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文档简介
4食品安全迅速检测技术及应用项目二农药残留迅速检测回忆上节课内容1.样品制备2.农药、农药残留的概念10/10/202310/10/202310/10/2023酶克制率法10/10/2023注意事项10/10/2023项目二农药残留迅速检测试验二、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的迅速检测GB/T5009.199-2023蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的迅速检测一、试验目的:学习迅速卡法测定有机磷农残迅速检验法及熟悉检验成果评估10/10/2023项目二农药残留迅速检测10/10/2023项目二农药残留迅速检测10/10/2023迅速检测试纸法10/10/2023项目二农药残留迅速检测四、速测卡测定农药残留的主要环节1)整体测定法剪成1cm碎片,取5g放入带盖瓶,加入10ml缓冲液,振摇50次,静置2min。取1片速测片,用白色药物蘸取提取液,放置10min以上进行预反应速测卡对折,用手捏3min或用恒温3min,使红色药片与白色药片叠合反应,每批设定一种空白10/10/2023项目二农药残留迅速检测四.速测卡测定农药残留的主要环节2)表面测定法(粗筛法)滴2-3滴缓冲液溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦取1片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上放置10min以上,进行预反应将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合反应。每批测定设一种空白对照10/10/2023请注意10/10/202310/10/2023项目二农药残留迅速检测五、速测卡测定农药残留的注意事项1)空白对照2)次生物质3)预反应温度4)反应时间5)滴加溶液的数量6)预反应时间一致7)观察成果时间1min10/10/2023项目二农药残留迅速检测六、检测成果判断1、成果判断成果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药克制(为阳性)、未克制(阴性)表达。与空白对照卡比较:白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性成果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性成果。对阳性成果的样品可用其他措施进一步拟定详细农药物种和含量。2、样品检测成果统计并对检测成果进行评价。10/10/2023阐明10/10/2023知识扩展110/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/2023项目二农药残留迅速检测第二法:酶克制率分光光度法10/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/202310/10/2023项目二农药残留迅速检测10/10/2023开机:插上电源,打开仪器背面绿色电源开关,仪器显示开机画面,按画面提醒操作,按下回车键,仪器开始自检,时间约1min自检完毕后,仪器进入待机检测状态项目二农药残留迅速检测2、试剂配制2.1、缓冲液:取1包缓冲剂加入500mL蒸馏水或纯净水中,搅拌溶解制成磷酸缓冲液(pH7.6),常温保存。2.2、显色剂:取1瓶显色剂加25mL缓冲液溶解,使用时取100μL,4℃冰箱保存。2.3、底物:取1瓶底物加12.5mL蒸馏水或纯净水溶解,使用时取100μL,4℃冰箱保存;或取1瓶底物加2.5mL蒸馏水或纯净水溶解,使用时取20μL,4℃冰箱保存。2.4、胆碱酯酶:酶制剂无需配制,可直接取用,使用时取100μL,4℃冰箱保存。10/10/2023项目二农药残留迅速检测10/10/20233、样品提取取2g果蔬样品(块茎类取4g),叶菜剪成25px左右见方的碎片,块茎类取横截面样品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10mL缓冲液,振荡1~2min,倒出提取液,静置2min,待测项目二农药残留迅速检测4、测试1)对照测试:2.5mL缓冲液——加入100μL酶液——显色剂——混匀,静置10min——加入100μL(或20μL)底物——摇匀,立即倒入比色杯中。及时放入仪器的测量室第1通道,合上盖。按〈B〉键,显示屏下方延迟10s后,测量时间开始倒计时,计时完毕,显示屏显示吸光度增量(ΔC)及克制率。在进行对照测试时,2~8通道可同步进行样品测试。10/10/2023项目二农药残留迅速检测4、测试2)样品测试:2.5mL待测液——加入100μL酶液和显色剂,混匀——静置10min——加入100μL(或20μL)底物,摇匀并
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