裂基因（由不编码的内含子和编码的外显子组成）.酵母基因组有1.35X107bp,含6374个基因。人类基因组有3X109bp,含4万个基

因。

第三节RNA的分子结构

RNA通常以单链形式存在，比DNA分子小得多，由数十个至数千个核昔酸组成。RNA链可以回折且通过A与U,G与C配对形成局部的

双螺旋，不能配对的碱基则形成环状突起，这种短的双螺旋区和环称为发夹结构。

RNA的C2'位羟基是游离的，是一个易发生不良反应的位置，它使RNA的化学性质不如DNA稳定，能较DNA产生更多的修饰组分。RNA

的种类、大小、结构都比DNA多样化，按照功能的不同和结构的特点，RNA主要分为tRNA、rRNA和mRNA三类。此外，细胞的不同部位还

存在着另一些小分子RNA,如核内小RNA（snRNA）、核仁小RNA（snoRNA）、胞质小RNA（scRNA）等，分别参与mRNA的前体（hnRNA）和

rRNA的转运和加工过程。

一、转运RNA（transferRNA,tRNA）

1.分子量最小的RNA,约占总RNA的15%。主要功能是在蛋白质生物合成过程中，起着转运氨基酸的作用。

2.1965年Holley等测定了酵母丙氨酸tRNA的一级结构，并提出二级结构模型。一级结构特点：核昔酸残基数在73~95；含有较多

的稀有碱基（如mG、DHU等）；5'-末端多为pG,3'-末端都是-CCA。

3.tRNA的二级结构为“三叶草”形，包括4个螺旋区、3个环及一个附加叉。各部分的结构都和它的功能有关。5'端广7位与近3，

端67~72位形成的双螺旋区称氨基酸臂，似“叶柄”，3，端有共同的-CCA-0H结构，用于连接该RNA转运的氨基酸。3个环是二氢尿喀喔

环（D环）、反密码子环、TWC环。

4.1973~1975年S.H.Kim的X射线衍射分析表明，tRNA的三级结构呈倒L字母形，反密码环和氨基酸臂分别位于倒L的两端。

二、信使RNA(messengerRNA,mRNA)

1.细胞内含量较少的一类RNA,约占总RNA的3机其功能是将核内DNA的碱基顺序(遗传信息)按碱基互补原则转录至核糖体，指

导蛋白质的合成。

2.种类多，作为不同蛋白质合成的模板，其一级结构差异很大。真核细胞的mRNA有不同于原核细胞的特点：3:末端有多聚A(polyA)

尾，5末端加有一个“帽”式结构，(m7Gppp).

3.代谢活跃，寿命较短。

三、核糖体RNA(ribosomaIRNA,rRNA)

1.约占细胞总RNA的80$。主要功能是与多种蛋白质组成核糖体，是蛋白质合成的场所。

2.核糖体在结构上可分离为大小两个亚基。原核细胞的rRNA有3种，23S与5SrRNA在大亚基，16s在小亚基。真核细胞有4种rRNA,

其中大亚基含28S、5.8S,5S,小亚基只有18S。

3.各种rRNA的一级结构中的核昔酸残基数及其顺序都不相同，且有特定的二级结构。

第四节核酸的性质

一、一般理化性质

1.DNA为白色纤维状固体，RNA为白色粉末；都微溶于水，不溶于一般有机溶剂。常用乙醇从溶液中沉淀核酸.

2.具有大分子的一般特性。分子大小可用Da、b或bp、S、链长(um)表示。一个bp相当的核甘酸平均分子量为660Da；1um长的

DNA双螺旋相当3000bp或2X106Da。

3.两性电解质。各种核酸的大小及所带的电荷不同，可用电泳和离子交换法分离。RNA在室温下易被稀碱水解，DNA较稳定，此特性

用来测定RNA的碱基组成和纯化DNA。

4.紫外吸收，最大吸收峰在260nm处，核酸的变性或降解，吸光度A升高，称为增色效应。

二、核酸的变性和复性

1.变性的概念

在理化因素作用下，核酸的双螺旋区氢键断裂，空间结构破坏，形成单链无规线团状态的过程。变性的因素有热、酸、碱、乙醇、尿

素等。变性的本质是次级键的变化。变性的结果是紫外吸收值明显增加(增色效应)，DNA粘度下降，生物学功能部分或全部丧失。

2.DNA的热变性和Tm

DNA热变性过程中，紫外吸收值增高，有一个特征性曲线称熔解曲线，通常将熔解曲线的中点，即紫外吸收值达到最大值50%时的温

度称为解链温度，又叫熔点(Tm)«DNA的热变性是爆发式的，像结晶的溶解一样，只在很狭窄的温度范围内完成，一般在70~800c之间。

变性温度与碱基组成、DNA长度及变性条件有关。GC含量越高，Tm越大；DNA越长，Tm越大；溶液离子强度增高，Tm增加。

3.DNA的复性与分子杂交

变性DNA在适当条件下，两条互补链可重新配对，恢复天然双螺旋构象，这一现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，

这一过程称为退火(annealing)。

影响复性速度的因素很多，如单链DNA的起始浓度、温度(最适复性温度是比Tm约低250C)、盐浓度、片断长度、序列复杂性等。

分子杂交是以核酸的变性和复性为基础，只要不同来源的核酸分子的核昔酸序列含有可以形成碱基互补配对的片段，就可以形成

DNA/DNA,RNA/RNA或DNA/RNA杂化双链，这个现象称为核酸分子杂交(hybridization)。

标记一个来源的核酸(放射性同位素或荧光标记)，通过杂交可以检测与其有互补关系的DNA或RNA,这种标记的核酸称为基因探针

(geneprobe),也就是一段带有检测标记，且顺序已知，与目的基因互补的核酸序列。基因探针的“集成化”就是基因芯片(genechip)。

是把已经测序的基因固定在硅片或玻璃片上制成的。在医疗诊断和科学研究中已被快速地运用。

三、核酸的序列测定

DNA序列是指携带遗传信息的DNA分子中的A、C、G、T的序列。分析方法主要有两种，一种是Maxatn-GiIbert化学法，另一种是Sanger

的双脱氧法。现在一般都采用后者，其基本原理是：

1.用凝胶电泳分离待测的DNA片段(用作模板)。

2.将模板、引物、4种dNTP、合适的聚合酶置于4个试管，每一试管按精确比例各加入一种ddNTP,用同位素或荧光物质标记。

3.利用ddNTP可特异地终止DNA链延长的特点，4个试管的聚合反应可以得到一系列大小不等、被标记的片段。

4.将4个反应管同时加到聚丙烯凝胶上电泳，标记片段按大小分离，放射自显影后可按谱型读出DNA序列。

在以上两种方法的基础上，通过与计算机技术和荧光技术的结合，发明了自动测序仪。目前，常用的测序策略是“鸟枪法”，形象地

说是将较长的基因片段打断，构建一系列的随机亚克隆，然后测定每个亚克隆的序列，用计算机分析以发现重叠区域，最终对大片段的DNA

定序。

Z第tA1二早酶-»FA-

教学目标：

1.掌握酶的概念和作用特点，了解酶的分类与命名。

2.熟悉酶的分子组成、结构与功能（单纯酶和结合酶，酶的辅因子、维生素的类别与功能，酶的活性部位，酶原激活，同工酶、变

构酶和抗体酶）。

3.熟悉酶的作用机制。

4.熟悉影响酶促反应的因素（酶浓度、底物浓度、温度、pH、激活剂与抑制剂；掌握酶促反应速度的表示、米氏方程和米氏常数的

意义）。

5.了解酶的制备与应用。

第一节概论

导入：酶学知识来源于生产与生活实践。我们祖先很早就会制酱和酿酒。西方国家于1810年发现酵母可将糖转化为酒精；1833年，

Payen及Persoz从麦芽的水抽提物中用酒精沉淀得到一种热不稳定物，可使淀粉水解成可溶性糖；1878年德国科学家屈内（Kuhne）首先

把这类物质称为酶（enzyme,其意“在酵母中”）。I860年法国科学家巴斯德（Pasteur）认为发酵是酵母细胞生命活动的结果，细胞破

裂则失去发酵作用。1897年，Buchner兄弟首次用不含细胞的酵母提取液实现了发酵，证明发酵是酶作用的化学本质，获得1911年诺贝

尔化学奖。1926年，美国生化学家Sumner第一次从刀豆得到服酶结晶，并证明是蛋白质。1930年，Northrop得到胃蛋白酶的结晶（1946

年二人共获诺贝尔化学奖）。1963年测定第一个牛胰RNaseA序列（124aa）；1965年揭示卵清溶菌酶的三维结构（129aa）.

—,酶的概念

酶是由活细胞合成的，对其特异底物起高效催化作用的生物催化剂（biocatalyst）,已发现的有两类:主要的一类是蛋白质酶（enzyme）,

生物体内已发现4000多种，数百种酶得到结晶。美国科学家Cech于1981年在研究原生动物四膜虫的RNA前体加工成熟时发现核酶

“ribozyme”，为数不多，主要做用于核酸（1989年的诺贝尔化学奖）。

二、酶的作用特点

酶所催化的反应称为酶促反应。在酶促反应中被催化的物质称为底物，反应的生成物称为产物。酶所具有的催化能力称为酶活性。

酶作为生物催化剂，具有一般催化剂的共性，如在反应前后酶的质和量不变；只催化热力学允许的化学反应，即自由能由高向低转变

的化学反应；不改变反应的平衡点。但是，酶是生物大分子，又具有与一般催化剂不同的特点。

1.极高的催化效率

酶的催化效率通常比非催化反应高108〜1020倍，比一般催化剂高107〜1013倍。例如，服酶催化尿素的水解速度是H+催化作用的7

X1012倍；碳酸醉酶每一酶分子每秒催化6X105C02与水结合成H2c03,比非酶促反应快107倍。

2.高度的特异性

酶对催化的底物有高度的选择性，即一种酶只作用一种或一类化合物，催化一定的化学反应，并生成一定的产物，这种特性称为酶的

特异性或专一性。有结构专一性和立体异构专一性两种类型。

结构专一性又分绝对专一性和相对专一性。前者只催化一种底物，进行一种化学反应。如服酶仅催化尿素水解。后者可作用一类化合

物或一种化学键。如酯酶可水解各种有机酸和醇形成的酯。在动物消化道中几种蛋白酶专一性不同，胰蛋白酶只水解Arg或Lys竣基形成

的肽键；胰凝乳蛋白酶水解芳香氨基酸及其它疏水氨基酸竣基形成的肽键。

立体异构专一性指酶对底物立体构型的要求。例如乳酸脱氢酶催化L-乳酸脱氢为丙酮酸，对D-乳酸无作用；L-氨基酸氧化酶只作用

L-氨基酸，对D-氨基酸无作用。

3.酶活性的可调节性

酶促反应受多种因素的调控，通过改变酶的合成和降解速度可调节酶的含量；酶在胞液和亚细胞的隔离分布构成酶的区域化调节；代

谢物浓度或产物浓度的变化可以抑制或激活酶的活性；激素和神经系统的信息，可通过对关键酶的变构调节和共价修饰来影响整个酶促反

应速度。所以酶是催化剂又是代谢调节元件，酶水平的调节是代谢调控的基本方式。

4.酶的不稳定性

酶主要是蛋白质，凡能使蛋白质变性的理化因素均可影响酶活性，甚至使酶完全失活。酶催化作用一般需要比较温和的条件（37℃、

1atm、pH7）。

三、酶的分类与命名

（-）酶的分类

根据国际酶学委员会（InternationalEnzymeCommission,IEC）的规定，按照酶促反应的性质，分为六大类：

1.氧化还原酶（oxidoreductases）催化底物进行氧化还原反应。如乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶、过

氧化物酶等。

2.转移酶(transferases)催化底物之间某些基团的转移或交换。如甲基转移酶、氨基转移酶、磷酸化酶等。

3.水解酶(hydrolases)催化底物发生水解反应。如淀粉酶、蛋白酶、核酸酶、脂肪酶等。

4.裂解酶(lyases)催化底物裂解或移去基团(形成双键的反应或其逆反应)。如碳酸配酶、醛缩酶、柠檬酸合成酶等。

5.异构酶(isomerases)催化各种同分异构体之间相互转化。如磷酸丙糖异构酶、消旋酶等。

6.合成酶(ligases)催化两分子底物合成一分子化合物，同时偶联有ATP的分解释能。如谷氨酰胺合成酶、氨基酸-RNA连接酶等。

(-)酶的命名

1961年，国际酶学委员会(IEC)主要根据酶催化反应的类型，把酶分为6大类，制定了系统命名法。规定每一酶只有一个系统名称，它

标明酶的所有底物与催化反应性质，底物名称之间以“：”分隔，同时还有一个由4个数字组成的系统编号。如谷丙转氨酶的系统名称是

丙氨酸：a-酮戊二酸氨基转移酶(酶表中的统一编号是EC2.6.1.2)。乳酸脱氢酶的编号是EC1.1.1.27。

第二节酶的分子组成、结构和功能

一、酶的分子组成

(-)单纯酶和结合酶

单纯酶是仅由肽链构成的酶。如麻酶、一些消化蛋白酶,淀粉酶、脂酶、核糖核酸酶等。

结合酶由蛋白质部分和非蛋白质部分组成，前者称为酶蛋白(apoenzyme),决定酶的特异性和高效率；后者称为辅助因子(cofactor),

决定反应的种类和性质。两者结合形成的复合物称为全酶(holoenzyme),这两部分对于催化活性都是必需的。

酶蛋白有单条肽链和多个亚基组成的。前者称为单体酶，为数不多，均为水解酶，如胰蛋白酶、核糖核酸酶、溶菌酶等；多个相同或

不同亚基以非共价键连接的酶称为寡聚酶，如磷酸化酶a,3-磷酸甘油醛脱氢酶等。

细胞内存在着许多由几种不同功能的酶彼此嵌合形成的多酶复合体，即多酶体系，它利于一系列反应的连续进行，如丙酮酸脱氢酶体

系、脂肪酸合成酶复合体。在多酶体系中，能影响整条代谢途径方向和速度的酶称为关键酶，关键酶通常催化单向不平衡反应，或者是该

多酶体系中催化活性最低的限速酶。

(-)酶的辅因子

酶的辅助因子指金属离子或小分子有机化合物(又称辅酶与辅基)。

1.金属离子

约2/3的酶含有金属离子，常见的是K+、Na+、Mg2+、Cu2+(Cu+)、Zn2+、Fe2+(Fe3+)等。金属离子的作用是多方面的：参与酶

的活性中心；在酶蛋白与底物之间起桥梁作用；维持酶分子发挥催化作用所必需的构象；中和阴离子，降低反应中的静电斥力。

2.辅酶与辅基

辅酶与辅基是一些化学稳定的小分子有机物，是维生素样的物质，参与酶的催化过程，在反应中传递电子、质子或一些基团。

辅酶与酶蛋白的结合疏松，可以用透析或超滤方法除去；辅基则与酶蛋白结合紧密，不能用上述方法除去。一种酶蛋白只能与一种辅

助因子结合成一种特异的酶，但一种辅助因子可以与不同的酶蛋白结合构成多种特异性酶，以催化各种化学反应。

维生素(Vitamin)是维持机体正常生命活动所必需的一类小分子有机物，基本不能在体内合成，即使有几种能自行合成，也因合成

量不足而必须从食物中摄取。维生素的需要量及缺乏症是营养学的课题。

维生素原意是“生命中必不可少的胺”，波兰学者凡克把从米糠中提取出治疗脚气病有效的成分命名为维生素，现已发现13种，按

溶解性分为水溶性和脂溶性两大类。脂溶性维生素以独立发挥作用为主，A、D、E、K具有一些特殊的生理功能。

以下8种水溶性的维生素都以辅酶的形式参与结合酶的组成。也有些本身就是辅酶，如硫辛酸、抗坏血酸。

含维生素的辅酶及其主要功能

维生素

辅酶形式

反应类型

硫胺素(B1)

焦磷酸硫胺素(TPP)

a-酮酸氧化脱竣反应

核黄素(B2)

黄素单核昔酸(FMN)

黄素腺R票口令二核昔酸(FAD)

氧化还原反应

烟酸或烟酰胺(PP)

烟酰胺腺喋岭二核昔酸(NAD+)

烟酰胺腺噂哈二核昔酸磷酸(NADP+)

氧化还原反应

泛酸

辅酶A(CoA-SH)

酰基转移反应

哦哆醇、哦哆醛、哦哆胺(B6)

磷酸唯哆醛、磷酸唯哆胺

转氨基作用、脱竣作用

生物素

生物胞素

C02的固定

叶酸

四氢叶酸

一碳单位转移

钻胺素(B12)

5'-脱氧腺昔钻胺素

甲钻胺素

1,2--氢原子转移

甲基转移

二、酶的活性部位

酶的活性部位(activesite)是它结合底物和将底物转化为产物的区域，又称活性中心。它是由在线性多肽链中可能相隔很远的氨

基酸残基形成的三维小区(为裂缝或为凹陷)。酶活性部位的基团属必需基团，有二种：一是结合基团，其作用是与底物结合，生成酶-

底物复合物；二是催化基团，其作用是影响底物分子中某些化学键的稳定性，催化底物发生化学反应并促进底物转变成产物，也有的必需

基团同时有这两种功能。还有一些化学基团位于酶的活性中心以外的部位，为维持酶活性中心的构象所必需，称为酶活性中心以外的必需

基团。

构成酶活性中心的常见基团有组氨酸的咪嘤基、丝氨酸的羟基、半胱氨酸的筑基等。如丝氨酸蛋白酶家族的胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶

和弹性蛋白酶，都催化蛋白质的肽键使之水解，但底物的专一性由它们的底物-结合部位中氨基酸基团的性质所决定，与其作用的底物互

补。像胰蛋白酶，在它的底物-结合部位有带负电荷的Asp残基，可与底物侧链上带正电荷的Lys和Arg相互作用，切断其竣基侧；胰凝

乳蛋白酶在它的底物-结合部位有带小侧链的氨基酸残基，如Gly和Ser,使底物庞大的芳香的和疏水氨基酸残基得以进入，切断其粉基例J;

弹性蛋白酶有相对大的Vai和Thr不带电荷的氨基酸但I］链，凸出在它的底物-结合部位，阻止了除Ala和Gly小倒J链以外的所有其他氨基

酸。

三、酶原激活

没有活性的酶的前体称为“酶原”，酶原转变成酶的过程称为酶原激活。其实质是酶活性部位形成或暴露的过程。一些与消化作用有

关的酶，如胃蛋白酶、胰蛋白酶在最初合成和分泌时，没有催化活性。胃蛋白酶原在H+作用下，自N端切下几个多肽碎片，形成酶催化所

需的空间结构，转化为胃蛋白酶。胰蛋白酶原随胰液进入小肠时被肠激酶激活，自N端切除一个6肽，促使酶的构象变化，形成活性中心，

转变成有活性的胰蛋白酶。

酶原的生物合成和酶原激活一般不在同一组织、细胞或细胞器中进行。酶原的激活具有重要的生理意义，不仅保护细胞本身不受酶的

水解破坏，而且保证酶在特定的部位与环境中发挥催化作用。

四、同工酶、变构酶、抗体酶

(一)同工酶(isozymes)

具有不同的分子形式但却催化相同的化学反应的一组酶称为同工酶。1959年发现的第一个同工酶是乳酸脱氢酶(LDH),它在NADH

存在下，催化丙酮酸的可逆转化生成乳酸。它是一个寡聚酶，由两种不同类型的亚基组成5种分子形式：H4、H3M、H2M2、HM3、M4,它们

的分子结构、理化性质和电泳行为不同，但催化同一反应，因为它们的活性部位在结构上相同或非常相似。M亚基主要存在骨骼肌和肝脏,

而H亚基主要在心肌。