洁净环境生产区域表面消毒技术

洁净环境生产区域表面消毒技术第1页，课件共127页，创作于2023年2月新版GMP对于无菌的要求

2010版GMP重点修订了无菌药品附录，增加了无菌操作的具体要求，强化了无菌保证的措施无菌药品附录的篇幅从1998年版的约1500字增加到1万多字,由此可见政府监管部门对无菌药品的重视程度正在逐渐增加。-无菌检测,无菌转移,无菌称量,取样,空间消毒.第2页，课件共127页，创作于2023年2月洁净环境生产区域表面消毒技术洁净区的清洗消毒的方式和效果的验证消毒剂的合理应用和验证洁净区的清洁3第3页，课件共127页，创作于2023年2月洁净环境生产区域表面消毒技术—清洗环节清洗的机理清洗的设计和开发清洗的参数和因素如何选择合适的清洗剂案例分析4第4页，课件共127页，创作于2023年2月清洗剂的清洗机理清洗机理溶解增溶润湿乳化分散水解氧化第5页，课件共127页，创作于2023年2月

润湿无表面活性剂表面活性剂A表面活性剂B第6页，课件共127页，创作于2023年2月乳化-表面活性剂的作用

疏水基/亲油基亲水基

OCH3-CH2-CH2-CH2-CH2-(CH2)n-CH2-C-O-Na+第7页，课件共127页，创作于2023年2月水解

O OR1-C-O-R2+KOHR1-C-O-K++R2OH大分子非极性难溶于水小分子极性易溶于水第8页，课件共127页，创作于2023年2月9传统方法与新趋势对比传统上关注大规模确认运行数据安装确认/操作确认/性能确认性能确认至少3次验证运行新趋势美国FDA工艺验证指南，2011年1月验证是确保工艺有效性的所有事宜（贯穿生命循环）第9页，课件共127页，创作于2023年2月10清洗验证设计KNOWLEDGE知识DESIGNSPACE设计空间NORMALOPERATION标准操作Reference:ICHQ8第10页，课件共127页，创作于2023年2月Changes改变Changes改变重点在设计&生命循环Stage1ProcessDesign第1步工艺设计Stage2ProcessQualification第2步工艺确认DesignofFacilities&QualificationofEquipmentandUtilities设施设计&设备和设施确认ProcessPerformanceQualification工艺性能确认(PPQ)Confirmation确认Stage3ContinuedProcessVerification第3步连续过程确认Distribute分布Distribute分布第11页，课件共127页，创作于2023年2月12清洗过程设计设计过程中要考虑的因素清洗剂和清洗机制清洗参数清洗方法可去除的污物需要清洗的设备残留限值第12页，课件共127页，创作于2023年2月选择适当的清洗剂——要考虑的因素有效性，广谱清洁性能基质兼容性已知的组成成分一致性，批号的可追溯性稳定性低毒，安全性第13页，课件共127页，创作于2023年2月14选择适当的清洗剂——需要考虑的因素分析方法的可获得性喷淋应用的低泡技术容易冲洗合乎环境要求的保证供货能力总成本低廉第14页，课件共127页，创作于2023年2月15配方型清洗化学品清洗剂功能

水 溶解作用有机溶剂

溶解作用表面活性剂 润湿，增溶，乳化，分散碱碱源，水解酸 酸源，水解螯合物接合钙铁离子助洗剂 加强去污能力分散剂 悬浮固体颗粒氧化剂氧化，杀灭微生物抗菌剂杀灭，减少微生物第15页，课件共127页，创作于2023年2月16

清洗参数及因素

时间作用力浓度温度污物类别污物水平污物情况表面处理混合漂洗和干燥环境因素第16页，课件共127页，创作于2023年2月选择并优化参数Time时间Concentration浓度DesignSpace17第17页，课件共127页，创作于2023年2月选择并优化参数及方法第18页，课件共127页，创作于2023年2月19

参数变换的影响

某产品温度变化的影响第19页，课件共127页，创作于2023年2月污物类型的影响---含/不含污物的泡沫稳定性

第20页，课件共127页，创作于2023年2月21案例分析

——鸡蛋，灭菌柜内，121度情况下，1个小时喷洗应用第1步：1%清洗剂，80度清洗15分钟，80度去离子水冲洗30秒第2步：6%清洗剂，80度下清洗40分钟，洁净BeforeStep1,80CStep2,80CStep2,60C第21页，课件共127页，创作于2023年2月22

设备的设计因素设备设计的考虑因素第22页，课件共127页，创作于2023年2月清洗-案例分析A.清洗剂清洗（适用于有在位清洗装置的设备）设定清洗循环，预洗-清洗-冲洗-干燥。B.手工清洗（适用于小的零部件和小器具）将清洗剂按照体积比配制成相应浓度的溶液，现将清洗剂和水按照相应的体积分别量好，然后将清洗剂缓慢的倒入量好体积的水中，并轻轻搅拌直到均匀。配置好的溶液可以进行零部件和小器具的清洗，可以采用尼龙刷或洁净抹布进行清洗擦拭。如果油污或残留较重，可以采用提高相应的清洗剂浓度来达到清洗效果。第23页，课件共127页，创作于2023年2月清洗—案例分析C.搅拌浸泡（适用于大型的罐体设备）将罐体用水冲洗掉大部分可见残留，然后向罐体内加入水，然后将相应的清洗剂溶液倒入水中，使得最终的浓度,然后开启搅拌，让其工作1小时，（如果可以连接管路，可以使用循环泵进行密闭循环）使得残留溶解在清洗剂中，如果还有部分残留，需要再人工进行刷洗。如果残留较为严重，可以提高浓度。第24页，课件共127页，创作于2023年2月清洗—案例分析D.清洗玻璃器皿将清洗剂按照体积比配制成相应浓度的溶液，现将清洗剂和水按照相应的体积分别量好，然后将清洗剂缓慢的倒入量好体积的水中，并轻轻搅拌直到均匀。可以将玻璃器皿浸泡在溶液中，浸泡1小时后，可以进行手工清洗，并最终冲洗达到清洗干净。第25页，课件共127页，创作于2023年2月清洗—案例分析E.如果使用专业洗瓶机，具体操作步骤如下：预洗，冷/热水，循环1分钟，不需要加热清洗1，冷/热水，循环5分钟，加热到65℃，抽取碱性洗液20秒（大约4ml）清洗2，冷/热水，循环5分钟，加热到65℃，抽取酸性20秒（大约4ml）冲洗1，热水（自来水）冲洗2，纯化水干燥，110℃,15分钟第26页，课件共127页，创作于2023年2月清洗—案例分析F:适用于每次清洁后设备和管道保养用，防止生锈将罐体用水冲洗掉大部分可见残留，然后向罐体内加入水，然后将相应的CIP200溶液倒入水中，使得最终的浓度在1%,然后连接管路，可以使用循环泵进行密闭循环，达到最后保养的过程，清洗结束后，用水冲洗，直到清洗剂残留达到可接受的标准。第27页，课件共127页，创作于2023年2月清洗—案例分析G:.除锈1.完全预洗

－酸性清洗剂（5％）

－60－80oC3-4小时2.漂洗－采用擦拭取样法保证表面洁净

－通过TOC或其他分析方法保证去除有机残留物3.10-15％酸性清洗剂，80oC3－5小时

第28页，课件共127页，创作于2023年2月除锈的一般程序首先推荐采用实验分析确认锈的类型通过碱性清洗液进行适当预洗加入10-15％酸性清洗剂加热到80oC初步测定清洗液中的铁含量当达到一个高峰浓度后重新测定浓度加入酸性清洗剂使其浓度达到15％过一段时间后再测铁含量如铁含量不再明显增加时再继续循环搅拌3小时80oC排水，完全漂洗，干燥48小时第29页，课件共127页，创作于2023年2月设备除锈第30页，课件共127页，创作于2023年2月清洗—案例分析制药新设备的清洗预洗（热水45-60℃）5%碱性清洗剂+5%表面活性剂的添加剂60℃循环3-4小时去离子水漂洗（热水45-60℃）15%酸性溶液60-80℃循环3小时三次漂洗干燥第31页，课件共127页，创作于2023年2月32

可能的目标残留

活性药物清洗剂生物负载内毒素降解产品或者副产品第32页，课件共127页，创作于2023年2月33

可接受水平？基于目标残留对后来产品的潜在作用可能的作用&事件残留的药物学作用残留的毒性作用下一个产品的剂量稳定性问题可能运用一个安全性因素第33页，课件共127页，创作于2023年2月消毒和灭菌的不同方式和验证方法消毒灭菌过程的监控和验证空间消毒的不同方式目前普遍存在的灭菌方式灭菌方式不同的菌种的选择不同灭菌方式的载体的选择34第34页，课件共127页，创作于2023年2月消毒灭菌过程的监控和验证每批灭菌过程均应该进行监控监控包括日常监控和定期的生物验证。日常监控一般是每批进行，方式用化学指示剂的方式。生物验证一般根据灭菌的不同方式选择不同的生物指示剂进行验证。第35页，课件共127页，创作于2023年2月空间消毒的主要方法

目前洁净室消毒方法表面擦拭用喷壶手动喷洒甲醛熏蒸臭氧消毒湿雾消毒VHP消毒干雾喷雾消毒第36页，课件共127页，创作于2023年2月目前普遍存在的灭菌方式湿热灭菌干热灭菌EO灭菌除菌过滤γ射线灭菌UV紫外线第37页，课件共127页，创作于2023年2月如何保证灭菌效果？验证用什么验证？第38页，课件共127页，创作于2023年2月不同灭菌方式不同的菌种种类的选择湿热灭菌-----------嗜热脂肪芽孢杆菌干热灭菌-----------枯草芽孢杆菌EO灭菌-------------枯草芽孢杆菌除菌过滤-----------缺陷假单胞菌γ射线灭菌---------短小芽孢杆菌第39页，课件共127页，创作于2023年2月根据灭菌方式载体类型的选择生物指示剂－孢子片生物指示剂-孢子悬浮液生物指示剂-自含培养基型（SCBI）生物指示剂-安瓿瓶生物指示剂-钢片化学指示剂-指示条第40页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂的合理应用和验证洁净室常见微生物常见的消毒剂种类消毒剂的选择国内外消毒剂的验证案例研究第41页，课件共127页，创作于2023年2月洁净室中的常见细菌土芽孢杆菌肠球菌大肠杆菌奈瑟氏菌微球菌梭菌痤疮丙酸杆菌葡萄球菌链球菌假单孢菌杆菌多粘芽孢杆棒状杆菌肉杆菌第42页，课件共127页，创作于2023年2月洁净室和冷藏室常见霉菌曲霉菌属青霉菌属葡萄穗霉芽枝霉属白色念珠菌毛霉菌帚霉菌第43页，课件共127页，创作于2023年2月细菌细胞结构

原核细胞机构细胞质类核包膜细胞壁细胞膜核糖体纤毛图1鞭毛第44页，课件共127页，创作于2023年2月真核（真菌）细胞结构线粒体微丝溶酶体过氧物酶体中心粒微管滑面内质网高尔基体纤毛核糖体滑面内质网染色质粗面内质网核膜细胞核质膜核膜孔细胞核粗面内质网第45页，课件共127页，创作于2023年2月细菌内生孢子芽孢外被外生孢子皮层核壁第46页，课件共127页，创作于2023年2月黑曲霉泡状体分生孢子叶座（分生孢子梗）第47页，课件共127页，创作于2023年2月病毒结构噬菌体结构头内部蛋白质颈尾鞘尾丝终板针第48页，课件共127页，创作于2023年2月溶血性葡萄球菌第49页，课件共127页，创作于2023年2月溶血性葡萄球菌第50页，课件共127页，创作于2023年2月铜绿假单胞菌第51页，课件共127页，创作于2023年2月螺旋菌

第52页，课件共127页，创作于2023年2月生物膜

第53页，课件共127页，创作于2023年2月TSA上的霉菌培养物

第54页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂的化学类型酚类季铵盐类次氯酸钠二氧化氯过氧化氢戊二醛/甲醛醇类过乙酸 碘双胍类类产品过乙酸/过氧化氢混合物第55页，课件共127页，创作于2023年2月酚类对TB有效、广谱阴离子/中性表面活性剂可具有良好的清洁能力具有碱性或酸性配方局限：不能杀孢子有残留使用不匹配化学品后活性受影响第56页，课件共127页，创作于2023年2月季铵盐类广谱活性碱性（以及酸性）产品EP注册氧离子表面活性剂可具有非常好的清洁效果局限：不能杀孢子并不总是对TB有效使用不匹配化学品后活性受影响

第57页，课件共127页，创作于2023年2月高效杀菌功效800ppm－1000ppm时可杀孢子对软金属和不锈钢有腐蚀性局限：要求预先清洁对温度和光敏感只能用作杀菌剂，而不能用作灭菌剂与氯气共用存在安全隐患对眼睛和皮肤有腐蚀性在有机物存在时可生成THM漂白剂第58页，课件共127页，创作于2023年2月次氯酸钠OCI¯+H2O⇌HOCI+OH¯次氯酸离子

次氯酸pH%次氯酸

4.0100

5.099.6

6.095.8

7.069.7

8.018.7

9.02.210.00.2第59页，课件共127页，创作于2023年2月

过氧化氢/过乙酸混合物快速、广谱活性，可杀孢子同效果相当的氧化剂相比腐蚀性小

对人员较安全

可自灭菌

局限:对软金属有腐蚀性

需要预先清洁

对温度敏感

刺激性气味（醋）

第60页，课件共127页，创作于2023年2月二氧化氯的特性高级杀菌功效局限：对金属有腐蚀性要求预先清洁对温度敏感只能用作杀菌剂，而不能用作灭菌剂与二氧化氯和氯气共用有安全问题稀释之后用途受限有刺激性气味第61页，课件共127页，创作于2023年2月过氧化氢特性:广谱活性（浓度6％时活性范围包括孢子）稳定分解成氧气和水溶液或蒸汽有效局限：杀孢子时需要高浓度受热和有机物存在时会被灭活杀灭速度慢第62页，课件共127页，创作于2023年2月过乙酸特性：广谱活性（包括孢子）在有机物存在时有效分解产物无危害溶液或蒸汽有效局限：较高温度下不稳定有刺激性对软金属有腐蚀性第63页，课件共127页，创作于2023年2月乙醛特性：广谱活性（包括孢子）无腐蚀性可以喷雾、熏蒸等方式使用局限：需要激活有机物存在时不稳定而会被灭活要求较长的接触时间安全性可能必须要中和残留第64页，课件共127页，创作于2023年2月卤素特性：广谱消毒剂稳定且刺激性较小无腐蚀性局限：不能杀死孢子（除非对更高浓度进行了验证）安全性可能留下污渍主要用作防腐剂第65页，课件共127页，创作于2023年2月醇类特性和局限

无残留容易挥发不能杀孢子局限：清洁效果差可燃接触时间有限排放VOCIPA(TLV200ppm)第66页，课件共127页，创作于2023年2月一般杀菌机制通过蛋白质变性/脂溶剂/电荷相互作用破坏质膜抑制细胞壁的合成：干扰肽聚糖的合成抑制蛋白质的合成：干扰原核生物的核糖体细胞壁质粒核糖体质膜第67页，课件共127页，创作于2023年2月生物杀灭剂的一般进入模式生物杀灭剂吸附在细胞表面同外部细胞层相互作用摄入细胞中同靶位点相互作用生物杀灭剂微生物表面细胞内部靶细胞抑制/灭活第68页，课件共127页，创作于2023年2月验证——微生物选择

Bacilluscereus/sphaericusBacillussubtilis/G.stearothermophilusClostridiumspp蜡状芽孢杆菌/球形芽孢杆菌枯草芽孢杆菌/嗜热脂肪芽孢杆菌梭状芽孢杆菌第69页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂的选择-USP〔1072〕应用于药厂的消毒剂如何选择需要控制的微生物的种类和数量消毒剂的抗菌谱供应商的信誉和声望是否声明为灭菌剂是否在EPA注册消毒剂的使用浓度、方法、接触时间被消毒表面材质与消毒剂的兼容性第70页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂的选择-USP〔1072〕有机物的干扰消毒的后效作用长期使用的腐蚀性使用时的安全注意事项消毒剂和清洁剂、其他消毒剂的兼容性消毒剂轮换方案防止消毒剂对药品的污染第71页，课件共127页，创作于2023年2月USP中消毒剂相关内容分析〔1072〕杀菌剂

应用于表面可以杀灭细菌、真菌、病毒，但是并不一定能够杀灭它们的孢子。消毒剂常被分为高效、中效、低效消毒剂。灭菌剂

可以杀灭所有形式的生命体，包括细菌、真菌、病毒及它们的孢子。第72页，课件共127页，创作于2023年2月USP中消毒剂相关内容分析〔1072〕消毒剂效果挑战性测试方法（AOAC）：酚系数法稀释法硬表面载体法孢子载体测试第73页，课件共127页，创作于2023年2月USP中消毒剂相关内容分析〔1072〕美国环保总署AOAC——美国官方分析化学师协会FDA——美国食品、药品监督管理局第74页，课件共127页，创作于2023年2月USP中消毒剂相关内容分析〔1072〕在1993年6月4日，美国环保署(EPA)和食品及药物管理局(FDA)签订了一份谅解备忘录，在管制液体化学杀菌剂的联合管理权限问题上达成了共识。该协议认可了FDA对液体化学杀菌剂的管理权限，备忘录还明确了美国食品及药物管制局和环保署在消毒剂管理问题方面的相互关系。美国环保署将继续依照联邦杀虫剂、杀真菌剂和灭鼠剂法案(FIFRA)负责对杀菌剂进行注册登记。第75页，课件共127页，创作于2023年2月USP中消毒剂相关内容分析〔1072〕常用中和剂选择醇类——稀释或吐温80戊二醛——甘氨酸和亚硫酸钠次氯酸钠——硫代硫酸钠双氯苯双胍己烷——吐温80和卵磷脂氯化汞和其他汞剂——巯基乙酸季胺盐化合物——吐温80和卵磷脂酚化合物——稀释或吐温80和卵磷脂第76页，课件共127页，创作于2023年2月USP中消毒剂相关内容分析〔1072〕AOAC挑战实验用微生物细菌：大肠杆菌ATCC11229

金黄色葡糖球菌ATCC6538

铜绿假单胞菌ATCC15442真菌：白色念珠菌ATCC10231或2091

产黄青霉ATCC11709

黑曲霉ATCC16404孢子：枯草芽孢杆菌ATCC19659第77页，课件共127页，创作于2023年2月美国消毒剂验证AOAC——美国官方分析化学师协会稀释法细菌：载体验证实验孢子：载体验证实验真菌：悬液验证实验第78页，课件共127页，创作于2023年2月国外消毒剂的验证杀细菌效果验证不锈钢载体：接种10的6次方细菌消毒液：按照规定稀释中和剂验证：选择适合的中和剂和剂量简单过程：载体＋10ml消毒液——作用规定时间——中和培养基——培养——记录结果判断：60个样品应无生长（每个批号，做3个批次）第79页，课件共127页，创作于2023年2月国外消毒剂的验证载体：Polishedstainlesssteelcylinders(penicillincups),8±1mmod,6±1mmid,length10±1mm,oftype304stainlesssteel,SS18-8菌液：原始斜面菌种3次液体培养(24h)再培养(24h)含20ml培养基的试管中(8-10个)48-54h混合分装20ml/管消毒剂:轻轻摇匀瓶口清洁打开,倒入烧杯取适量稀释(大于1ml)接种:载体菌液试管15min双层滤纸的平皿干燥(当天使用)第80页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂消毒效果验证杀孢子效果验证(AOAC966.04)载体:陶瓷载体,丝绸缝合线(环状)silksutureloops杀孢子剂：按照规定浓度使用中和剂验证：选择适合的中和剂和剂量简单过程：载体＋10ml杀孢子剂——作用规定时间——中和培养基——培养——记录结果判断：720个样品应无生长（2种载体,2种孢子,3个批次产品）ATCC3584ATCC15659第81页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂消毒效果验证孢子悬液:孢子悬液(孢子所占比例应大于95%)接种:载体孢子悬液试管(10ml)10-15min双层滤纸的平皿真空干燥(1年内使用)第82页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂消毒效果验证杀真菌效果验证(AOAC955.17)菌悬液效果测试0.5ml菌液＋10ml消毒液作用规定时间中和培养基培养记录结果判断:规定的时间内应无生长(60个试管,3批)第83页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证国内消毒剂消毒效果验证参照标准:<消毒技术规范>中华人民共和国卫生部二○○六年十二月2.消毒与灭菌效果的评价方法与标准

GB15981-1995第84页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证<消毒技术规范>1.4.9.2消毒效果试验结果评价符合下列所有条件的消毒产品认为消毒效果试验结果合格：（1）去除残留消毒剂效果的鉴定试验合格。（2）消毒产品的实验室试验结果符合下列条件：

第85页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证

a.悬液定量试验时，每次试验对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值≥5.00，对龟分枝杆菌脓肿亚种、白色念珠菌和黑曲霉菌的杀灭对数值≥4.00，对脊髓灰质炎病毒-Ⅰ型疫苗株的灭活对数值≥4.00。对照组微生物数在规定的范围内。第86页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证

b.载体定量试验（含载体流动浸泡）时，每次试验对各类微生物的杀灭对数值或灭活对数值≥3.00，对照组微生物数在规定的范围内。载体定性试验时，各次试验所有载体相应细菌芽孢均无生长，对照组微生物数在规定的范围内。第87页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证（3）消毒模拟现场试验时，各次试验对试验微生物的杀灭对数值≥3.00，对照组微生物数在规定的范围内。灭菌模拟现场试验时，各次试验所有载体相应细菌芽孢均无生长，对照组微生物数在规定的范围内。根据消毒剂特定用途或试验特殊需要，增选其他菌、毒株所进行的试验也应该符合上述要求。第88页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证消毒与灭菌效果的评价方法与标准GB15981-1995第三篇液体消毒剂消毒效果评价方法与标准第89页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证标准中和效果中和产物菌正常PBS无菌中和剂第90页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证3、4、5组间误差率计算公式第91页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证A7判定标准A7.13、4、5组菌数相似，其误差率≤10％。A7.26组无菌生长。A7.32组菌数明显少于3、4、5组。A7.41组不长菌或明显少于2组。符合上述标准的中和剂表明可消除消毒剂对指示菌的作用，中和剂及其与消毒剂的中和产物对指示菌无毒害，判定为该消毒剂的中和剂。

第92页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证17消毒效果评价标准17.1对细菌和真菌的杀灭率≥99.9％，对HBsAg，将检测方法灵敏度10(上标始)4(上标终)倍或5×10(上标始)4(上标终)倍（载体试验）的HBsAg抗原性破坏，可判为消毒合格。17.2对枯草杆菌黑色变种芽胞全部杀灭，可判为灭菌合格。17.3在实际应用中消毒效果评价以有机物保护试验的最低浓度和最短时间为该消毒剂达到实用消毒所需的浓度和时间。第93页，课件共127页，创作于2023年2月国内消毒剂消毒效果验证实际应用:1.分离洁净室中的微生物2.验证消毒剂对自己厂房内特定菌的杀菌效果3.使用消毒剂后,定期对环境监测,看是否达标第94页，课件共127页，创作于2023年2月951.SFDAGMP(2010)对无菌药品生产的洁净要求洁净各级别空气悬浮粒子标准*：注：（1）表中各数值均为平均值。（2）单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。*引自《SFDAGMP(2010)附录1.无菌药品》。洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米静态动态(3)≥0.5μm≥5.0μm(2)≥0.5μm≥5.0μmA级(1)352020352020

B级3520293520002900C级3520002900352000029000D级352000029000不作规定不作规定第95页，课件共127页，创作于2023年2月961.SFDAGMP(2010)对无菌药品生产的洁净要求洁净各级别空气悬浮粒子标准：注：（1）为确认A级洁净区的级别，每个采样点的采样量不得少于1立方米。A级洁净区空气悬浮粒子的级别为ISO4.8，以≥5.0μm的悬浮粒子为限度标准。B级洁净区（静态）的空气悬浮粒子的级别为ISO5，同时包括表中两种粒径的悬浮粒子。对于C级洁净区（静态和动态）而言，空气悬浮粒子的级别分别为ISO7和ISO8。对于D级洁净区（静态）空气悬浮粒子的级别为ISO8。测试方法可参照ISO14644-1。（2）在确认级别时，应当使用采样管较短的便携式尘埃粒子计数器，避免≥5.0μm悬浮粒子在远程采样系统的长采样管中沉降。在单向流系统中，应当采用等动力学的取样头。（3）动态测试可在常规操作、培养基模拟灌装过程中进行，证明达到动态的洁净度级别，但培养基模拟灌装试验要求在“最差状况”下进行动态测试。第96页，课件共127页，创作于2023年2月971.SFDAGMP(2010)对无菌药品生产的洁净要求洁净区微生物监测的动态标准(1)如下：注：（1）表中各数值均为平均值。（2）单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。洁净度级别浮游菌cfu/m3沉降菌（90mm）cfu/4小时(2)表面微生物接触（55mm）cfu/碟5指手套cfu/手套A级1111B级10555C级1005025－D级20010050－第97页，课件共127页，创作于2023年2月环境监测2.表面微生物测定RODACPlatereplicateorganismdetectionandcounting

第98页，课件共127页，创作于2023年2月483检查结果“在…所完成的消毒和杀孢子剂再验证研究过程中，该公司所日常使用的两种杀孢子剂未能对测试中所使用的所有挑战微生物达到公司的…验收标准。直至…这些杀孢子剂仍然被列在该公司的非口服产品区已批准使用消毒和杀孢子剂清单上。该再验证研究完成日期及杀孢子剂未能达到验收标准的情况如下所述…。-再验证问题”2008年6月GMP趋势报告第99页，课件共127页，创作于2023年2月“无法保障当前所用的杀菌剂对真菌和霉菌有效。根据方案……鉴别测试方法验证……的杀菌剂有效性研究为……回收率。但是，性能确认过程中所获得的数据显示…….在阳性对照回收研究中并不总是能够达到……根据方案所确定的最低验收标准。-回收率问题”2009年1月GMP趋势报告483检查结果第100页，课件共127页，创作于2023年2月该公司未能遵守为对万级洁净室进行清洗杀菌而编写的书面规程，生产人员并未按照SOP中所规定的，在对水池和平面区域进行清洁和杀菌时交替使用清洁剂和杀菌剂…”2007年8月15日GMP趋势报告。-实际和SOP的符合性483检查结果第101页，课件共127页，创作于2023年2月“未能遵守以书面形式制定的消毒规程。具体而言，没有能够证明该公司一直遵守了洁净室/灌装线清洗消毒规程文件证据。检查房间的清洁消毒日志…发现在对房间的清洁和消毒方面有几处不符之处和/或缺乏文件记录之处。该规程规定，该公司采用使用…与…相结合的每天定期清洁和消毒程序，同时采用使用…等杀孢子剂溶液的特殊清洗程序。在所检查的日志中发现了如下不符之处和/或缺乏文件记录之处。”2007年9月15日GMP趋势报告。（sop的记录和原始记录的符合性）483检查结果第102页，课件共127页，创作于2023年2月“进一步检查发现该场地发现了孢子含量升高的霉菌隔离样品因而增加了杀孢子剂的使用。他们所提供的唯一能够显示针对这种杀菌剂轮换操作变更的交流讨论和批准的记录只有电子邮件，而这些记录并不能说明所有的消毒剂轮换变更情况。”2005年6月15日GMP趋势报告。（变更程序问题）483检查结果第103页，课件共127页，创作于2023年2月“没有采用…对在与如…等生产区使用类似物料的无菌生产区分离出的微生物进行消毒剂/杀菌剂功效研究。”2006年6月15日GMP趋势报告。鉴定微生物和针对性方案。483检查结果第104页，课件共127页，创作于2023年2月“…无菌加工区在用于对房间和设备进行清洁和杀菌以创造无菌条件的系统方面有不足之处。具体而言，贵公司未能证明当前用于对无菌生产区进行消毒的杀菌剂…的有效性。除了最初进行的验证研究之外，贵公司未能针对贵公司生产厂房的…的敏感性对这些杀菌剂的有效性进行再验证。季度趋势分析报告显示，出现了与贵方研究中所挑战微生物菌株不同的细菌的生成。”2006年8月1日GMP趋势报告。（挑战性外，模拟现场）483检查结果第105页，课件共127页，创作于2023年2月“…灌装间、单混无菌过滤间、和三价制剂间所出现偏差的所有滋生微生物中大约有80％未鉴定到种的级别。”2005年9月1日GMP趋势报告。483检查结果第106页，课件共127页，创作于2023年2月警告信——杀菌剂

“贵方的答复称贵方将再进行一次研究以评估贵方所用杀菌剂的有效性，并对__层流罩进行清洁验证。请注意，将这些措施的完成日期定在2008年第一季度似乎太过了。在此提醒您，这个未对贵方所用消毒剂进行充分评估的问题在我们2004年检查中就曾发现过。我们建议您重新评估贵方为完成这两项研究所建议的时间期限。”2007年9月19日警告信。-整改的实效性第107页，课件共127页，创作于2023年2月“2003年11月为用于对贵方厂房灭菌所用的____进行的杀菌剂有效性验证研究，未能满足贵方在验证研究方案中为____所规定的验收标准中所确定的对数下降率要求____。”2007年5月24日警告信。---消毒效果的符合性警告信——杀菌剂

第108页，课件共127页，创作于2023年2月“无法保证消毒剂_____对霉菌有效，因为它未能满足贵方在2001年12月所做的‘___表面测试法杀菌剂验证和功效研究’中所确定的回收率验收标准。”2007年5月24日警告信。---回收率问题警告信——杀菌剂

第109页，课件共127页，创作于2023年2月警告信“发现生产人员在处理一个__软管时并未对其外表面进行消毒。此___软管的外表面会直接与___无菌原料药接触。”“发现生产人员处理或触摸没有采用消毒____擦拭过的各种工作表面、设备、小工具和桌子”---操作问题2008年9月16日警告信第110页，课件共127页，创作于2023年2月消毒剂的正确使用什么是轮换?一种细菌是否会变得对一种杀菌剂具有抗性？是否需要进行漂洗？ 是否需要使用无菌产品？第111页，课件共127页，创作于2023年2月轮换指南USP