不同光强下生长的垂盆草对ccl

不同光强下生长的垂盆草对ccl

环境影响药物的化学成分组成和含量，并影响药物的药理作用。随着药用植物人工栽培工作的推进，大量研究探讨了环境因子如光照、水分、养分等对药用植物生长、产量及化学成分的影响。有研究者氧化应激是植物包括药用植物在面对逆境的正常反应之一，同时氧化胁迫是许多疾病发生的病理基础，因此氧化胁迫和人类疾病之间的关系受到广泛关注。多种次生物质的产生和积累是药用植物应对逆境的反应之一，研究表明可以通过对植物施加逆境胁迫以促进具有抗氧化作用的化学成分的积累目前光照强度对药用植物的影响主要集中于生长、产量及化学成分的研究材料表面细胞培养—药材与细胞研究材料来自南京农业大学中药材研究所，经郭巧生教授鉴定为景天科景天属植物垂盆草HepG2细胞购自江苏凯基生物技术股份有限公司，来源于ATCC细胞库。试剂MEM培养基(美国GIBCO,11095-080);FBS(美国ExCellBiology,FSS500);CCl仪器96孔、24孔细胞培养板(美国CorningIncorporated);CO方法细胞培养HepG2细胞用含10%胎牛血清FBS的MEM培养基于37℃,5%CO处理组基于前期研究，参考杨金凤等mtt法对细胞的存活率进行检测细胞经消化、计数，配制成浓度为5×10细胞存活率=细胞凋亡和周期检测分别将对数生长期的HepG2细胞消化接种到6孔板中，次日待细胞贴壁后，根据组别设置加入相应的含药培养基，同时设立阴性对照组，药物作用72h后，消化收集细胞，按照检测试剂盒说明检测细胞凋亡情况与细胞周期。alt,ast,sod,mda,gsh及gsh-px活性检测将处于对数生长期的HepG2细胞消化接种到细胞板中，根据分组设置分别加入对应的含药培养基，药物作用72h后，收集细胞，吸取上清，按照试剂盒说明分别测定ALT,AST,SOD,GSH-Px活性及MDA,GSH含量，评价HepG2细胞损伤程度。数据分析采用Excel2010和SPSS18.0进行统计与分析，不同处理相同指标进行Duncan0.05多重比较。结果与分析各组胞存活率比较不同光强处理的垂盆草水提液对HepG2细胞存活率影响差异显著，见图1。垂盆草组除G2组外，HepG2细胞存活率显著高于模型组(存活率为38.30%)。G2组存活率为39.28%,与模型组无显著差异，但存活率比模型组高2.56%,同时显著低于水飞蓟宾组(存活率为62.93%)。G4组HepG2细胞存活率次之，与G3组无显著差异；G1组HepG2细胞存活率最高，为63.93%,与阳性对照水飞蓟宾组无显著差异。垂盆草细胞凋亡率模型构建不同处理对HepG2细胞凋亡的影响见图2。空白组细胞凋亡率(UR+LR)为6.63%,模型组为53.83%。5个垂盆草组HepG2细胞凋亡率均低于模型组；其中G1组凋亡率(15.78%)最低，低于水飞蓟宾组(19.61%)。关于cclCCl不同光强梯度垂盆草水提液对hepg2细胞ast活性的影响不同光强处理的垂盆草水提液对HepG2细胞ALT活性影响差异显著，见图4。与空白组相比，模型组ALT活性显著升高，比空白组增加了31.05%。与模型组相比，5个垂盆草组ALT活性显著降低，随光照强度降低呈升高趋势。在5个光强梯度垂盆草水提液处理中，G1组活性最低，为38.70U·L不同光强处理的垂盆草水提液对HepG2细胞AST活性具有显著影响。与空白组相比，模型组AST活力急剧升高，比空白组提高1.68倍。与模型组相比，垂盆草水提液作用于HepG2细胞后，AST活性显著降低，随光照强度降低，垂盆草组AST活性呈先升后降再升趋势。其中，G1组最低，比模型组降低53.32%,比水飞蓟宾组增加18.25%,并与水飞蓟宾组无显著差异。G5组AST活性最高，为10.04U·L水飞蓟宾对gh-px活性的影响不同光强处理的垂盆草水提液对MDA,SOD,GSH和GSH-Px水平的影响见表1。与空白组相比，模型组MDA含量急剧上升，比空白组增加7.13倍；与模型组相比，垂盆草水提液预处理HepG2细胞后，HepG2细胞MDA含量显著降低。在5个光强处理中，G4组MDA含量最高，与模型组差异不显著，但比模型组减少3.08%;G2组与G3,G5组差异不显著，与G1组有显著差异；G1组含量最低，比模型组减少59.69%,与水飞蓟宾组无显著差异。与空白组相比，模型组SOD活性、GSH含量以及GSH-Px活性显著降低。与模型组相比，垂盆草给药组SOD活性、GSH-Px活性及GSH含量显著增强。在5个光强处理中，上述3个指标的最大值均出现在G1组，分别为0.31U·mg垂盆草抗氧化酶系统中hepg2细胞活性的关系将前期发表研究HepG2细胞存活率与铁离子还原能力(FRAP法)呈显著正相关，与HepG2细胞内的SOD活性和GSH含量以及GSH-Px活性呈显著或极显著正相关。HepG2细胞ALT活性与异鼠李素含量呈显著负相关。HepG2细胞MDA含量与垂盆草水提物的DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力(FRAP法)存在显著负相关关系。HepG2细胞SOD活性与AST活性呈显著负相关，与铁离子还原能力(FRAP法)、细胞内GSH含量以及GSH-Px活性呈显著或极显著正相关。此外，垂盆草总酚及总黄酮与HepG2细胞存活率没有显著相关性。槲皮素含量与HepG2细胞内的ALT,AST活性、MDA含量表现为负相关，但没有达到显著。对垂盆草保肝作用的影响肝损伤模型有多种，本实验采用经典的CCl生长环境光强显著影响垂盆草药材的保肝活性。G1处理的HepG2细胞存活率最高，与阳性对照水飞蓟宾组存活率相当，细胞凋亡率及ALT,AST活性最低。说明光强是影响垂盆草发挥保肝效果的重要环境因子，G1组处理保肝药效最好。史红专等潘金火等综上所述，生长环境中不同光强条件显著影响垂盆草药材的保肝功效。其中在100%全光强条件下生长的垂盆草拥有最佳的保肝作用，其水提物保肝功效与水飞蓟宾相当。适度遮光(60%全光照)也具有较强保肝作用。从保肝功效角度考虑，垂盆草在全光照下种植为宜。