念珠菌性包皮龟头炎致病菌种鉴定及药敏试验

念珠菌性包皮龟头炎致病菌种鉴定及药敏试验

近年来，念珠菌性皮肤感染患者的数量有所增加。为了解引起男性念珠菌性包皮龟头炎的致病菌种及临床耐药情况,笔者对从包皮龟头炎患者分离的93株念珠菌进行菌种鉴定,并用ROSCO纸片扩散法检测念珠菌对6种常见抗真菌药物的敏感性,结果报告如下。1材料和方法1.1麻黄病毒传播模式380例包皮龟头炎患者均来自2005年3月~2006年10月本院性病科门诊。病例纳入标准:①患者有不同程度的龟头及包皮红斑、丘疹、分泌物、糜烂等,伴或不伴瘙痒症状。②包皮龟头患处取材直接镜检见假菌丝和(或)芽生孢子。③近半个月局部和系统未使用过抗真菌药物。培养出念珠菌的93例患者年龄18~56岁,平均36.5岁,病程2天~4个月,平均28.5天。已婚53例,未婚40例,合并有包皮过长62例。1.2标本及其接种培养科玛嘉真菌用蘸有生理盐水的无菌棉签反复转动擦拭龟头和包皮的炎症部位,所得标本立即闭管送检并接种科玛嘉念珠菌显色培养基;同时取材直接涂片,用10%氢氧化钾溶液悬滴镜检,高倍镜下发现有假菌丝和(或)芽生孢子时,认定为致病性念珠菌。1.3改良沙氏平板培养基、ybc鉴定卡科玛嘉念珠菌显色培养基购自郑州博赛生物技术研究所;改良沙氏平板培养基、YBC鉴定卡均为法国梅里埃公司产品;酵母样真菌药敏纸片及改良SHADOMY琼脂均来自丹麦ROSCO公司。1.4标准物质控制菌株采用丹麦ROSCO公司提供的白念珠菌ATCC64548和白念珠菌ATCC64550。1.5细菌分离和鉴定白念珠菌通过科玛嘉念珠菌显色培养基鉴定(根据生长菌落在显色培养基上呈绿色为白念珠菌),其他念珠菌通过转种改良沙氏平板培养基并纯化分离成单个菌落后接种YBC鉴定卡,由VITEK32全自动细菌鉴定药敏分析仪(法国梅里埃公司)鉴定。1.6真菌病毒药敏感性检测使用丹麦ROSCO公司生产的抗真菌药敏纸片(每种纸片所含药物浓度分别为:特比萘芬30μg/mL、伊曲康唑8μg/mL、氟康唑15μg/mL、制霉菌素50μg/mL、咪康唑10μg/mL和酮康唑15μg/mL)及改良SHADOMY琼脂检测念珠菌对以上6种常见抗真菌药的敏感性。按试剂说明书进行操作,药物敏感性判断标准参考ROSCO公司提供的药敏试验标准。2结果2.1真菌病毒株84e380例患者共培养出93株念珠菌(24.47%),分离出白念珠菌81株(87.10%);非白念珠菌12株(12.90%),其中近平滑念珠菌7株(7.53%),光滑念珠菌3株(3.22%),热带念珠菌、无名念珠菌各1株(1.08%)。2.2白真菌对药物的耐药93株念珠菌对制霉菌素、酮康唑及氟康唑均有较高的敏感性,分别为100%,95.70%,92.47%。81株白念珠菌对制霉菌素、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、特比萘芬耐药菌株数分别为0,1,3,22,12,46株;12株非白念珠菌对制霉菌素、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、特比萘芬耐药菌株数分别为0,0,1,1,2,1株。见表1。3抗菌药物的选择男性包皮龟头炎为临床上的常见病、多发病,念珠菌感染是最常见的病因。近年来,随着广谱抗生素的广泛应用,由念珠菌引起的包皮龟头炎有逐渐增多的趋势,国外报道约占所有包皮龟头炎患者的1/3。本文检测380例包皮龟头炎患者,念珠菌检出率为24.47%,高于李军等报道的17.78%,但比上述国外报道得低,可能是由于入选病例严重程度存在差异以及与患者就诊前局部或系统应用过抗真菌药物有关。同时笔者对93株菌株进行鉴定,结果白念珠菌占87.10%(81/93),非白念珠菌占12.90%(12/93),与苏建英等报道基本一致,表明白念珠菌是念珠菌性包皮龟头炎的主要致病菌种,非白念珠菌以近平滑念珠菌和光滑念珠菌为主,分别占7.53%和3.22%。随着酵母样真菌感染的逐年增加,抗真菌药物广泛地用于临床,导致真菌耐药性出现,给临床治疗带来困难,因此,开展真菌的体外药敏试验,指导临床合理用药十分重要。笔者发现,在被检测的致病菌株中,所有菌株对制霉菌素均敏感;酮康唑和氟康唑的敏感率较高,分别为95.70%和92.47%,耐药率分别为1.08%和4.30%;伊曲康唑和咪康唑的敏感率分别为67.74%和56.99%,耐药率分别为24.73%和15.05%;特比萘芬的敏感率为45.16%,耐药率较高,为50.54%。表明制霉菌素是治疗念珠菌性包皮龟头炎最