贝科能对心肺复苏后大鼠甲状腺保护作用的研究

贝科能对心肺复苏后大鼠甲状腺保护作用的研究

许多非甲状腺疾病，如急性心脏病、伤口、休克和莫斯基蓝，在发病过程中受到甲状腺损伤。多年来,人们试图从不同环节寻找应对危重病病程中出现的甲状腺损伤的措施,但结果不尽人意。本实验采用SD大鼠心搏骤停-心肺复苏(CPR)模型,了解复苏后大鼠甲状腺损伤情况,并采用贝科能进行干预,试图寻找防治复苏后大鼠甲状腺损伤的新方法。现报告如下。1材料和方法1.1实验动物中心健康雄性SD大鼠24只,体质量(274.96±29.59)g,日龄49~60d,由中国科学院上海分院实验动物中心提供。将SD大鼠随机分为对照组、常规复苏组、贝科能治疗组,每组8只大鼠。1.2贝科能治疗大鼠心肌病术前禁食12h,颈部正中切口,行气管插管,分别于左侧颈外静脉、右侧颈总动脉监测动脉血压。操作完成并稳定30min后经颈静脉注射琥珀酰胆碱(1.5mg/kg)抑制呼吸,并应用0.5mol/L冰氯化钾(4℃,1.2mL/kg)停搏液致大鼠心搏骤停,持续5min后行心肺复苏,出现自主心律、脉搏且收缩压≥8kPa,持续10min以上判定为自主循环恢复(ROSC),ROSC后2h逐步撤离呼吸机,拔除气管插管和动静脉导管并缝合切口。贝科能治疗组于心搏恢复时将贝科能(按复合剂量1支/10kg)用生理盐水稀释后腹腔注入,复苏后12h再给同等剂量;2期王军,周乃胜,杨兴易,等.贝科能对复苏后大鼠甲状腺组织MDA含量及SOD和Na+-K+-ATPase活力的影响161常规复苏组腹腔注射生理盐水0.3mL,对照组仅进行插管等手术操作,不进行心搏骤停和心肺复苏。本文所有实验参数设计和记录均参照实验研究的Utstein模式。1.3智利刀盘术后24h取大鼠左侧甲状腺组织,用锐利刀片切成3块1mm3大小的组织块放入液氮冷藏,用于检测MDA含量及SOD、Na+-K+-ATPase活力。1.4主试剂注射用贝科能,北京双鹭药业股份有限公司生产;MDA、SOD及Na+-K+-ATPase测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.5样品检测1.5.1绘制标准曲线以四已氧基丙烷为MDA标准品,用硫代巴比妥酸法测定荧光强度,绘制标准曲线。然后,取100g/L甲状腺组织匀浆液100μL,在与标准曲线相同条件下反应,以空白管调零,测定样品荧光强度,并根据标准曲线计算甲状腺组织MDA含量。1.5.2sed活力的测量采用改良的黄嘌呤氧化酶法,取10g/L甲状腺组织匀浆10μL,按试剂盒说明书操作,在550nm处比色,并计算SOD活力。1.5.3-k，p-k活力测试采用定磷法,严格按试剂盒说明操作。2两组合并期对脏器脏器na+-k+-atpase活力的影响常规复苏组大鼠甲状腺组织MDA较对照组及贝科能组显著增高(t=16.75、2.60,P<0.01)。而常规复苏组甲状腺组织Na+-K+-ATPase活力显著低于贝科能组(t=2.60,P<0.05)。常规复苏组及贝科能组甲状腺组织SOD活力、Na+-K+-ATPase活力明显低于对照组,差异具有显著统计学意义(t=2.97~8.85,P<0.01)。见表1。3gsh与ade-sd4对小鼠脏器组织病理学活性的影响贝科能是由新鲜酵母中提取的含有辅酶Ⅰ、三磷酸腺苷、辅酶A、黄素核苷酸、还原型谷光甘肽(GSH)、腺苷蛋氨酸(Ade-SD4)、核苷酸、1,6二磷酸果糖(FDP)等多种辅酶及生命活性物质的复合制剂,这些辅酶均为细胞物质代谢和能量代谢所必需,如FDP通过刺激磷酸果糖激酶的活性,聚增细胞内高能磷酸池,提高细胞内ATP浓度,恢复细胞极化状态,从而有益于炎症、休克、缺血、损伤等状态下的细胞能量代谢及对葡萄糖的利用,以促进细胞的修复和功能的改善。而GSH与Ade-SD4可以相互转换从而保持GSH的抗氧化活性,并可以中和机体病理状态下产生的游离自由基,对抗自由基对组织产生的继发性病理损害;辅酶Ⅰ除了是产生能量必需的辅酶外还是强大的抗氧化剂;辅酶A则参与机体上百种生化反应,是必需的辅酶。辅酶Ⅰ与辅酶A两者互相转化补充,共同参与细胞的能量合成,以提高病理状态下的低能状态。本实验结果显示,复苏后甲状腺组织中MDA含量均显著增高,同时SOD、Na+-K+-ATPase活力显著低于对照组,说明氧自由基(OFR)介导的脂质过氧化损伤、细胞能量代谢障碍,参与了复苏后甲状腺滤泡细胞急性损伤。贝科能治疗组甲状腺组织中MDA含量较常规复苏组明显下降,