《微生物基础》课件-1.1高温灭菌法

高温灭菌法微生物基础原理高温不仅引起蛋白质、核酸等活性大分子不可逆地变性失活还会破坏细胞质中其他活性物质细胞膜被热溶解，造成胞内物质泄漏干热灭菌法湿热灭菌法干热灭菌法火焰焚烧法干热空气灭菌法湿热灭菌法巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法高压灭菌法一、干热灭菌法（一）干热空气灭菌法实拍温度：160~170℃时间：1~2h用高温干热空气灭菌的方法。（一）干热空气灭菌法玻璃物品灭菌陶瓷物品灭菌金属物品灭菌不允许湿气穿透

的油脂类物品灭菌耐高温的粉末化学药品灭菌（一）干热空气灭菌法

为什么干热空气灭菌工艺参数是160℃-170℃处理1-2h呢？（一）干热空气灭菌法微生物细胞其细胞内蛋白质在无水时于160℃开始凝固所以干热空气灭菌温度必须高于160℃，报纸着火点一般为180℃，因此干热空气灭菌温度必须低于180℃。（一）干热空气灭菌法注意事项1.需灭菌的玻璃器皿一定要洗净并干燥。2.需灭菌的物品不要靠箱壁附近，不要过挤，灭菌物之间应留空隙。3.温度以控制在165℃维持2小时为宜。4.灭菌完毕，待烘箱自然降温至60℃以下才能打开箱门。（二）火焰焚烧法用火焰直接灼烧的方法灭菌迅速灭菌可靠灭菌简便适用于无经济价值的物品及耐灼烧实验器具灭菌。（二）火焰焚烧法用火焰直接灼烧的方法接种环灭菌镊子灭菌试管或三角瓶口灭菌二、湿热灭菌法定义用饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法。首先湿热灭菌时菌体蛋白容易变性其次，湿热穿透力强最后一条，蒸汽变成水时可放出大量潜热，增强杀菌效果巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法高压灭菌法（一）高压蒸汽灭菌法利用水的沸点随水蒸汽压力的增加而上升，以达到100℃以上高温灭菌的方法（一）高压蒸汽灭菌法立式高压蒸汽灭菌器卧式高压蒸汽灭菌锅手提式高压蒸汽灭菌锅（一）高压蒸汽灭菌法高压是怎么来的呢？（一）高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌所使用的压力和时间与被灭菌物品有关121℃(0.1MPa)维持15～20min112℃(0.05MPa)维持20～30min115℃(0.075MPa)维持20～30min（一）高压蒸汽灭菌法应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度121℃（一）高压蒸汽灭菌法应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度112℃（一）高压蒸汽灭菌法培养基灭菌玻璃器皿灭菌无菌水灭菌（一）高压蒸汽灭菌法耐高热药品灭菌纱布灭菌采样器械灭菌（一）高压蒸汽灭菌法高温对培养基会产生不利影响产生浑浊或形成不溶性沉淀营养成分被破坏色泽加深改变培养基的pH(通常下降0.2)降低培养基浓度等（一）高压蒸汽灭菌法注意事项1.外锅水不能过少，否则易将灭菌锅烧干引起爆炸事故2.待灭菌的物品放置不要过满，以免灭菌不彻底。3.加热排气时，冷空气务必排尽后再关闭排气阀。（一）高压蒸汽灭菌法注意事项4.当压力不为零时，不能开盖取物，否则由于压力突然下降，容器内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染而发生污染，甚至灼伤操作者。5.高压灭菌锅上的安全阀，是保障安全使用的重要机构，不得随意调节。6.整个灭菌过程中应由专人负责控制电源，以防万一。（二）巴氏消毒法用较低的温度杀死其中的病原微生物，这样既可保持食品的营养风味，又可进行消毒（二）巴氏消毒法低温长时法(62.9℃，30min)高温瞬时法(71.6℃，15s)牛乳消毒啤酒消毒果酒消毒酱油消毒（二）巴氏消毒法高温短时灭菌即由巴氏消毒演变而来目的不损坏营养，保留食品饮料原有风味，杀死病原微生物。如钝化果胶甲酯酶和保证柑橘原汁的胶态稳定性，要选择86～99℃的杀菌温度和相应的停留时间。（二）巴氏消毒法（三）间歇灭菌法用常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法（三）间歇灭菌法实拍灭菌物品在80~100℃蒸煮15~60min室温(28~37℃)下过夜冷却后第一天灭菌物品在80~100℃蒸煮15~60min室温(28~37℃)下过夜冷却后第二天灭菌物品在80~100℃蒸煮15~60min室温(28~37℃)下过夜冷却后第N天（三）间歇灭菌