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急性肾功能衰竭【摘要】目的:复制家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的动物模型。观察升汞中毒的一般状态,尿质和量的变化,以及肾脏人体形态及病理组织学改变。根据实验指标判断、分析和讨论急性肾功能衰竭的发病机制及病理生理变化。方法:复制家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的动物模型,观察其病理特征。结果:尿蛋白含量增高,出现管型。结论:学习了制作了家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的模型,该模型的建立助于掌握急性肾功能衰竭的特点及其对动物机体的影响。关键字:重金属类毒物、肾小管坏死、血尿素氮。材料及方法:实验前一天取家兔12只,其中10只做为实验组,另外2只作为对照组,在实验组家兔的皮下注射1%氯化汞适量,在对照组家兔皮下注射等量的生理盐水作为对照。实验时将家兔称重后,以20%乌拉坦溶液以5ml/kg的剂量由耳缘静脉慢慢推注,进行全身麻醉,期间观察动物的肌张力、呼吸频率、角膜反射作为观察麻醉的深度指标。将家兔仰卧固定于兔试验台上,自尿道口插入导尿管导尿,如果尿量过少,下腹剪毛在耻骨联合上1.5厘米处正中切口,长约4厘米,分离皮下组织沿腹白线切开腹膜,暴露膀胱,用注射器取适量尿液备测尿蛋白、尿沉渣镜检。颈部剪毛,做颈部切口,分离右侧颈总动脉、左侧颈静脉,分别做颈总动脉插管和颈静脉插管,经总动脉放血5ml,离心后取血清备测尿素氮。尿蛋白定性检查:用吸管吸取尿液3ml加入试管内,用试管夹夹着在酒精灯外焰上加热至沸,多数情况下尿液煮沸后会变浑浊此时加入5%醋酸溶液3-5滴,继续加热煮沸,若尿液由浑浊变为透明则为尿酸所致;若仍浑浊则表示尿液中含有尿蛋白,依据浑浊程度推断尿蛋白含量标准如下表所示:结果煮沸后的表现蛋白含量(g/L)—清晰,无浑浊无+黑色背景下轻微浑浊<0.1+轻度白色浑浊,无颗粒及絮状沉淀0.1-0.5++明显白色浑浊,无絮状沉淀0.5-2+++絮状白色沉淀,无凝块2-5++++凝固成块,大量絮状沉淀>56.尿液沉渣镜检:⑴取收集的尿液2ml至于离心管内离心5分钟,使尿液中的有形成分沉淀,离心后去掉上清液。⑵将试管内的尿沉渣混匀,吸取一滴加于载玻片中央,用盖玻片覆盖后镜检。⑶暗视野下先低倍镜后高倍镜,移动视野,寻找并观察管型。(注:管型是蛋白质、细胞及其碎片等物质在远曲小管、集合管中凝固形成的圆柱体蛋白聚体)7.血清尿素氮的测定:所需试剂:动物的血清、尿素氮标准应用液I、尿素氮标准应用液II、蒸馏水、二乙酰一污一氨硫脲液(试剂I)、酸混合液(试剂II)配置方法如下:
试剂或样品(ml)测定管标准管空白管血清0.02尿素氮标准应用液II0.1蒸馏水0.50.40.5试剂I0.50.50.5试剂II4.04.04.0加完上述试剂后,混匀置沸水锅中煮沸10分钟,置流水中冷却3分钟,于721型分光光度计上用520mm波长比色,以空白管调零,读取各测定管及标准管的吸光度。按下列公式计算:血清尿素氮二(测定管吸光度/标准管吸光度)X5'X5‘‘(注:'为测定管血清稀释倍数/标准管尿素氮应用液稀释倍数‘‘为尿素氮标准应用液II浓度)结果:⑴尿蛋白定性检查结果:尿液的蛋白含量为2-5g/L⑵血清尿素氮测定结果图表如下:实验组测定管1测定管2平均值标准管空白管尿素氮10.1530.1060.12950.0050647.520.1470.1230.1350.0040843.7530.4090.3910.40.0370270.270340.1480.1570.15250.0040953.12550.280.2560.2680.0330203.030360.3350.4140.37450.0180520.138970.6560.7460.7010.0540324.53780.360.3990.37950.0170558.088290.3290.1890.2590.0140462.5100.3180.4170.39450.0410240.5488平均值502.3489对照组测定管1测定管2平均值标准管空白管尿素氮10.0320.0420.0370.0070132.142920.0340.0390.03650.0060152.0833平均值142.1131尿素氮合蛆1 2组别实验组动物的血清尿素氮的含量
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