《分解纤维素的微生物的分离》同步课件

课题3分解纤维素的微生物的分离课程标准1.研究培养基对微生物的选择作用。2.探讨微生物的利用。课标解读1.简述纤维素酶的组成及作用。2.掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

纤维素分解菌的筛选

复合

C1酶

Cx酶

葡萄糖苷酶

C1酶、Cx酶

葡萄糖苷酶

2．纤维素分解菌的筛选

(1)筛选方法：

法。

(2)筛选原理：刚果红可以与纤维素形成

，当纤维素被

分解后，刚果红——纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现

，我们可以通过

来筛选纤维素分解菌。刚果红染色红色复合物纤维素酶以纤维素分解菌为中心的透明圈是否产生透明圈[思维激活1]

纤维素分解菌的选择培养基中“选择因子”是什么？提示纤维素分解菌中唯一的碳源是“纤维素粉”，唯有能利用纤维素的微生物方可在该培养基上生存，其他微生物将因缺乏碳源而无法生存，以此，可筛选到纤维素分解菌。1．纤维素分解菌的筛选原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。2．筛选过程中涉及的两种培养基

(1)纤维素分解菌的选择培养基

①配方：组分含量/g提供的主要营养纤维素粉5

碳源、能源NaNO31

无机盐Na2HPO4·7H2O1.2KH2PO40.9MgSO4·7H2O0.5KCl0.5酵母膏0.5生长因子、碳源、氮源水解酪素0.5氮源、生长因子将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL②该培养基为液体培养基，利用液体选择培养基可增加纤维素分解菌的浓度。(2)鉴别纤维素分解菌的培养基①配方：组分含量提供的主要营养CMC－Na5～10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐琼脂15g凝固剂土豆汁100mL碳源将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL②此培养基为固体培养基——在其中加入刚果红可形成以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可筛选到纤维素分解菌。【巩固1】

分析下面培养基的配方，请回答下面的问题。 纤维素分解菌的选择培养基： 纤维素粉 5g NaNO3 1g Na2HPO4·7H2O 1.2g KH2PO4 0.9g MgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5g 酵母膏 0.5g 水解酪素 0.5g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。(1)此培养基配方中为微生物提供碳源和氮源的分别是______、______。(2)此配方为______培养基(根据物理状态)。(3)此培养基选择出的微生物主要是_________________________。解析该培养基的唯一碳源是纤维素粉，氮源有NaNO3、酵母膏。因没有凝固剂成分，因此，该培养基从物理状态上看属于液体培养基。因该培养基仅以纤维素粉为唯一碳源，因此，可用于选择培养纤维素分解菌。答案(1)纤维素粉NaNO3、酵母膏(2)液体(3)纤维素分解菌1．分离纤维素分解菌的实验设计

(1)实验流程：土壤取样→

(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别

的培养基上→挑选产生

的菌落。

(2)土壤取样 采集土样时，可以选择

的环境。分离土壤中纤维素分解菌实验操作

选择培养纤维素分解菌透明圈纤维素丰富(3)选择培养①目的：增加纤维素分解菌的

，确保能够从样品中分离到所需要的

。②选择培养：称取土样20g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在

上，在一定温度下振荡培养1～2d，直至培养液变

。也可重复选择培养。浓度微生物摇床混浊③挑选菌落a．刚果红染色法，挑选

的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。b．常用的刚果红染色法包括两种，一种是先

，再加入

进行

反应，另一种是在

时就加入刚果红。产生透明圈培养微生物刚果红颜色倒平板2．课题延伸

(1)为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要进行

的实验，纤维素酶的发酵方法有

和

两种。

(2)纤维素酶的测定方法 一般采用

。发酵产纤维素酶液体发酵固体发酵对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定[思维激活2]

由“选择培养”实验操作过程请你推测纤维素分解菌的异化类型是需氧型还是厌氧型？提示由选择培养操作中“将锥形瓶置于摇床上”可推测纤维素分解菌的异化类型为需氧型。1．土壤中纤维素分解菌的分离流程2．两种刚果红染色法比较优点显示出颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作简便，不存在菌落混杂问题缺点操作繁琐，加入刚果红会使菌落之间发生混杂①由于琼脂、土豆汁中均含有淀粉类物质，可能使产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，即假阳性反应；②有些微生物具有降解色素的能力，它们会降解刚果红形成透明圈，与纤维素分解菌不易区分特别提醒(1)本实验方案中应设置普通培养基(或牛肉膏蛋白胨培养基)作为对照实验。(2)分离纤维素分解菌先经选择培养，其目的是增加纤维素分解菌的浓度；然后经梯度稀释后，再涂布到鉴别培养基上。【巩固2】

下列关于分离纤维素分解菌实验的叙述，错误的是(

)。

A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

B．选择培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少

C．经稀释培养后，用刚果红染色

D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上 解析经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；选择培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色；设置对照能证明经选择培养的确得到了欲分离的微生物。 答案A【例1】微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是(

)。

A．C1酶和Cx酶 B．C1酶和葡萄糖苷酶

C．Cx酶和葡萄糖苷酶 D．C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶 深度剖析纤维素酶包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，能将纤维素分解为纤维二糖的是C1酶和Cx酶。 答案A纤维素和纤维素酶

[查漏补缺](1)纤维素、纤维素酶、控制纤维素酶合成的基因，其基本单位依次为：葡萄糖、氨基酸、脱氧核苷酸。(2)纤维素酶是复合酶，它并非一种单一酶。【例2】

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品。纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程。 土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。土壤中纤维素分解菌的分离与检测

结合所学知识回答下列问题。(1)最好选择怎样的环境采集土样？___________________________________________________。(2)下面是一种培养基配方：纤维素粉5g、NaNO31g、Na2HPO4·7H2O1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4·7H2O0.5g、KCl0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到1000mL)。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是_______________________________________________________________________________________________。(3)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入______染液，将筛选获得的菌液稀释后用______的方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生______的菌落作为菌种进行扩大培养。(4)纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢？请设计实验进行检测。__________________________________________。深度剖析本题考查土壤中纤维素分解菌的分离与鉴定的相关知识。富含纤维素的土壤中，含有以纤维素为碳源的纤维素分解菌，且数量较多；题目中给出的培养基能够为产生纤维素酶的微生物提供碳源，不能分解纤维素的微生物由于缺乏碳源而不能正常生长繁殖，因此该培养基具有选择作用；纤维素量一定时，在一定范围内，纤维素酶产量与分解产生的葡萄糖量成正比。答案(1)纤维素丰富的土壤环境(2)培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长(3)刚果红涂布平板透明圈(4)向纤维素分解菌培养液中加入定量纤维素，定时测定葡萄糖产量的变化[归纳提升](1)经选择培养后，再经梯度稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。(2)富集培养可省略。(3)经稀释培养后，用刚果红染色。(4)设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。单击此处进入随堂达标检测旁栏思考题1．本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？解析本课题的选择培养可以提供目的微生物繁殖所需的条件，增加选择培养可以使实验的成功率更高。答案本实验流程与课题2的流程的区别如下：课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。2．为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？答案由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。3．将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？答案将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。4．想一想，这两种方法各有哪些优点与不足？你打算选用哪一种方法？解析两种方法各有优缺点，实践中可以根据需要选择不同的方法进行实验。答案方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。

但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。5．为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？解析这里的选择培养的实质是富集培养，也就是提供了目的微生物生长繁殖的条件。答案在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。练习1．略。(开放性题目，答案合理即可)2．提示土壤取样→选择培养(此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)→梯度稀释→将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上→挑选单菌落→发酵培养。

2017工作室个人年度总结_工作室个人总结我从XX年9月开始参加“小学音乐朱xx名师工作室”，学习至今已有一学期的时间，能拥有这个机会实属幸运。既然朱老师将这意外的学习机会给了我，当时我便暗自下定决心一定要好好学习，尽快提升自己。然而经过这一学期的工作室学习，我的收获远远超过了我最初的期望。我不仅学到了丰富的知识，专业理论上得到更多地发展充实，而且工作上增强了自信心。我从心底里感谢朱老师和工作室的所有成员，我们在朱老师的引领下，互相帮助，互相探讨，互相促进，共同提高。回顾一学期工作仍历历在目，现总结如下：一、更新教育理念、提高教学素养在工作室成立后，我们作了个人基本情况简介，朱老师为我们选了具有针对性、实效性有关教育教学理论方面与专业理论知识方面书籍，让我们不断加强理论学习。同时我在完成教学工作后，更多时间进行广泛读书和学习阅读更多专业教学报刊杂志，从中获得最先进教学理念和最前沿信息。通过多次理论学习，我明白了以科研促教研重要性，更新了教学理念，提高了教学素养，同时也提升了自己教学水平。二、注重课堂实践，提升教学能力名师工作室的学习中我一直结合自己日常教学工作，时刻思考自己的教育教学工作，对照理论反思自己的教学观和教学行为。今年，我一共上了两节市级公开课，一节溧阳市小学音乐教师继续教育培训公开课《锣鼓歌》，一节工作室上的公开课《牧童之歌》，均受到听课老师的一致好评。另外，我还听了工作室领衔人和同行们上的一些公开课，课后大家的讨论积极热烈，各抒己见，真的是受益匪浅。三、收获与遗憾一学期以来在朱老师和学员老师的帮助指导下，我确实进步了不少。自己把名师工作室中学习到的内容不断应用于实践，取得了一些教学效果，学校的领导和老师听完我的课也深有感触。另外，我还积极撰写论文，并积极投稿发表，我所撰写的论文《注入新理念焕发新活力》于XX年x月份发表于《新课程》此外，今年我所辅导的学生市级比赛也多次获奖，如：校园短剧《自救自护我做主》获常州市二等奖，器乐比赛长笛独奏《天路》和古筝独奏《浏阳河》获xx市三等奖。然而，一学期的学习，也让我认识到，还有很多的问题是我以前没有思考过或是思考不深入还应进一步研究的；有很多东西是我以前忽略而现在发现是值得重视的；有很多领域是我以前望而却步但现在看来可以涉足的。我深知自己离真正的名师工作室的培养目标的距离还相差很远，自己身上还存在很多的不足。所以我决心要在今后的工作和学习中，努力做到“扎实勤奋学习，踏实求真工作，实事求是研究”。要在每天的学习和工作中精益求精，不断反思，挤时间阅读专业书籍，努力提高自身的工作能力和实践水平，才能不辜负导师和同事对我的信任。

XX.1.13年度成果：1.两节市级公开课《锣鼓歌》《牧童之歌》

2.校园短剧《自救自护我做主》获xx市二等奖3.学生器乐比赛长笛独奏《天路》获xx市三等奖4.学生器乐比赛古筝独奏《浏阳河》获xx市三等奖。延伸阅读：语文名师工作室个人年度总结报告后学晚进愚且（“强军之路”观后感:强军兴军,国之使命_看强军之路有感）鲁，工作室活动给我打开一个世界。一年多以来，我读的书主要是凭兴趣选择的历史著作和文学作品，工作室规定读《享受语文课堂》，使我发现教学专着的魅力。经过对这本理论和实际相结合的大家专着的仔细研读，并聆听黄老师亲口讲述，我初步了解了黄厚江系统、深刻的教学思想。随后便去图书馆借黄老师别的书，发现被人借走了，便借了余映潮的。尽管读得粗略，但觉得也是好书，其教学思想在某些方面和黄厚江也有相通之处。阅读经典，亲近大家，只要坚持，获益自当匪浅。听课、评课，将其他人的知识广度、思考深度、教学风格、综合魅力展现在我的眼前，使我感到自己的落后与闭塞。尽管我有个一向不受他人刺激的毛病，但卧虎藏龙、高手如林还是给我提供了正能量。尤其在年头听了蔡老师一节课，年尾听了黄老师一节课，使我发现语文教学大有可为，虽然达到那种举重若轻的境界很难，但虽不能至，心向往之。x月自己上了一次课，以为要上课外的文章，其实前几位都是在高三。但也好，没资料，只好自己看，自己想，自己设计了，最后的成果虽仍是爱因斯坦的小板凳，但是有进步的。另外，即使别人上课，每次活动前也要钻研文本、思考设计，听课后要发言、整理发言稿，这些和磨课、上课一样，都是要向内挖掘自己的世界，也让我看到自己的不足。两点改变一年的工作室活动，带给我的变化主要有两个。一是坦然的教学心态。从教早期懵然无知，以无所谓的态度对待教学；多年以后进入焦虑期，觉得一无所知，一无所长，一无所成，一无是处，想改变却又无处着手，裹足不前徒惕息，以手抚膺坐长叹。现在，我的心态已坦然，面对开学不再焦躁、恐惧，反有些许期待我不知道参加工作室是否就是全部的原因，但确是重要因素。焦虑不能导致改变，行动才能化解焦虑。我知道我在行动，我在改变。一线曙光刺破沉沉暗夜，万丈坚冰滴滴消融。尽管还没有汇成涓涓细流，滔滔大河更是遥不可及；但人最重要的是渴望而又坦然的心态，无欲无求、自满自得和急于求成、希冀完美都是人生的大敌。二是钻研的工作方式。平时备课基本抛开原有的备课本，抛开资料，自己去想。当然这样也有弊端，但总比被牵着走好；当然所花的功夫还少，教后反思尤少，谓之钻研徒惹人笑，但好歹有了些钻研的样子；当然想出的好点子极少，课堂效果也未见得有多少改善，但我知道走在一条正确的路上。这种改变和工作室的活动方式──品读专着、钻研文本、磨课、听课、研讨、写活动感想──有很大的关系。几点不足一是专业阅读少。语文有知识，语文学习有方法，语文教学有门道，语文知识、学习策略、教学方法自己掌握得很不够，遑论知识转化为能力。过去的一年，在这些方面的阅读太少，虽几次决心看点教学论文，但总难坚持。20xx年，当有改变。二是深入思考少。不论是阅读时的思考，备课、课后的思考，还是工作室每次活动前后的思考，都不是很积极。所以一年也拿不出几篇阅读笔记、教学案例、论文，博客上传的东西不多。总以读得不多、水平不高作为写不出东西的理由，其实写不出是因为不写，不写是因为没有专心、深入地思考。若能经常思考，点滴记录，多少总能有心得。读得少，想得少，所以水平不高，包括阅读能力、教学设计能力和课堂实施教学的能力。真正提高能力，并在此基础上，结合学生实际，使课堂教学真正发生变化，还有很长的路要走。由三十奔向四十的人生旅途中，身体渐渐衰朽，头脑当渐渐充实起来。虽不能闻鸡起舞，大步流星赶日月，却也要朝夕闻道，小步快走不停歇。这是一种工作态度，更是一种人生态度。阅读拓展：化学名师工作室个人年度总结报告20xx年，我有幸成为***名师工作室成员之一，通过参与工作室开展的活动，获得了更多的向他人学习的机会。在曹老师的悉心指导下，以及和各位工作室同仁的交流切磋中，促使自己的教学水平进一步提高。现将一年来名师工作室的学习心得总结如下：一、导师示范，在感悟中寻找提升一年以来，多次聆听了工作室领衔人***老师的示范课。从《物质的分离提纯》到《含氯化合物的应用（高三复习课）》，再到《有机物组成和结构的研究》。目睹了曹老师的整个备课过程，让我知道，在每一堂精彩的课的背后，是大量时间的倾注与心血的付出，资料搜索、实验改进、撰写教案，每个环节都一一揣摩。她的这种对专业的钻研与探究精神令我