细菌性食物中毒中Vitek-AMS的应用

常州疾控杜强此处插入贵公司的徽标细菌性食物中毒中Vitek-AMS的应用

概述近年来，随着计算机技术的不断发展，对病原微生物的鉴定技术也朝着微量化、系列化、自动化的方向深入发展，从而开辟了微生物检测与鉴定的新领域。其中最有代表性的就是Vitek-AMS（全自动微生物分析系统）。举例联系实际工作情况，对我们微生物检验人员来说，处理突发性食物中毒，首要的检测要求就是①快速②准确。而Vitek-AMS最突出的优点，正是以上两项。以我们常州地区食物中毒中比较常见的副溶血性弧菌来说，从以下的流程中就可以看到，仪器法相较采用手工方式，要省时省力得多。比较手工法：样品增菌（24h）------平板分离（24h）------接种含盐克氏双糖（24h）------盐浓度曲线（24h）------各项生化反应（其中VP、MR需48h）------结果判定（共计144h）

仪器法：样品增菌（24h）------平板分离（24h）------上机鉴定（8h）------自动结果判定（共计56h）可信度在准确性上，作为经美国FDA和AOAC国际认证认可的检测系统，Vitek-AMS（全自动微生物分析系统）的可信度还是比较高的。它已经成为很多国家细菌鉴定的最终设备。上海市疾控曾于2000年对Vitek-AMS系统做过试验以对其准确性作验证。细节结果如下：Vitek-AMS系统和手工方法的鉴定结果比较：平均总符合率为91.5%(193/211),革兰氏阴性菌符合率为93.5%(159/170)，其中，肠杆菌科为95.6%(109/114)，弧菌科为88.1%(32/36)，非发酵菌属为90%(18/20)，革兰氏阳性菌符合率为83%(34/41)，其中，葡萄球菌属为95.2%(20/21)，链球菌属为66.7%(12/18)，李斯特氏菌为100%(2/2)。标准菌株Vitek-AMS系统测定标准菌株：对金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，化脓性链球菌，产单核细胞李斯特氏菌，埃希氏大肠菌，绿脓假单胞菌，伤寒杆菌，普通变形杆菌，副溶血性弧菌，弗劳地枸椽酸盐杆菌等10株ATCC及WHO质控菌株采用AMS法测定，结果正确率100%。

未知菌株Vitek-AMS系统对未知菌株的鉴定：对外来的46株未知菌株，鉴定结果GNI卡鉴定率94%(32/34)（现在使用经过改进的GNI+卡，鉴定率可达到96％以上），GPI卡鉴定率75%(9/12)。

结论由以上结果可以看出，Vitek-AMS（全自动微生物分析系统）的准确性还是相当值得信任的。下面，我们首先对Vitek-AMS（全自动微生物分析系统）作一个简单的介绍。（一）历史

由于计算机应用的广泛开展也大大促进了微生物自动化的实现。自70年代开始即有多种微生物自动鉴定系统问世，如Automicrobic(AMS),ABBott(MS-2)和AUTOBAC（IDX），但Vitek-AMS一直是世界上应用最为广泛，自动化程度最高，功能齐全的鉴定系统。起源Vitek-AMS（全自动微生物分析系统）始于1960年，由美国航天系统的麦克唐纳道格拉斯公司为了鉴定宇宙环境中的微生物而研制，于1973年正式应用于临床微生物鉴定。1990年该系统所属公司由道格拉斯转卖给法国生物梅里埃集团。本系统具有先进的电脑系统，广泛的鉴定功能，可适用于临床微生物，卫生防疫，商检系统。功能范围包括细菌，厌氧菌，真菌鉴定及细菌药物敏感试验及最低抑菌浓度（MIC）测定。（二）工作原理：

系统采用数码分类法鉴定原理每个用于鉴定的试卡内有30项生化反应，每3个生化反应组为一组，第1号生化反应阳性值为“4”，第2号为“2”，第3号为“1”，如3个生化反应全部为阳性，其组值为“7”，第1，4生化反应阳性，组值为“5”，依次类推，30项生化反应可得到10位数的生物数码，还有某些试卡需要外另加补充试验，共可获得11位数生物数码。系统定时测定试卡每一生化反应孔透光度，当生长对照孔透光度到终点阈值，指示该卡已完成，系统以此时各孔应值作为判断依据组成生物数码并与数据库中已知分类单位相比较，获得相似系数鉴定值，并自动打印出实验室报告。

（三）主要结构及使用

Vitek-AMS（全自动微生物分析系统）全貌见下图：（型号：Vitek120--bioLIASONCC4）Vitek-AMS的型号区别主要是读数器/孵箱内卡片架的数量，其它基本结构还是相同的，都是由①充填机/封口机②读取器/孵箱③电脑主机、电源和打印机以及④测试卡组成。充填机/封口机三分钟内把样本注入测试卡中及封口；读取器/孵箱自动恒定培养温度并同时读取卡内生化反应变化（系统依据不同型号，容纳60至480张卡不等），电脑主机负责分析资料的储存、系统的操作及分析程式的运作。现在，我们来详细介绍一下它的结构使用情况。

充填机/封口机①充填机/封口机

操作时，将已制备好的规定浓度的菌悬液试管和试卡用一弯形塑料管相连并置于充液接种仓中。当按下FILL按纽时，仓内开始形成真空，负压将菌液从试管内通过塑料管压入试卡，完成接种。封口机现在很多型号都被节省了，直接采用手工方式封口，从试卡入口处塞入特制塑料塞后拧断。

读取器/孵箱

②读取器/孵箱

读数器是665nm波长的光扫描器。孵箱内有一直立圆形转盘，每隔90°置一卡片架，每个孵箱共可放4个卡片架，分别用A，B，C，D标记。每一卡片可放8张试卡。孵箱直接由电脑控制，每15min旋转90°，分别为A，B，C，D各试卡读数，在任何一个卡片上的试卡每一小时可读数一次。电脑主机、电源和打印机③电脑主机、电源和打印机

包括电脑，显示器和键盘，以及打印机和电源稳压器，UPS。主机在开机后，始终保持着与读取器/孵箱和打印机的联系，控制孵箱温度，自动定时读数，收集记录，储存和分析资料，当卡片完成时，电脑可指示打印机自动打印报告。使用者可随时从中查询试卡检测情况。配有IMS装置的电脑还具有数据统计功能。可以说，电脑是整个系统的大脑。

测试卡⑤测试卡测试卡是本系统工作的基础，是一种多孔的聚苯乙烯卡片，含有干燥的抗菌药物和生化基质，用后可弃去。VITEK测试卡构造如下图所示。各种不同的测试卡具有不同的功能。常见的种类有以下几种。①革兰氏阴性菌鉴定测试（GNI+）以及药敏试验（GNS）(可鉴定肠杆科、弧菌科和非发酵菌等116种以上)②革兰氏阳性菌鉴定测试（GPI）以及药敏试验（GNS）(可鉴定凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌、肠球菌、草绿色和β溶血链球菌、棒状杆菌属以及李斯特氏菌属和丹毒丝菌等51种以上)③非发酵杆菌鉴定测试（NFC）(可鉴定不动杆菌、气单胞菌、产碱杆菌、假单胞菌、弧菌等42种以上)④酵母菌鉴定测试（YBC）(可鉴定假丝酵母《念珠菌》、隐球菌、地霉、丝孢酵母、红酵母