DB34-T 3737-2020 大豆品种耐旱性与耐热性评价体系技术规程

CCS

15

34

DB

373大豆规程

of

tion

Syste

ught

rance

Soy

2020-1

2020-

理局

DB34/T

2020前 言本文件按照

GB/T

1.1—2020《标准化工作导则

第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定DB34/T

2020大豆品种耐旱性与耐热性评价体系技术规程

本文件规定了大豆品种耐旱性与耐热性评价体系构建过程中的干旱胁迫和热胁迫处理条件、处理

GB

GB

4404.2粮食作物种子

GB/T

3.1土壤中可利用水的缺乏，使植物根系呼吸困难，引起植物的生理、形态、生化和分子性状的变化，3.2

GB

25

29

每盆装土和沙

kg～9

1％次氯酸钠浸泡大豆种子

穴盘中萌发

DB34/T

2020

～20.0

10:00

至下午

16:00

连续

天塑料大棚覆膜进行热（高温）处理，通过温湿度记录仪（RC-4HC,

Elitech）实时监测棚内温度，高温设定范围为

采集胁迫处理与对照植株上部第

A）。

采集胁迫处理与对照植株上部第

3、4

利用氯化硝基四氮唑蓝（NBT）光化还原法检测分析（参见附录C）。

利用邻甲氧基苯酚（愈创木酚）显色法检测分析（参见附录D）。

利用紫外吸收法检测分析（参见附录E）。

10

DB34/T

2020

2

进行大豆品种耐旱性与耐热性鉴定期间，要及时防治病、虫、草和鸟害，防止倒伏等不利情况

GB/T

分析（SPSS

值（D）按公式（1）计

Xi

1,

2,

3,

（xi）

min)

ax-

D

U

(xi)

X

max

X

min

——

i

Wi

——

Pi

——

基于

1。

大豆

以花粉活力作标，结合相关酶活性和产量理指标，进行

析（SPSS

时运用隶属函数值对各主成分得分值进行标准化，从而获得一个大豆响

0.5

DB34/T

3732020（H），根

19.0）。

2）计算：

Xi

Wi

1,

2,

3,

（xi）

n)

max-

H

U

(xi)

——

X

max

X

min

i

Wi

Pi

2。

DB34/T

2020将处理组和对照组叶片用去离子水冲洗

次，再用洁净滤纸吸净表面水分。用

mm

mm

孔器避开主脉打取叶圆片（或切割成大小一致的叶块），每组叶片打取叶圆片

30

片，分装在

支洁净的刻度试管中，每管放

10

片。在有叶片的各管中加入

10

mL

的去离子水，并将大于试管口径的塑料纱网放入试管距离液面

cm

真空泵抽气

10

min（也可直接将叶圆片放入注射器内，吸取而的去离子水，堵住注射器口进行抽气）上试管置室温下保持

h，其间要多次摇动试管，或者将试管放在振荡器中振荡

h。1

1

10

以杀死植物组织。取出试管后用自来水冷却至室温，并在室温下平衡

10

min，摇匀，用电导仪测其终2 100%

RC

——

1

——

2

——

DB34/T

2020 首先对胁迫处理后与对照样本叶片称鲜重（叶片鲜重

FW），之后将其放入盛水的培养皿中（水量占培养皿

2/3），浸泡

24

后用吸水纸将其叶面水擦干，称其饱和鲜重（SFW），FW

SFW

均在室

30

80℃

FW SFW 100%RWC

——

FW

——

SFW

——

DW

——

DB34/T

2020 按每克（叶片鲜重

FW）大豆新鲜叶片加入

mL

0.05

mol/L

pH

7.8

磷酸钠缓冲液，加入少量石英砂，于冰浴中的研钵内研磨成匀浆，定容至

mL

8500

30

min，上清液即为

SOD

酶粗提液。每个处理取

个洗净干燥好的微烧杯编号，按计算好的量加

4-8

号杯中磷酸钠缓冲液量和酶液量可根据试验材料

25℃。光强为

4500

Lux

20

15

560

nm

波长下以

号杯液调零，测定各杯液光密度并记录结果。以

2、3

号杯液光密度的平均值作为抑制

NBT

光还原率

100％，根据其他各杯液的光密度分别计算出不同酶液量的各反应系统中抑制NBT

光还原的相对百分率。以酶液用量为横坐标，以抑制

NBT

光还原相对百分率为纵坐标，作出二者

FW/h 1000 60 A

——

V

——

酶提取液总体积（mL）；B

——

W

——

t

——

1000

——

换算系数，即

ml

1000

uL；60

——

60

min。DB34/T

2020 取处理组与对照组大豆植株叶片

mL

冲液提取一次，合并两次上清液备用。取光径

cm

比色杯

mL（如酶活性过高可稀释），再加入反应混合液

mL，立即开启秒表记录时间：而向另一比色杯中加人

0.2mol/L

磷酸缓冲液（pH

6.0）作为零对照。用分光光度计在

470

nm

min

时的光密（）

eq

\o\ac(△,（)470nmT

）（0.01×V1）P

min））；eq

\o\ac(△,A)470nm

VT

——

粗酶提取液总体积（mL）；V1

——

测定用粗酶液体积（mL）；FW

——

0.01

——

A470nm

每下降

0.01

t

——

DB34/T

2020 化氢酶（CA处理组与对照组植株

2.5

g（

FW）加入

7.8

量，研磨成匀

25

mL

用该缓冲液冲洗研钵，并将冲洗液转入容量瓶中，用同一缓冲液定容，4000

，其中

12

0

7.8

.0

ml

22

，并迅速倒入石英比色杯中，240

吸光度，每

min