中医贫血模型的复制作

中医贫血模型的复制作

中医认为，血液不足主要是由于缺血、脾胃虚弱或血液生化不足，或由于血液抑制和新血不生长。临床表现为面色苍白、唇舌、指甲色淡无华、头晕、心悸失眠、手脚发麻,脉细弱无力等,与现代医学的“贫血”相似。故中医血虚动物模型一般是使动物外周血红细胞减少,血红蛋白含量降低,或使动物骨髓抑制,使造血干细胞及祖细胞数量减少,不仅影响红细胞的生成,且影响白细胞与血小板的生成。本文试就血虚动物模型的复制作一阐述。1当前的红细胞动物模型1.1大鼠尾放血时间本模型为急性失血性血虚证,一般采用放血造模型。小鼠,体重20~22g,尾部放血0.5ml/只,失血后24h左右。大鼠,体重180~200g,尾部放血1.5~2ml/只,隔日一次,连续5次。家兔放血占全血量30%,狗按40ml/kg放血,可反复几次,即可造成失血性贫血血虚动物模型。1.2动物饲料配方营养不良性血虚是人工造成造血物质的缺乏,采用AOAC推荐的低铁饲料配方配制动物饲料:玉米淀粉54%,奶粉40%,豆油5%,食盐1%。喂饲动物2周后可造成缺铁性贫血模型,为加速造模可加用放血法。1.3vml/只,2次给雄性小鼠或大鼠皮下注射化学药品乙酰苯肼,破坏红细胞膜,造成溶血性贫血模型。小鼠皮下注射2%乙酰苯肼0.3ml/只,共2次;或在1、4、7天皮下注射乙酰苯肼0.2g/kg、0.1g/kg、0.1g/kg,第9天造成模型;或于第3天皮下注射乙酰苯肼0.2g/kg,第7天造成模型。大鼠于第1、4天皮下注射乙酰苯肼0.16g/kg、0.08g/kg,8天造成模型,或两次剂量均为0.2g/kg,10天造成模型。1.4常用抗肿瘤药物多采用辐射损伤法、化学药物损伤法等方法造成。辐射损伤法:60CO-γ射线照射动物全身可使动物造血干细胞和祖细胞减少,骨髓造血机能受到抑制,从而使全血细胞下降,这种血虚类似临床上的再生障碍性贫血。环磷酰胺(CY)应用法:环磷酰胺是细胞毒制剂,是常用的抗肿瘤药物和免疫抑制剂,毒副作用是骨髓抑制,使造血细胞的生成减少,环磷酰胺造模的用量及时间可灵活掌握。丝裂霉素应用法:丝裂霉素是抗生素类广谱抗肿瘤,可抑制DNA复制,不良反应为骨髓抑制,以白细胞和血小板下降明显。马里兰应用法:又名百消安,属磺酸酯类,在体内解离后起烷化作用,小剂量即可明显抑制粒细胞生成,剂量提高可抑制全血象。顺铂致大鼠贫血模型:顺铂是常用的金属铂的络合物,为广谱抗肿瘤药,它能与DNA结合形成交叉键,防止其复制,高剂量时亦能阻止RNA和蛋白质的合成,可骨髓抑制。1.5复合4.4血清蛋白的检测从多途径多环节造成动物的血虚状态,使动物的病理、生理状态不再局限于某一个方面,具体造模方法是:小鼠:体重18~22g,将实验动物随机分组,于给药第2日,第5日皮下注射乙酰苯肼20mg/kg,40mg/kg,从第5日每日腹腔注射环磷酰胺40mg/kg,于末次给药1.5h后观察小鼠各项指标,可造成复合血虚模型。2干预动物模型复制的概念2.1计算模型的准确性失血性血虚方法简单,指标明确,不需特殊设备,但失血量难以完全一致;溶血性血虚是利用化学药品乙酰苯肼的氧化作用,破坏红细胞膜,造成溶血,使红细胞数明显减少,网织红细胞病理性代偿增高和白细胞数量代偿性升高,操作较失血性血虚更为方便,但由于红细胞变形及碎片的干扰,镜检计数较困难,以红细胞压积法代替镜检计数较为准确。失血法及溶血法造模均着眼于直接造成外周血中的细胞数量减少,对机体造血系统功能的影响不大。化学损伤法常选用抗肿瘤药,简单易行,环磷酰胺的给药剂量,途径及次数,可灵活选用,但其对红细胞的作用不如对白细胞的作用明显,且持续时间较短,如受试药物显效较慢,模型动物的血象即自然恢复甚至出现反跳现象。缺铁性贫血属血液生化之源不足。辐射损伤法是用60Co-γ照射动物全身,损伤骨髓,影响造血功能,此模型较接近临床上的再生障碍性贫血,但特殊设备,辐射剂量难以控制,过小达不到损伤要求,偏大又会导致动物死亡,有时药物的作用难以观察,而综合造模方法采用溶血法与化学损伤法联合应用制备血虚动物模型,从双重环节造成动物血虚,表现为骨髓超微结构发生变化,造血微环境遭到破坏,骨髓造血重建活性下降,各类细胞数量全面下降,而非单纯表现为红细胞或白细胞的数量降低,使模型动物的病理、生理变化不再局限于某一方面,此模型动物存活率较高,血虚状态持续时间相对较长,有利于中药药效的表达。2.2动物模型与临床病证的区别中医药研究动物模型的复制一般由病因模型和病理模型,中医临床病证是多方面的,为了能更好的反映临床,动物模型的复制应采用复合方法造模,从多环节使动物模型更接近临床病证。血虚动物模型的复制,除了采用溶血法与化学损伤法联合应用外,也可用放血法与化学损伤法并用复制动物模型,动物在因失血而造成血虚基础上同时