样本类型基础知识

样本类型基础知识第一页，共28页。大纲一、血液根本组成二、样本类型分类及相关应用1、样本类型分类2、凝血过程3、抗凝剂种类及应用4、促凝剂种类及应用5、别离胶作用原理三、真空采血管介绍四、临床样本处理2021/11/142第二页，共28页。一、血液的根本组成红细胞血细胞白细胞血小板纤维蛋白原全血血液血浆蛋白白蛋白血浆固体成分球蛋白血浆/血清血清营养物质、脂类、酶、电解质、激素、维生素、无机盐（钙、镁、钾、钠等）水2021/11/143第三页，共28页。样本类型分类添加物血清无添加/促凝剂无添加/促凝剂+分离胶血浆EDTA-2钠（钾）/肝素/柠檬酸/草酸等EDTA-2钠（钾）/肝素/柠檬酸/草酸等+分离胶二、样本类型分类及相关应用2021/11/144第四页，共28页。凝血过程1、血小板的聚集和沉积。2、凝血瀑布的激活：2021/11/145第五页，共28页。抗凝剂种类及应用肝素〔液体，钠、锂等〕柠檬酸〔液体，钠、钾等〕EDTA〔液体或固体，二钠、二钾、三钾等〕草酸〔钠、钾〕ACD(液体，酸性枸橼酸葡萄糖〕CPDA〔柠檬酸-磷酸-葡萄糖-腺嘌呤〕CPD〔枸橼酸盐-磷酸盐-葡萄糖〕水蛭素2021/11/146第六页，共28页。抗凝剂种类及应用肝素〔液体，钠、锂等〕：肝素锂在检测非锂离子时产生干扰的可能性最小，推荐使用肝素锂作为抗凝剂。目前，在对pH值、血气、电解质和钙离子的检测中肝素是唯一可以使用的抗凝剂。不适于做血凝试验、白细胞计数。枸橼酸钠或枸橼酸钠缓冲液：凝血实验首选的抗凝剂EDTA〔液体或固体，二钠、二钾、三钾等〕：二钠盐和二钾盐使用时通常为干粉，血细胞计数和分类首选EDTA二钾盐作为抗凝剂；为了增强抗凝能力，EDTA三钾使用时通常为溶液。通常使用的三钾溶液将使血液稀释1%至2%。

2021/11/147第七页，共28页。促凝剂种类及应用促凝剂的活性成分：活性二氧化硅、脑磷脂、凝血酶、白陶土、硅石粉、玻璃粉、碳素粉末及蛇毒等促凝成分经特殊加工而成。促凝剂的状态：液体、雾状喷涂、干粉、球状、液固双相。促凝剂可激活血浆和血小板中的局部凝血因子，生成凝血活酶，促进血液凝固，加速血块回缩，到达快速别离血清的目的。促凝剂与血液的接触面积：接触面积越大，血液凝固时形成的纤维蛋白网状构造越严密，血清的产量越高。全液体浸涂＞雾状喷涂＞液固双相＞干粉＞球状促凝剂的效果评价：血液完全凝固的时间，一般要求玻璃管在15分钟，塑胶管在20分钟以内，促凝剂的有效成分不能影响检测结果，血液凝固后不能在血清内有纤维蛋白丝或微小凝块。〔塑胶管与血液接触时，激活凝血因子VI、VII的能力非常弱〕2021/11/148第八页，共28页。别离胶离心后别离胶在血浆/血清和血细胞之间起到屏障隔离作用.SST和PST别离胶试管血清别离胶血凝块2021/11/149第九页，共28页。三、真空采血管介绍真空采血系统真空采血管及采血针的生产厂家不适应真空采血情况真空采血管的材质及添加剂多管采集顺序真空采血管引起溶血的原因2021/11/1410第十页，共28页。真空采血系统真空采血系统由真空采血管、采血针〔包括直针和头皮针〕、持针器三个局部组成。真空采血管是其主要组成局部，主要用于血液标本的采集与保存。真空采血管在生产过程中预置了一定量的负压，当采血针穿刺进入血管后，由于采血管内的负压作用，血液自动流入采血管内。2021/11/1411第十一页，共28页。真空采血管：高档：BD、GR、积水、泰尔茂；中高档：阳普中档：拱东、科华、威高；低档：浏阳、鑫乐、信灵、康健、索达真空采血针：高档：NIPRO、哈娜好；中档：康德莱低档：浏阳、福尔康2021/11/1412第十二页，共28页。不适应真空采血情况

①休克患者：血管痉挛，血管内压力不够，用采血管难以到达采血量标准。②小儿颈静脉或股静脉采血：用真空采血持针器没有注射器灵活，所以用真空采血管采血成功率不高。③水肿患者、静脉压低的患者：用真空采血管采血成功率差。2021/11/1413第十三页，共28页。真空采血管的材质

玻璃：主要成分是亲水性硅酸盐,采血后玻璃试管内壁可出现吸附水分子的吸水层,所以,别离胶不能直接黏附于玻璃试管的内壁。随着放置时间的延长,红细胞中的钾或者酶等物质,可以通过水分子吸水层向血清中扩散，所以,玻璃采血管在原状态下保存血清的期限以2-3d为宜。塑料：常用聚对苯二甲酸(乙二)醇酯(PET)材质，疏水性质,其管壁不产生水分子层分离胶可结实地黏附在内壁上,红细胞中的钾不能扩散到血清中,因而冷藏保存8d血清钾含量不变。也可-20℃保存标本〔玻璃采血管无法到达〕。密封胶塞：推荐使用丁基橡胶而不用天然橡胶，天然橡胶成分复杂，易致溶血。2021/11/1414第十四页，共28页。试管添加剂抗凝剂促凝剂别离胶氟化物其它(例如:硅酮涂层,外表活性剂)特殊应用的添加剂2021/11/1415第十五页，共28页。头盖颜色临床用途标本类型制备步骤添加剂

红色血清生化血清采血后不需颠倒混匀→静置1小时→离心无（内壁涂有血液附壁防止剂）

黄色快速血清生化试验血清采血后立即颠倒混匀8次→静置20分钟→离心分离胶、促凝剂（内壁涂有血液附壁防止剂）

橙色快速血清生化试验血清采血后立即颠倒混匀8次→静置20分钟→离心促凝剂

浅蓝色血凝试验血浆采血后立即颠倒混匀8次→离心抗凝剂：柠檬酸钠与血样比为1:9

灰色血糖试验血浆采血后立即颠倒混匀8次→离心抗凝剂：EDTA，氟化钠

绿色快速血浆生化血流变试验血浆采血后立即颠倒混匀8次→离心抗凝剂：肝素锂或肝素钠

浅绿色快速血浆生化试验血浆采血后立即颠倒混匀8次→离心分离胶，肝素锂

紫色血液学常规全血实验全血采血后立即颠倒混匀8次→试验前混匀标本抗凝剂：EDTA-2K或EDTA-3K

黑色血沉试验全血采血后立即颠倒混匀8次→使用前混匀标本抗凝剂：柠檬酸钠与血样比为1：42021/11/1416第十六页，共28页。多管采血顺序介绍1.人卫版检验临床根底：玻璃管：血培养管→无抗凝剂血清管→枸橼酸钠抗凝管〔蓝〕→其他抗凝管〔黑绿紫灰〕→金黄色促凝管；塑料管：血培养管〔黄〕→枸橼酸钠抗凝管〔蓝〕→加或未加促凝剂或别离胶的血清管→肝素管〔绿〕→EDTA管〔紫〕→加GLU分解抑制剂管〔灰〕2.卫生部：血培养瓶→无添加剂血清管→凝血试验管→添加剂管｛枸橼酸钠抗凝管〔蓝〕→肝素管〔绿〕→EDTA管〔紫〕→加GLU分解抑制剂管〔灰〕｝3.美国CLSI〔临床实验室标准化协会〕，H3-A6：血培养管→血凝管〔蓝〕→血清管→肝素管〔绿〕→EDTA管〔紫〕→加GLU分解抑制剂管〔灰〕4.日本标准：血培养管→血清用采血→柠檬酸采血→肝素采血→EDTA采血→加GLU分解抑制剂的采血5.BD:血培养瓶→蓝→黑→黄→红→绿→紫→灰2021/11/1417第十七页，共28页。三、临床样本处理真空采血管混匀次数及正确混匀方式真空采血管引起溶血的原因采血管类型对检测结果的影响采血管放置时间对结果的影响外来物质对结果的影响2021/11/1418第十八页，共28页。混匀次数肝素全血培养柠檬酸盐别离胶氟化物〔葡萄糖〕2021/11/1419第十九页，共28页。标准的混匀方式采血后立即轻轻倒转采血试管4~5次混匀标本,等待标本充分凝固需要放置30min,离心半径8cm,离心速度维持在3500~4000r/min离心10min2021/11/1420第二十页，共28页。2021/11/1421第二十一页，共28页。溶血对检验结果的影响：血细胞成分的释放〔如血钾升高〕颜色对检测的干扰〔如PT、APTT的延长〕血细胞成分对检测的干扰〔如腺苷酸激酶对某些酶学指标检测的影响〕采血时常引起标本溶血的原因：将血标本从注射器推到试管中采血针在静脉中反复探来探去混合有抗凝剂的试管时用力过猛从已有血肿的部位采血采血时有空气进展注射器产生泡沫为增加血液量而挤压穿刺部位盛血的试管质量粗糙2021/11/1422第二十二页，共28页。采血管类型对检测结果的影响生化工程免疫发光发光工程2021/11/1423第二十三页，共28页。采血管放置时间对结果的影响HDL-C于22℃、4℃放置不同时间测定值差异无统计学意义〔P>0.05〕.TC/TG和LDL-C于22℃内的检测结果相对稳定，但-20℃保存7d的标本，除LDL-C外，其余血脂3项均与即刻检测结果有差异。总结，室温4℃条件下保存的别离样本在2～4h内的血脂检测结果比较稳定，不影响结果。贮存过程中脂蛋白颗粒的构造可能改变，甚至裂解而影响选择性改变脂蛋白之间可能有局部脂质交换。2021/11/1424第二十四页，共28页。外来物质的影响因素刺激物、药物或成瘾性药物的影响及其控制因素常见影响工程举例咖啡因血糖、脂肪酸、儿茶酚氨、血管紧张素烟草脂肪酸、肾上腺素、肾上腺皮质激素、醛固酮酒精乳酸、尿酸、肾上腺素、血糖、胆固醇吗啡淀粉酶、脂肪酸、转氨酶、