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学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精基因工程专题主讲教师:毕诗秀【考试说明对基因工程部分的要求】基因工程(1)基因工程的诞生(2)基因工程的原理及技术(3)基因工程的应用(4)蛋白质工程ⅠⅡⅡⅠ1。下列叙述符合基因工程概念的是A。B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上2。在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是A。用mRNA为模板逆转录合成DNAB.以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C。将供体DNA片段转入受体细胞中,再进一步筛选D。由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA获取目的基因的方法有哪些?如何操作?适用对象?3.天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞4。下列关于转基因生物安全性的叙述,错误的是A。种植转基因作物应与传统农业种植区隔离B。转基因作物被动物食用后,目的基因会转入动物体细胞中C。种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性D。转基因植物的目的基因可能转入根系微生物5.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:⑴一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有和个游离的磷酸基团.⑵若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越。⑶用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是.⑷与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止⑸为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入酶.⑹重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了.⑺为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。6.请回答基因工程方面的有关问题:⑴关于基因工程的工具①构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图1中的处,DNA连接酶作用于图1中的_______处。(填序号)②用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图2(1kb即1000个碱基对),请画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点,并标出酶切位点之间的距离。⑵利用PCR技术扩增目的基因①PCR过程需要____________________________酶,作用于图3_________步骤。②如果延伸时间设置较长,在第轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段,复制方式为______________。③如图4所示,箭头代表子代DNA的延伸方向,我们可以根据已知DNA序列复制未知DNA序列,TDNA片段基因序列已知,设计4段TDNA的引物A、B、C、D,引物的作用是___________________,如果利用PCR技术扩增TDNA片段,我们可选择_______作为引物(填字母);如果扩增未知基因可选择________作为引物(填字母)。④设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图5),请分别说明理由。第1组:;第2组:⑤PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下图6的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为.⑶获得转基因植株①在构建重组质粒时,应选用图中限制酶对进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。②为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,应在培养基中加入。③将转入抗旱基因的水稻细胞培育成完整的植株需要用技术,该技术包括图7中①、②过程。7。黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引起癌变。某些微生物能表达AFB1解毒酶.将该酶添加在饲料中可以降解AFB1,清除其毒性.⑴AFB1属于类致癌因子。⑵AFB1能结合在DNA的G上.使该位点受损伤变为G',在DNA复制中,G'会与A配对。现有受损伤部位的序列为,经两次复制后,该序列突变为.⑶下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图据图回答问题:①在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株.经测定:甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶;乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶。过程Ⅰ应选择菌液的细胞提取总RNA,理由是__________________________________.②过程Ⅱ中,根据图示,可以看出与引物结合的模板是_________。③检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶,应采用方法。⑷选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料,探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表,据表回答问题:①本实验的两个自变量,分别为。②本实验中反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是.③经测定,
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