免疫学实验胶体金免疫层析技术课件

2021/10/10星期日1胶体金免疫层析技术（colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA）

2021/10/10星期日220世纪80-90年代在酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、胶体金免疫技术和新材料技术基础上发展了新型体外诊断技术——胶体金免疫层析技术（colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA）。

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GICA是一种新型检测方法，具有简单快速、结果清晰，可通过肉眼判定结果、无需复杂操作技巧和特殊设备、灵敏度高、无污染、携带方便等优点。己成为临床快速诊断领域发展的一个新方向，在发达国家己得到广泛应用。疾病的快速诊断及药物残留分析2021/10/10星期日4类别应用领域检测的物质人类医学各级医院,血站,CDC,防疫站,诊断中心；家庭自检；商检系统；边检口岸；公安系统.传染病（乙肝五项,HIV,SARS等）标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等）女性妊娠hCG(早孕)毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）农牧业畜牧兽医站,商检系统,边检口岸,农牧类院系和研究所传染病（禽流感,链球菌等）病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）环境环保监测部门,研究机构有害物质超标食品安全食品安全检测中心,各监管部门农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素2021/10/10星期日5

胶体金（colloidalgold）也称金溶胶（goldsol），是金盐被还原成原子金后形成的金颗粒悬液。胶体金2021/10/10星期日6zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥，以维持胶体金的稳定状态。

基础金核双离子内层负离子（AuC12－）zeta电位外层离子层H+分散在胶体间的溶液中2021/10/10星期日7

胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功能，而不被坏其生物活性，可以与蛋白质等（葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白）等非共价结合，形成胶体金标记物。2021/10/10星期日8衬板样品垫金标垫吸收垫膜胶体金免疫层析试纸条的构成2021/10/10星期日9胶体金免疫层析试纸条类型：2021/10/10星期日102021/10/10星期日11夹心法反应原理C阴性B阳性GICA有三种反应模式：夹心法，间接法，竞争抑制法。2021/10/10星期日12间接法反应原理C阴性B阳性2021/10/10星期日13阴性弱阳性阳性竞争抑制法反应原理检测线颜色强度与SD浓度负相关2021/10/10星期日14目的：掌握间接试纸卡的检测原理，操作方法及结果判定方法2021/10/10星期日151、禽流感H9亚型抗原检测试纸卡2、禽流感抗体检测试纸卡3、磺胺嘧啶残留检测试纸卡4、禽流感H9亚型病毒阳性对照5、禽流感H9亚型病毒阴性对照6、禽流感抗体阳性对照7、磺胺嘧啶残留阳性对照8、磺胺嘧啶残留阴性对照实验材料：2021/10/10星期日161、加被检样品：100ul/孔，阳性、阴性对照。2、5min后观察结果。实验步骤：2021/10/10星期日17结果判定：1、禽流感H9亚型抗原检测试纸卡：两条红线，阳性；一条红线，阴性；无红线，试纸失效。2、禽流感抗体检测试纸卡：两条红线，阳性；一条红线，阴性；无红线，试纸失