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文档简介

1/432/43一、菊花组织培养1.理论基础:植物细胞________2.基本过程:3/434/43二、月季花药培养1.理论基础:花粉含有________2.花粉发育过程:________、________、________等阶段3.产生花粉植株两种路径:5/436/43三、血红蛋白提取和分离1.凝胶色谱法:也称分配色谱法,是依据________________________________________________________________________分离蛋白质方法。相对分子质量较小移动速度较慢,而相对分子质量较大无法________,移动速度较快。2.缓冲溶液:能够抵制外界________对溶液pH影响,维持pH________3.电泳:带电粒子在________作用下发生迁移过程7/434.样品处理:红细胞洗涤→血红蛋白释放→分离血红蛋白溶液→透析5.________:凝胶色谱柱制作→________→样品加入和洗脱→SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳8/43四、多聚酶链式反应扩增DNA片段1.PCR原理:在一定缓冲溶液中提供________,分别与两条模板链结合两种引物,________________________________________________________________________,同时控制温度使DNA复制在________重复进行2.PCR反应过程:变性→________→延伸9/43五、植物芳香油提取1.植物芳香油提取方法:蒸馏、________和________等2.水蒸气蒸馏法原理是:利用________将挥发性较强植物芳香油携带出来,形成油水混合物,冷却后,混合物又会重新分出________。依据蒸馏过程中原料放置位置,能够将水蒸气蒸馏法划分为________、________和________3.萃取法:将粉碎、干燥植物原料用________浸泡,使芳香油溶解在________中方法。芳香油溶解于有机溶剂后,只需蒸发出有机溶剂,就能够取得纯净植物芳香油了10/4311/43六、胡萝卜素提取12/43答案:一、1.全能性2.脱分化再分化3.种类年纪微量元素维生素甘氨酸烟酸生长素细胞分裂素5.8

4.接种移栽二、1.全能性2.四分体时期单核期双核期3.脱分化胚状体愈伤组织4.初花期完全未开放单核期细胞核由中央移向细胞一侧时期醋酸洋红法焙花青—铬矾法红蓝黑从受伤部位产生愈伤组织彻底去除花丝愈伤组织胚状体长出愈伤组织分化培养基上幼小植株分开13/43三、1.相对分子质量大小进入凝胶内部2.酸和碱基本不变3.电场5.凝胶色谱操作凝胶色谱柱填装四、1.DNA模板四种脱氧核苷酸、耐热DNA聚合酶体外2.复性五、1.压榨萃取2.水蒸气油层和水层水中蒸馏水上蒸馏水气蒸馏3.有机溶剂有机溶剂4.水蒸气蒸馏5.漂洗静置六、1.岩藻微生物2.干燥萃取浓缩14/4315/431.原理(1)植物细胞全能性概念:高度分化植物细胞,依然含有发育成完整植株潜能。(2)高度分化植物细胞全能性表示条件①离体条件;②无菌操作(预防杂菌污染);16/43③适宜物质诱导和调整(激素主要是生长素、细胞分裂素等);④种类齐全、百分比适合营养物质;⑤温度、酸碱度、光照等条件控制。17/432.基本过程18/433.影响植物培养原因(1)外植体选取①不一样植物组织培养难度不一样。②对于同一个植物材料,材料年纪,保留时间长短等也会影响试验结果。生长旺盛嫩枝生理情况好,轻易诱导脱分化和再化化。19/43(2)培养基配制(MS培养基)①大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。②微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。③有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。④pH、温度、光照。不一样植物对各种条件要求往往不一样。菊花适宜条件:pH在5.8左右;温度控制在18℃~22℃;每日日光灯光照12h。20/431.DNA与蛋白质在不一样NaCl溶液中溶解度不一样

2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液溶解规律DNA溶解析出蛋白质部分发生盐析沉淀溶解NaCl溶液从2mol/L降低过程中,溶解度逐步增大21/432.比较细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR)细胞内DNA复制体外DNA扩增(PCR)解旋解旋酶,边解旋边复制80℃~100℃高温解旋,双链完全分开酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA、RNA温度体内温和条件高温能量ATP不加循环次数生物体本身控制30屡次相同点提供DNA模板;4种脱氧核苷酸为原料;子链延伸方向都是从5′端到3′端22/433.血红蛋白提取和分离方法(1)凝胶色谱法①含义:依据相对分子质量大小分离蛋白质。②原理a.相对分子质量较小蛋白质轻易进入凝胶内部通道,旅程较长,移动速度较慢。b.相对分子质量较大蛋白质无法进入凝胶内部通道,只能在凝胶外部移动,旅程较短,移动速度较快。23/43(2)电泳法①含义:带电粒子在电场作用下发生迁移过程。②原理:利用了待分离样品中各种分子带电性质差异和分子本身大小、形状不一样,使带电分子产生不一样迁移速度,从而实现样品中各种分子分离。24/431.几个物质提取方法、原理及步骤提取物质提取方法提取原理步骤血红蛋白凝胶色谱法、电泳法依据相对分子质量大小②各种分子带电性质差异以及分子本身大小、形状不一样样品处理粗提取纯化纯度判定玫瑰精油水蒸汽蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强植物芳香油携带出来水蒸气蒸馏分离油层除水、过滤橘皮精油压榨法经过机械加压,压榨出果皮中芳香油②压榨、过滤、静置③再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂中,蒸发后得到提取物①粉碎、干燥②萃取、过滤③浓缩25/432.试验流程设计(1)玫瑰精油提取试验流程26/43(2)橘皮精油提取试验流程石灰水浸泡橘皮→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油。(3)胡萝卜素提取试验流程胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素。27/433.水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏区分(1)这三种方法基本原理相同,但原料放置位置不一样。①水中蒸馏:原料放在蒸馏容器水中,水要完全浸没原料。②水上蒸馏:容器中水上方有筛板,原料放在筛板上,水量以沸腾时不浸湿原料为宜。③水气蒸馏:蒸馏容器下方有一排气孔,连接外源水蒸气,上方有筛板,上面放原料。(2)各自特点:水中蒸馏设备简单、成本低、易操作,而水上蒸馏和水气蒸馏时间短,出油率高。28/434.用层析法判定时应注意问题(1)选择洁净滤纸,为预防操作时滤纸污染,应尽可能防止用手直接接触滤纸,能够戴手套进行操作。(2)点样时应注意点样斑点不能太大(直径应小于0.5cm),假如用吹风机吹干,温度不宜过高,不然斑点会变黄。(3)将点好样滤纸卷成筒状,卷纸时注意滤纸两边不能相互接触。以免因毛细现象造成溶剂沿滤纸两边移动加紧,使溶剂前沿不齐,影响结果。29/4330/43如图为科学家将胡萝卜韧皮部细胞培养形成胡萝卜植株过程示意图(注:胚状体即等同于植物种子胚结构)。31/43请据图完成以下问题:(1)由细胞团形成胚状体要经过________过程。(2)这种培养方法在生物技术中称为________培养。(3)培养基中除了需要水分和有机营养物质外,还需要加入________和________。培养过程必要外界条件是适宜温度、________和________等。(4)由胡萝卜韧皮部细胞培养成完整胡萝卜植株证实了________________________________________________________________________。32/43解析:植物组织培养理论基础是细胞全能性;由细胞团发育成植物幼苗需经细胞分裂和细胞分化两个过程;植物组织培养所用培养基中应含有植物生长发育所需各种营养物质,为诱导根或芽分化还应加入生长素、细胞分裂素两种植物激素,并确保适宜外界环境。33/43答案:(1)细胞分裂和细胞分化(2)组织(3)矿质元素生长调整类(激素)物质光照、氧气无菌(4)植物细胞含有全能性34/43(·沂水模拟)月季花药培养时花粉粒最好是(

)A.四分体时期 B.单核居中期C.单核靠边期 D.二核或三核花粉粒答案:C解析:花粉发育过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。普通来说,在单核期细胞核由中央移向细胞一侧时期,花药培养成功率最高。35/43一个由32P标识DNA分子,放在未标识环境中培养,复制5次后标识DNA分子占DNA分子总数 (

)A.1/10

B.1/16C.1/25

D.1/3236/43解析:一个DNA分子n次复制后产生DNA数目为2n,而DNA复制是半保留复制,其特点是:新形成DNA双链一条是来自亲代DNA分子母链,另一条是新形成子链。这么最初由32P标识DNA分子复制后,其标识两条链就分别进入两个子代DNA分子中,即两个子代DNA分子被标识了。然而因为是在未标识环境中培养,不论多少次复制,只有最初标识过两条链存在两个DNA分子中含32P,这么经n次复制,标识DNA分子占2/2n,即1/2n-1,所以本题应选B。答案:B37/43(·扬州模拟)在血红蛋白整个提取过程中,不停用磷酸缓冲液处理目标是 (

)A.预防血红蛋白被O2氧化B.血红蛋白是一个碱性物质,需要酸中和C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白提取过程D.让血红蛋白处于稳定pH范围内,维持其结构和功效答案:D38/43解析:利用磷酸缓冲液模拟细胞内pH环境,确保血红蛋白正常结构和功效,便于分离观察(红色)和科学研究(活性)。39/43作为萃取胡萝卜素有机溶剂,哪一项不符合试验要求 (

)A.能充分溶解色素 B.与水混溶C.对人无毒 D.易与产品分离解析:选择萃取胡萝卜素有机溶剂标准包含A、C、D三

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