四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响

研究背景WHO发达国家低、中等收入国家1000万1900万死于心血管疾病患者数目500万600万年，271.6万人死于CVD。天天有7420人死于CVD，11.6秒死亡1例。四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第1页罪犯斑块不在于斑块大小而是斑块结构、成份斑块破裂70%急性心脏事件病理原因四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第2页易损斑块形成过程及病理特征四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第3页thinfibrouscap(<65um)biglipidcoreinflammatoryneoangiogenesis易损斑块形成过程及病理特征extracellularmatrixdegradation四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第4页治疗现实状况调脂、抗血小板聚集、介入性冠状动脉治疗、冠状动脉旁路移植术等血管再通治疗不过每年仍有约两千万人死于急性心血管事件四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第5页亟待处理问题怎样稳定易损斑块，保护血管，是当前研究重点和难点围绕机制，开发思绪，深入研究，使中医药在AS治疗彰显优势中医药含有多靶点、多路径整体调整作用四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第6页毒瘀滋阴解毒活血脂质炎症反应血管新生痰瘀热毒虚阴中医AS病机认识四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第7页滋阴解毒活血－四妙勇安汤四妙勇安汤最早见于华佗《神医秘传》，曰:“内服药用金银花三两，玄参三两，当归二两，甘草一两，水煎服。”清代医家鲍相敖将此方命名为“四妙勇安汤”，收载于《验方新编》中，含有清养结合、毒瘀并驱功效，清解络中之毒，化解络中之瘀，滋养络脉之体临床应用：周围血管病、下肢闭塞性动脉粥样硬化、冠心病作用机制：抗凝、抗氧化、促血管内皮细胞增殖作用动脉粥样硬化？路径？四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第8页

一、动脉粥样硬化易损斑块模型建立四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第9页1w4w经股动脉球囊拉伤术开始予高脂饮食100g/d造模方法牛血清白蛋白250mg/kg2w

取材10w维持高脂饮食四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第10页经股动脉球囊拉伤术左肾动脉左髂总动脉右肾动脉右髂总动脉主动脉弓球囊（压力约为2个大气压）左股动脉备皮插管缝合四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第11页评价指标血脂病理形态纤维帽厚度脂池面积炎症因子易损指数新生血管四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第12页

试验结果

1.复合造模对血脂及ox-LDL影响造模后TC、LDL-C、ox-LDL成增高趋势。四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第13页2.复合造模对血清炎症因子水平影响与对照组比较*P<0.01造模原因干预后，血清炎症因子显著增高，CRP显著增高四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第14页3.复合造模对内膜影响MZHE染色(100倍)造模原因干预后，内膜显著增厚，纤维帽变薄,形成AS斑块

四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第15页4.复合造模对脂核、易损指数影响与对照组比较*P<0.01VI=(ELA+CD68)/(CA+SMA)造模原因干预后，脂核增大，细胞外脂质增加，炎症细胞增多，平滑肌细胞降低，胶原纤维增多；易损指数增大四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第16页ZMZMZMZM造模原因干预后，脂核增大，细胞外脂质增加，炎症细胞增多，平滑肌细胞降低，胶原纤维增多；易损指数增大。Masson染色(100倍)油红O染色(400倍)CD68免疫组化染色(DAB显色，400倍)

α-SMA免疫组化染色(DAB显色，400倍)5.复合造模对脂核、易损指数影响四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第17页6.复合造模对斑块内CD31及VEGF表示影响CD31造模原因干预后，斑块内可见内皮细胞组成连续或不连续小管腔,CD31和VEGF表示呈强阳性。VEGF免疫组化染色(DAB显色，400倍)ZMZM四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第18页小结本试验模拟人AS发病机制综合各种原因，以高脂饲喂叠加免疫生物损伤和内皮损伤复合原因制作模型，更靠近于人体AS发生发展过程经过对家兔血脂、血清炎症标志物及斑块病理形态、脂质成份、炎症反应、血管新生、胶原含量、易损指数等综合分析，证实建模成功可操作性、重复性、稳定性、易于评价四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第19页

二、四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质影响四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第20页研究方法易损斑块动物模型建立成功后，以辛伐他汀（5mg/kg)作为阳性对照，观察四妙勇安汤对模型病理形态、易损指数、斑块内细胞外基质影响，明确其稳定斑块作用机制。四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第21页斑块内脂质含量1α-SMA，MMP-9，NF-κB

234评价指标胶原含量（CA）内中膜及纤维帽厚度四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第22页1.四妙勇安汤对主动脉内膜及纤维帽影响与正常组比较P<0.01,与模型组比较×P<0.05,#P<0.01。ZMXS模型组：内膜显著增厚;“纤维帽”较薄;内皮部分脱落，大量脂质沉积，泡沫细胞及炎性细胞浸润;中膜平滑肌降低，弹力板不连续，弹力纤维断裂溶解给药组：内膜增厚，有少许泡沫细胞形成，内皮完整，中膜平滑肌增殖，弹力板尚完整HE染色100倍四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第23页2.四妙勇安汤对斑块内脂质含量影响模型组ELA,LNA/PA,CD68高于正常组，四妙勇安汤可降低易损指数，降低LCA/PA、ELA、CD68阳性面积百分比。与正常组比较，*P<0.01；与模型组比较，×P<0.05,#P<0.01ELA(油红“O”染色)40×CD68免疫组化染色（DAB显色）40×正常组模型组辛伐组四妙组四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第24页

CA(Masson染色)40×

α-SMA免疫组化染色（DAB显色）40×

3.四妙勇安汤对斑块内CA、α-SMA影响组别nCAα-SMA正常组100.68±0.2916.7±7.80模型组89.89±1.48*3.69±1.51*辛伐组1018.67±3.60*▲9.03±3.80△四妙组1018.29±4.37*▲16.50±3.23▲注：与正常组比较*P<0.01,与模型组比较△P<0.05,▲P<0.01模型组斑块内CA高于正常组,α-SMA低于正常组，四妙勇安汤可升高斑块内CA、α-SMA阳性面积百分比。四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第25页4.四妙勇安汤对斑块内MMP-9,NF-κB影响与正常组比较P<0.01,与模型组比较×P<0.05,#P<0.01。模型组斑块内MMP-9,NF-κB蛋白表示显著增高，四妙勇安汤能够抑制MMP-9,NF-κB蛋白表示四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第26页讨论利用复合原因造模方法建立兔AS斑块模型，并从血脂、血清炎症标志物、主动脉病理形态、纤维帽厚度、斑块内炎症反应、脂质成份、血管新生、胶原含量、易损指数等方面综合分析，证实建模成功依照动脉粥样硬化斑块不稳定“阴虚毒瘀”中医病机。利用含有滋阴活血解毒之功效四妙勇安汤对动脉粥样硬化模型兔进行干预，明确其稳定AS易损斑块作用机理四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响第27页四妙勇安汤可延缓血管壁病变进展，降低内膜厚度及脂核面积、增加纤维帽厚度抑制降低斑块内