遗传学医用专业知识专家讲座

第八章

肿瘤遗传学

Cancer（Tumor）Genetics1遗传学医用专业知识专家讲座第1页本章重点内容提醒染色体不稳定综合征类型Ph染色体和14q+染色体形成机制及意义癌基因概念、功效分类、激活机制抑癌基因及研究路径二次突变学说肿瘤发生多阶段过程（以结肠癌为例）2遗传学医用专业知识专家讲座第2页第一节环境原因与肿瘤发生第二节肿瘤发生遗传原因第三节遗传性肿瘤第四节遗传性癌前病变第五节染色体异常与肿瘤第六节染色体不稳定综合征与肿瘤发生第七节癌基因和抑癌基因第八节癌发生多阶段学说主要内容3遗传学医用专业知识专家讲座第3页肿瘤：一群生长失去正常调控细胞形成新赘生物（neoplasm）。85%为癌(carcinoma)2%为肉瘤(sarcoma)5%为淋巴瘤(lymphoma)3%为白血病(leukemia)肿瘤遗传学（CancerGenetics)应用遗传学基本原理、方法，从遗传方式、遗传流行病学、细胞遗传和分子遗传学等不一样角度探讨肿瘤发生与遗传关系,肿瘤防治新路径，进而开辟一门多学科渗透新兴学科。

4遗传学医用专业知识专家讲座第4页癌发生于一个细胞（恶变）克隆。——癌起源于单细胞恶变癌有家族性和散发性。——发生在生殖细胞突变是可遗传肿瘤发生多原因、多基因、多阶段、多路径几个观点5遗传学医用专业知识专家讲座第5页癌发生包括多个基因改变。细胞水平——癌是体细胞遗传病基因水平——癌是多基因病癌发生与常见复杂性疾病一样，也是由遗传原因（基因改变）和环境相互作用结果——癌是多原因病癌遗传事件不是单一而是多路径如DNA甲基化。——癌是多路径机制癌发生经历基因屡次突变累积，其发展是一个多阶段过程。——癌是多阶段——早发觉、早治疗、早预防6遗传学医用专业知识专家讲座第6页第一节环境原因与肿瘤发生化学致癌物射线病毒烟草和酒精等7遗传学医用专业知识专家讲座第7页一、化学致癌物是80-90%人类肿瘤形成病因。大量动物试验证实：肿瘤发生需要两个主要阶段，即始动阶段和促进阶段。当细胞暴露于一定量始动剂可能癌变时，标志始动阶段开始。始动阶段通常是快速，且不可逆转。促进阶段特点是肿瘤细胞（始动细胞）永生化和克隆化。另外，促进阶段原因（促进剂）不直接影响DNA，故对细胞影响是可逆。8遗传学医用专业知识专家讲座第8页（一）始动阶段肿瘤始动阶段致癌物是一系列天然或人工合成化合物，分为直接作用和间接作用化合物或致癌物前体。前者本身为致癌物，后者经过体内代谢最终转变为致癌物。9遗传学医用专业知识专家讲座第9页

在致癌物前体中主要一类酶是细胞色素P-450依赖性单氧化酶同工酶，在群体中，酶活性和诱导性变异较大。比如，其中一个同功酶CYP1A1负责多环芳香类碳水化合物代谢。群体中10%个体拥有这种高度诱导形式酶，所以，编码这些酶基因含有多态性，影响人群对某一致癌物易感性。其中，吸烟者患肺癌风险较高与此基因变异相关。10遗传学医用专业知识专家讲座第10页（二）促进阶段

当经历始动阶段细胞暴露于促进剂时，遗传损伤细胞数将增加。伴随连续分裂，这些含有遗传突变细胞将面临着选择。所以，促进阶段包括癌前病变细胞增殖、恶性转化及肿瘤进展等。11遗传学医用专业知识专家讲座第11页促进剂不致突变，是经过诱导细胞增殖机制而起到促进肿瘤作用。如蛋白激酶C是磷酸肌醇信号传导通路复合物，正常情况下受控于第二信使乙酰甘油，TPA（纤维蛋白酶原激动子）激活蛋白激酶C，活化蛋白激酶C引发靶蛋白磷酸化，最终刺激细胞增殖。12遗传学医用专业知识专家讲座第12页二、辐射

辐射能量，如紫外线或电离辐射，在体外使细胞转化，在体内诱发肿瘤。辐射起致突变作用，经过造成DNA损伤而引发细胞恶性转化。

13遗传学医用专业知识专家讲座第13页

紫外线有三种波长：UVA（320-400nm），UVB（280-320nm）和UVC（200-280nm）。UVB易被DNA碱基吸收，引发DNA碱基改变，所以，被认为与皮肤癌发生相关。14遗传学医用专业知识专家讲座第14页

电离辐射包含电磁辐射（X-线和γ线）和特殊辐射（α-粒子、β-粒子、原子和中子）。自然环境一部分，含有致癌性。电离辐射是广泛致癌物，能够诱导几乎任何年纪、任何物种任何组织癌变。与紫外辐射不一样，单独置于电磁辐射足以形成肿瘤。

15遗传学医用专业知识专家讲座第15页三、病毒

现已发觉大量与人类肿瘤相关DNA和RNA病毒。这些病毒是经过整合到宿主细胞DNA而发挥作用。对DNA肿瘤病毒而言，癌基因是病毒基因组整合部分，对RNA肿瘤病毒而言，癌基因为病毒供体，即病毒RNA经逆转录变为前病毒，再整合到宿主基因组。

16遗传学医用专业知识专家讲座第16页常见DNA肿瘤病毒：EBV、乳头瘤病毒（HPV）和乙肝病毒。常见RNA病毒：人类T细胞白血病病毒和人类免疫缺点病毒。EBV主要与Burkitt淋巴瘤和鼻咽癌发生相关。98%非洲人Burkitt淋巴瘤有EBV感染史。100%鼻咽癌有EBVDNA。免疫缺点病毒能够引发艾滋病和肿瘤在内各种疾病。17遗传学医用专业知识专家讲座第17页18遗传学医用专业知识专家讲座第18页一.癌家族（Cancerfamily）一些癌症含有家族性聚集倾向，表现为一个家系几代人多个组员、同一/不一样器官恶性肿瘤

许多常见肿瘤如乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌等发生，一级亲属再发风险高于普通群体3－10倍。如：Lynch癌家族综合征Li-Fraumeni综合征第二节肿瘤发生遗传原因19遗传学医用专业知识专家讲座第19页Lynch癌家族综合征特点：1.肿瘤发生率高；2.某种肿瘤（腺癌、肉瘤）发病率高；3.肿瘤有多发性（部位）；4.发病年纪早；5.符合常染色体显性遗传特点。20遗传学医用专业知识专家讲座第20页Li-Fraumeni综合征（LFS）是以乳腺癌为主癌家族综合征，呈AD，还患有脑瘤，骨肉瘤，横纹肌肉瘤，白血病，肺癌，结肠癌，肾上腺皮质癌等。21遗传学医用专业知识专家讲座第21页二.同卵双生子发病一致率研究77对白血病患者双生子调查:同卵双生者发病一致率高遗传原因20对同卵双生子发病部位调查:患者患同一部位一样肿瘤遗传原因22遗传学医用专业知识专家讲座第22页三.肿瘤发生率种族差异不一样种族中一些肿瘤发病率有显著差异比如：鼻咽癌中国人马来人印度人13.3:3:0.4移居到美国华人比美国人高34倍。

松果体瘤日本比其它民族高十余倍。

——种族差异主要是遗传差异所致，在肿瘤发生中也起作用。23遗传学医用专业知识专家讲座第23页第三节遗传性肿瘤p433少数起源于神经或胚胎组织肿瘤常为遗传性肿瘤。这些肿瘤按常染色体显性遗传方式遗传，常为双侧性或多发性，发病早于散发型病例。遗传性肿瘤即使少见，但在肿瘤病因学研究上有主要意义。24遗传学医用专业知识专家讲座第24页一.视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma，RB)儿童期（多在4岁以前）发病一个眼内恶性肿瘤发生率约1/21000～1/10000临床表现：早期为眼底灰白色肿块，多无自觉症状，以后肿瘤长入玻璃体，使瞳孔呈黄色光反射时，才轻易被发觉，称为“猫眼”。

遗传型多为双侧发病，发病早，有家族史。非遗传型多为单侧发病，且在2岁以后才发病。25遗传学医用专业知识专家讲座第25页视网膜母细胞瘤（RB）

遗传性非遗传性（散发型）

AD遗传散发家族史无双侧单侧(约90%）早发晚发20～25%75～80%26遗传学医用专业知识专家讲座第26页二.肾母细胞瘤（Wilms瘤，WT)婴幼儿恶性胚胎肿瘤，患者腹部有没有症状肿块。发病率为1/10000，3/4肿瘤发生在4岁以前，90%在20岁前发生。可分为遗传型和非遗传型。

遗传性非遗传性（散发型）AD遗传散发双侧单侧早发晚发38%62%27遗传学医用专业知识专家讲座第27页

研究表明：Wilms瘤基因(WT)是一个抑癌基因，基因产物为一个有锌指结构蛋白质，与早期生长反应基因（EGR-1)DNA相结合而抑制其转录激活作用。患者肿瘤组织中有WT纯合缺失，其正常组织中则为杂合子。Wilms瘤发生机理可能与视网膜母细胞瘤相同。28遗传学医用专业知识专家讲座第28页Wilms瘤如伴有没有虹膜，泌尿生殖道畸形，智力低下，则称为WAGR综合征。该综合征患者有11号染色体短臂中间缺失，del(11)(p13),所以认为11p13位点载有肿瘤抑制基因。29遗传学医用专业知识专家讲座第29页三.神经母细胞瘤（Neuroblatoma，NB)一个儿童常见恶性胚胎瘤，起源于神经嵴，发病率约1/10000。有NB还并发神经纤维瘤，神经节瘤，嗜铬细胞瘤等。可分为遗传型和非遗传型。

遗传性非遗传性（散发型）

AD遗传散发早发晚发多发单发20%80%

致病基因定位于1p36。该基因第一次突变可能只干扰神经嵴正常发育，第二次突变才造成恶性肿瘤发生。30遗传学医用专业知识专家讲座第30页同是一个肿瘤,为何现有遗传型又有散发型?发病年纪又不一样呢?

1971年Knudson为解释家族性(遗传型)视网膜母细胞瘤提出二次突变学说(twohitstheory),解释这种现象。31遗传学医用专业知识专家讲座第31页

恶性肿瘤发生需经两次以上突变。

遗传性病例中，第一次突变发生于生殖细胞，结果个体每一个细胞均带有一个突变，成为突变杂合子。在此基础上发生第二次突变是体细胞突变。两次突变累加，即可完成始动（initiation)，而从良性细胞变成恶性细胞。恶性细胞在一定条件下，形成增殖优势，即可完成促进阶段,形成恶性细胞克隆。

所以，遗传型病例常为双侧或多发且发病较早。32遗传学医用专业知识专家讲座第32页

在非遗传性病例中，

两次突变都是体细胞突变，而且必须在同一个体细胞中两次发生独立才能完成始动过程。这种机会比较少，需要经过漫长过程积累。

所以非遗传性肿瘤多为单发，且发病较晚。33遗传学医用专业知识专家讲座第33页正常细胞转化为恶性细胞需要两次以上突变事件发生p470正常人约有1014个细胞，在人整个一生中约进行1016次细胞分裂，人体自发突变频率约为1.4×10-10，实际上加上辐射和自然界普遍存在致突变剂影响，突变频率要远高于这个数值。假如单个突变能够致癌，仅据自发突变率计算，人一生中大约有28％细胞将癌变，那么癌症将是日常事件。34遗传学医用专业知识专家讲座第34页总结：AlfredKnudson两次打击（twohit）学说：连续两次基因突变使正常细胞转化为癌细胞。生殖细胞突变+体细胞突变遗传性肿瘤正常体细胞两次突变散发性肿瘤35遗传学医用专业知识专家讲座第35页第四节、遗传性癌前病变p433

一些单基因遗传疾病和综合征中，有不一样程度恶性肿瘤倾向，称为癌前病变（precancerouslesion)。其遗传方式大部分为常染色体显性。36遗传学医用专业知识专家讲座第36页一.家族性结肠息肉综合征（FamilialPolyposisColi,FPC)常染色体显性遗传特征：为病变局限于结肠和直肠，息肉为腺瘤性，数目可多可少，十几岁时即可能开始恶变为腺癌，40岁前多恶变为癌。致病基因：APC是一个抑癌基因，位于5q21-q22，在其有杂合性缺失基础上，又经癌基因KRAS2、抑癌基因DCC、p53等多步改变，才形成结肠腺癌。37遗传学医用专业知识专家讲座第37页38遗传学医用专业知识专家讲座第38页二.神经纤维瘤（Neurofibromatosis,NF)常染色体显性遗传，患者皮肤有牛奶咖啡斑和纤维瘤样皮肤瘤，如有6个以上直径超出1.5cm牛奶咖啡斑即可诊疗为该病。在儿童期，皮肤中即可出现神经纤维瘤，主要分布于躯干，从针尖至橘子大小。3%～15%可恶变为纤维肉瘤、鳞癌和神经纤维肉瘤。致病基因NF位于11q11.2，是一个抑癌基因，其产物有特异抑制RAS癌基因作用。39遗传学医用专业知识专家讲座第39页三.基底细胞痣综合征（BasalCellNervesSyndrome,BCNS)是常染色体显性遗传，患者面部、手臂和躯干有多数基底细胞痣，青春期增多，青年期即可发生恶变，40岁时90%恶变为基底细胞癌，并有颌骨囊肿。致病基因BCNS位于9q22.3-q31，是一个抑癌基因。40遗传学医用专业知识专家讲座第40页第五节染色体异常与肿瘤

数目异常结构异常

染色体异常是癌细胞遗传学基本特征

细胞内染色体不稳定是产生肿瘤根本原因

——Boveri191441遗传学医用专业知识专家讲座第41页

每一个正常细胞中有一个特殊排列能够抑制细胞分裂，…假定存在一些抑制分裂确定染色体，它丢失将引发肿瘤细胞无限生长…，另首先，假定还存在促进分裂染色体，…当受到某种刺激激活时，细胞就发生分裂…，由此可推断恶性肿瘤细胞快速无限增殖趋势，是因为促进分裂染色体持久优势所致。

TheodorBoveri，1911

今天，大量科学证据表明：抑制细胞生长染色体抑癌基因促进细胞生长染色体癌基因42遗传学医用专业知识专家讲座第42页

同一肿瘤每个细胞含有共同染色体特点

经分裂、增殖而成克隆

同一突变细胞但因为各种原因影响，克隆癌细胞核型有不一样改变。

克隆演化（cloneevolution)主导克隆---干系(stemline)--众数(modalnumber)

非主导克隆---旁系(sideline)一、数目异常——多为非整倍体或异倍体43遗传学医用专业知识专家讲座第43页超二倍体（染色体>46条)非整倍体亚二倍体（染色体<46条）

三倍体多倍体四倍体

数目改变并不反应恶性程度。44遗传学医用专业知识专家讲座第44页染色体断裂、重排形成结构异常染色体经常出现于某一个肿瘤细胞中，则称之为标识染色体。染色体结构异常——易位、缺失，引发癌基因激活和抑癌基因失活，这是癌症发生主要分子基础。二、结构异常45遗传学医用专业知识专家讲座第45页

（1）Ph1染色体1960年首先在美国费城CML患者骨髓和外周血淋巴细胞中，发觉一个很小近端着丝粒染色体，小于G组染色体。被称为Ph1染色体。

原因：t（9；22）（q34；q11）易位结果造成9q+和22q-（Ph1）46遗传学医用专业知识专家讲座第46页临床意义：1.作为CML诊疗依据，约95%CML病例中存在Ph1染色体；2.用于预后判断——Ph1阴性CML对治疗反应差，预后不佳；3.用于早期诊疗——Ph1染色体先于临床症状出现。47遗传学医用专业知识专家讲座第47页t（9；22）（q34；q11）9q+和22q-（Ph1）（95%）48遗传学医用专业知识专家讲座第48页49遗传学医用专业知识专家讲座第49页2）14q+染色体:Burkitt淋巴瘤（BL）患者特异性标识染色体，在75%BL患者中存在。

t（8；14）（q24；q32）8q-和14q+50遗传学医用专业知识专家讲座第50页

结果8q24转移至14q32myc与IgH结合

BCR1（22q11）ABL（9q34）易位癌基因激活融合基因51遗传学医用专业知识专家讲座第51页52遗传学医用专业知识专家讲座第52页53遗传学医用专业知识专家讲座第53页第六节、染色体不稳定综合征与肿瘤

一些疾病或综合征，因为DNA修复酶缺点造成染色体不稳定，易发生断裂、缺失、重排，这些现象称染色体不稳定综合征。在此基础上患者易患白血病或其它恶性肿瘤。54遗传学医用专业知识专家讲座第54页55遗传学医用专业知识专家讲座第55页染色体不稳定综合征（Chromsomeunstablesyndrome）

Bloom’s综合征Fanconi贫血毛细血管扩张性共济失调着色性干皮病共同特征：AR，DNA修复系统异常，所以染色体DNA不稳定，易于发生断裂或重排，易患白血病或其它恶性肿瘤。56遗传学医用专业知识专家讲座第56页一.Bloom综合征

常染色体隐性遗传病，东欧犹太人后代中多见。病因：患者染色体不稳定，有免疫功效缺点。表现：身材矮小，一岁时面部暴露于日光部位出现蝴蝶状红斑，毛细血管扩张所致。常伴发白血病和其它恶性肿瘤。可恶变为纤维肉瘤、鳞癌和神经纤维肉瘤。致病基因BLM位于15q26.157遗传学医用专业知识专家讲座第57页二.Fanconi贫血（FA)

常染色体隐性遗传，儿童骨髓疾病。患者全血细胞降低，又称先天性全血细胞降低症。白血病发生率比普通人高20倍。常伴发侏儒，小眼球，心、肾畸形等。一些FA患者在粘膜与皮肤交界处（口唇，肛门和阴唇）可发生鳞状上皮癌。病因：缺乏核酸外切酶（exonuclease），非同源染色体之间常交联、易位。致病基因定位于20q13。58遗传学医用专业知识专家讲座第58页三.毛细血管扩张性共济失调症（AT)

常染色体隐性遗传病，常在儿童期发病。患者1岁起进行性小脑共济失调。4-6岁时，眼、面部、颈部，尤其是眼结膜可出现瘤样毛细血管扩张。常伴发白血病，尤其是T淋巴细胞白血病和乳腺癌。染色体自发断裂率增高。14q12为断裂热点，所以形成淋巴细胞白血病常有14q+易位。59遗传学医用专业知识专家讲座第59页四.着色性干皮病（XP)

常染色体隐性遗传病

临床表现：主要是皮肤对紫外线非常敏感，日光照射后可发生色素从容，红斑等病变，可恶变为基底细胞癌或鳞状上皮癌，常在儿童期发生恶性肿瘤，并死于癌转移。

病因：缺乏核酸酶，DNA切除修复系统有缺点，不能切除紫外线诱发嘧啶二聚体，因而造成突变率增高。60遗传学医用专业知识专家讲座第60页第六节癌基因和抑癌基因

肿瘤发生分子基础61遗传学医用专业知识专家讲座第61页癌基因发觉p4371910年Rous发觉鸡肉瘤病毒(RSV---RNA反转录病毒）。1970年，Martin等经过分析野生型RSV和缺失转化能力变异株病毒基因差异，发觉细胞恶性转化与RSV基因组中一个特定基因Src相关，命名为V-Src。1976年Bishop证实正常细胞中存在与v-oncogene同源序列——细胞癌基因c-oncogeng或原癌基因。80年代初Weinberg等几个试验室经过转染试验证实人体细胞中癌基因H-ras。现已发觉100各种oncs。62遗传学医用专业知识专家讲座第62页病毒癌基因是存在于肿瘤病毒基因组中、使靶细胞发生恶性转化基因。正常细胞内存在与病毒癌基因同源基因,称为细胞癌基因序列上高度同源；c-onc有内含子，v-onc无内含子；v-onc有致癌能力，而c-onc无，但突变后可能致癌；63遗传学医用专业知识专家讲座第63页经过转染试验证实人体细胞中癌基因H-ras。64遗传学医用专业知识专家讲座第64页

了解：

细胞癌基因是细胞正常生长、分化所必需，是生长发育过程中所不可缺乏。在发育过程中一定时间、一定组织中定量表示，产生生命活动中所必需蛋白质，促进一些生命过程进行，使生长发育得以实现。在机体生长发育过程完成后多处于关闭状态，即不表示或低表示。一旦在错误时间，不恰当地点，不适量表示即可能造成细胞无限制增加而趋于恶性转化。65遗传学医用专业知识专家讲座第65页

原癌基因（proto-oncogene）

正常细胞内存在、参加细胞生长分化并含有使细胞癌变潜能基因癌基因（oncogene）使细胞发生癌变、引发细胞无限增殖和恶性转化基因。在肿瘤细胞中原癌基因往往被激活，处于活跃表示状态66遗传学医用专业知识专家讲座第66页癌基因功效和分类依其编码产物（分布于细胞不一样部位）功效分类：

1生长因子：sis、PDGF2生长因子受体：erbB1，EGFR3信号传递因子：src、Ras4核转录因子：Raf（细胞质）myc，fos，jun等。5细胞周期素、CDK网络成份和激酶抑制子

67遗传学医用专业知识专家讲座第67页癌基因在细胞内分布68遗传学医用专业知识专家讲座第68页癌基因激活机制

细胞中原癌基因能够经过一些机制被激活,造成基因表示或过表示,从而使细胞癌变,普通分为4类:基因扩增开启子插入激活点突变染色体易位或重排69遗传学医用专业知识专家讲座第69页1点突变（pointmutation）单个碱基突变而改变了编码蛋白质功效使癌基因激活.K-rasN-ras，H-ras，12、13、61codon突变70遗传学医用专业知识专家讲座第70页2基因扩增（geneamplification）细胞学：

均质染色区（HSR）—染色体某个节段、相对解旋、浅染区,染色体增加。

双微体（DM）—扩增DNA脱离染色体,分散为成双染色质小体分子水平：基因拷贝倍增。神经母细胞瘤N-myc71遗传学医用专业知识专家讲座第71页均质染色区（HSR）和双微（DM）72遗传学医用专业知识专家讲座第72页3染色体易位，基因重排染色体断裂与重排造成细胞癌基因在染色体上位置发生改变,易位到开启子或增强子附近而被激活,或与其它高表示基因形成融合基因.CMLt（9；22）9q+和22q-（Ph1）BLt（8；14）8q-和14q+73遗传学医用专业知识专家讲座第73页74遗传学医用专业知识专家讲座第74页4开启子插入（promoterinsertion）

接种4－12个月

ALV鸡（1日龄）B.C淋巴瘤（

ALV---鸟类白细胞组织增生病毒,含有LTR,含有开启子,一旦整合到细胞癌基因c-MYC旁可使之激活）75遗传学医用专业知识专家讲座第75页

人类肿瘤代表性癌基因及其分类

前癌基因作用

癌基因

活化机制

亚细胞定位

人类肿瘤

生长因子：

PDGF-β链

sis

过分表示

细胞外

星形细胞，骨肉瘤，乳腺癌等

FGF

hst-1

过分表示

细胞外

胃癌，胶质母细胞癌

生长因子受体：

（具蛋白质激酶活性）

EGFR家族

erb-B1

过分表示

透膜

肺鳞癌，脑膜瘤，卵巢癌等

erb-B2

扩

增

透膜

乳腺癌，卵巢癌，肺癌，胃癌等

erbB-3

过分表示

透膜

乳腺癌

csf-1受体

fms

点突变

透膜

白血病

参加信息转导蛋白质：

结合GTP

H-ras

点突变

胞膜内

甲状腺癌，膀胱癌等

K-ras

点突变

胞膜内

结肠癌、肺癌、胰腺癌等

N-ras

点突变

胞膜内

白血病，甲状腺癌

细胞核调整性蛋白质：

转录活化物

c-myc

易

位

核

内

Burkitt淋巴瘤

N-nyc

扩

增

核

内

神经母细胞瘤，肺小细胞癌

L-myc

扩

增

核

内

肺小细胞癌

76遗传学医用专业知识专家讲座第76页肿瘤抑制基因/抑癌基因

（TumorSuppressorGene，TSG）

正常细胞中存在一类调整细胞生长增殖分化基因，含有抑制肿瘤细胞增殖作用。与原癌基因区分：原癌基因是显性基因，一个等位基因突变即可显示致癌效应；肿瘤抑制基因突变，则是隐性。一个肿瘤抑制等位基因发生突变，不会发生致癌效应。即只有当其一对基因拷贝失活、丧失功效后，形成隐性状态才失去抑制肿瘤发生作用，故亦称隐性癌基因。77遗传学医用专业知识专家讲座第77页TSG研究路径

（发觉TSG方法和证据）细胞融合试验克隆第一个TSG--RB1杂合性丢失(Lossofheterozygosity,LOH罕见家族性癌综合征研究78遗传学医用专业知识专家讲座第78页一、细胞融合试验Harris（1971）应用微细胞技术将含有一条正常Chr微细胞与肿瘤细胞融合，可抑制肿瘤，这为寻找TSG提供线索。79遗传学医用专业知识专家讲座第79页二、克隆第一个TSG–RB1细胞遗传学证据：1976年对多个RB患者Chr缺失判定，最终确定于13q1480遗传学医用专业知识专家讲座第80页RB1基因分子遗传学证据：1983年Cavanee用13q12-q14片段为探针，经杂交试验确证存在此区域存在一个4.7kb基因1986年Friend首先分离一cDNA克隆。LeeWH又克隆了三个重合cDNA克隆，进行RB基因测序。1988年SuHuangHJ用反转录酶为载体将RB导入RB细胞系，基因表示并抑制肿瘤特征，证实RB1是一个TSG。RB1：200kb长，27exonsmRNA4.7kb，编码105kd蛋白，928个氨基酸,是一与DNA结合磷酸化蛋白质，含有-GGAAGTA元件，受p53调整。81遗传学医用专业知识专家讲座第81页RB基因—第一个被克隆TSG82遗传学医用专业知识专家讲座第82页三、杂合性丢失

（Lossofheterozygosity-LOH）肿瘤细胞染色体特定区域杂合性等位基因中一个丢失，这种现象称杂合性丢失。在肿瘤抑癌基因中普遍存在。能够用能区分两等位基因多态标识来检测杂合性丢失。DNA多态标识杂合性丢失可有利于确定与其紧密连锁抑癌基因存在并准确定位.83遗传学医用专业知识专家讲座第83页84遗传学医用专业知识专家讲座第84页四、罕见家族性癌综合征研究家族性癌（familialcarcinoma)一个家族中多个组员患同一类型肿瘤。RB是一例。Li-FraumericSyndrome（LFS）Malkin（1990）在5个LFS家系中发觉患者体细胞中p53突变和LOH；分子水平分析：都有相同248处T-C碱基替换，并证实都有二次突变（第一次生殖细胞突变，第二次体细胞突变）。这是发觉判定TSG主要线索和路径。85遗传学医用专业知识专家讲座第85页

肿瘤（家族性）基因Chr肿瘤类型功效家族性腺瘤性息肉APC5q21结肠癌信号传导VHL综合征VHL3q25肾癌嗜老细胞瘤调整转录Wilms瘤WT111q13儿童肾癌调整转录家族性黑色素瘤CDKN2A9p21黑色素瘤胰腺癌细胞周期调整遗传性非息肉结肠癌MSH22p16结肠癌DNA错配修复遗传性非息肉结肠癌MLH13p21结肠癌DNA错配修复家族性乳腺癌BRCA117q21乳腺癌，卵巢癌？家族性乳腺癌BRCA213q12乳腺癌，卵巢癌？多发性内分泌肿瘤MEN111q13甲状旁腺和垂体癌？胰岛细胞癌，类癌瘤多发性神经纤维瘤NF117q11.2神经纤维瘤，催化Rnas失活肉瘤，胶质瘤现已知约有30各种TSG（Nature，Vol409，Feb，）家族性癌综合征和相关肿瘤抑制基因86遗传学医用专业知识专家讲座第86页五、癌发生与细胞周期调控

p461Rb1及其产物与细胞周期调控P53及其产物与细胞周期调控87遗传学医用专业知识专家讲座第87页TSG与细胞周期：G1SG2MRBE2FCyclin/cdkE2F磷酸化P16、P21、P27等Ｒb１及其产物在细胞周期G1期发挥调控40%癌症发生Rb突变或缺失，RB蛋白质是细胞周期G1/S期因子，起DNA复制阻断作用，它