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文档简介
巴斯德效应:在有氧条件下。兼性厌氧微生物终止发酵,进行有氧呼吸,这种呼吸克制发
酵的现象称为巴斯德效应,即呼吸克制作用。
巴斯德的奉献:1.证明了微生物活动和否认了微生物自然发生学说;2开创了免疫学一一防
止接种。3.发酵的研究;4.巴斯德消毒法,观测丁醇发酵时发现厌氧生命,提出好氧厌氧
属于。
柯赫的奉献:I设计了分离和纯化细菌的措施:划线法、混合平板法。2.设计了培养细菌用
的肉汁陈培养液和营养琼脂培养基。3.设计了细菌染色技术。4.提出柯赫法则:(证明某种
生物与否为某种疾病的病原的基本原则)i.病原体微生物一定伴伴随病害而存在;ii;必须能
日原寄主分理处这种微生物,并培养成为纯培养;iii.分离培养出的病原体比能在试验动物
身上产生相似的症状iiii必须自人工接种发病的寄主内,能重新分离出同一病原微生物并
培养成纯培养。
3.试述染色法的机制并阐明此法的重要性。
答:革兰氏染色的机制为:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细菌的细胞膜内可形成不溶
于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱
色剂乙醇处理时,因失水而使网孔缩小,在加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝
隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。反之,G-细菌因其细胞
壁薄、外膜层类脂含最高、肽聚糖层薄和交联度差,遇脱色剂乙醇后,以类脂为主的外膜
迅速溶解,这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此细胞退成无
色。这时,在经沙黄等红色染料复染,就使G-细菌呈红色,而G+细菌则仍保留最初的紫
色。此法证明了G+和G-重要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不一样而
使染色反应不一样,是一种积极重要的鉴别染色法,不仅可以用与鉴别真细菌,也可鉴别
古生菌。
5.试述几种细菌细胞壁缺损型的形成,特点和实际意义。
f自发缺壁突变:L型细菌
”试验室中形成|
|「彻底除尽:原生质体
I人工措施去壁V
I部分清除:原生质球
I自然界长期进化中形成:支原体
L型细菌原生质体原生质球支原体
低浓度青霉素等环境溶菌酶或青溶菌酶或青霉素处理长期进化
下基因突变霉素制止其
有些可通过滤器细胞壁的正
常合成
G+—菌,多形态G+可得,球G-可得,球形
形
无完整的细胞壁无细胞壁无完整的细胞壁(一定抗性)无细胞壁
对渗透压敏感,需高浓度盐类才能存活不敏感
生长缓慢,在固体培养有鞭毛,但不运动,可生长,可形成芽抱,俗醇一有较高
基上形成油煎荷包蛋状可繁殖,不能分裂,形成菌落,生物活性不的机械强度
菌落变
实际意义:原生质体和原生质球比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质,故是遗传
规律和进行原生质体育种的良好试验材料。
L型细菌:细菌在某种环境条件下(如低浓度青霉素D因基因突变而产生的缺乏细胞壁的
遗传性能稳定的变异类型。
原生质体:在G+菌培养物中加入溶菌酶或通过青霉素制止其细胞壁的正常合成而获得的
完全缺壁细胞即为原生质体。
原生质球:指细胞壁未所有清除的细菌细胞,呈圆球形,可人为地通过溶菌酶或青霉素处
理革蓝氏阴性菌而获得。
支原体:在长期进化过程中形成的,适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。
细菌的基本形态:球状,杆状,螺旋状,分支丝状。(杆菌形态种类最多)
G+菌细胞壁独有的化学成分是:磷壁酸;G-菌的为脂多糖(G-病原内毒素的物质基础)
细菌的重要繁殖方式是:二分裂.
细菌的特殊构造:鞭毛、菌毛、性菌毛,糖被,芽也
芽抱:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一种圆形或椭圆形、厚壁、含水量极
低、抗逆性极强的休眠构造,称为芽泡。(无繁殖能力,皮层的抗性成分:具有芽也特有
的肽聚糖及DPA)
芽抱耐热机制:
渗透调整皮层膨胀学说:芽抱衣对多价阳离子和水分的透性很差,皮层的离子强度很高,
产生极高的渗透压夺取芽泡关键的水分,成果导致皮层的充足膨胀和高度失水,因此,具
极强的耐热性。
另一种学说认为:芽抱皮层中具有营养细胞所没有的毗咤一2,6二班酸(DPA-Ca),他
能稳定芽泡中的生物大分子,从而增强其耐热性。
菌落:单个微生物在合适的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可
见的、有一定形态构造的子细胞群体,称为菌落。
菌苔:当固体培养基表面众多菌落连成一片时,便成为菌苔。
质粒:某些细菌具有的染色体外的可以独立复制的小分子环状DNA称作质粒。
青霉素(Penicillin)与溶菌酶(lysozyme)杀菌机理
青霉素作用于肽聚糖肽桥的联结,即克制肽聚糖的合成,故仅对生长着的菌有效,重要是
G+菌。
溶菌酶的作用:切断肽聚糖的。-1,4糖甘键。
立克次体:是大小介于一般的细菌与病毒之间,在许多方面类似细菌,专性细胞内寄生的
原核微生物。(专性寄生)
衣原体:介于立克次体与病毒之间,能通过细菌滤器,专性活细胞内寄生的一类原核微生
物。(专性寄生)
异染颗粒:是以无机偏磷酸盐为重要成分的一种无机磷储备物,嗜碱性或嗜中性,用兰色
染料如甲苯胺蓝或甲烯蓝染色时不呈兰色而呈紫红色,故称异染颗粒。
培养基:人工配制的适合微生物生长繁殖、积累代谢产物的营养基质。
9.霉菌可形成哪几种无性独子以及有性抱了,它们的重要特性始什么?
I)无性抱子4种
抱囊抱子:形成于菌丝的特化构造一一电子囊内。
分生抱子:由分生抱子梗顶端特化而成的。单个或成簇。
节抱子:菌丝(横膈膜)断裂而成。
厚垣电子:部分菌丝细胞质浓缩变圆,周围生出厚壁而成。(霉菌休眠体,抵御力强)
2)有性抱子3种
卵孩子:2n,由大小不一样的配子囊结喉够发育而成(藏卵器,雄器)
接合抱子:2n,由菌丝生出的构造哦大小相似,形态相似或略有不一样的两个配子囊接合
厚发育而成(同宗,异宗)
子囊加子:n,在子囊(两性细胞接触厚形成的囊状构造)内形成的。
*担抱子:2n,担子菌特有,经两性细胞核配合后产生的外生电子。因着生在担子上而得
名。
比较四大类微生物
细菌放线菌酵母霉菌
形个体单细胞单细胞单细胞丝绒状、粗而分化
态
形态球状,杆状,螺分丝杆状圆形或椭圆形
构
旋状无隔菌丝比细菌大十倍左右
造
繁殖方式重要时二分裂无性繁殖:分生抱有性繁殖:产子囊泡菌丝片段,产多种有性
子。菌丝断裂子无性繁殖:芽抱子和无性抱子
殖,裂殖,产无性泡
子
培液体均一的混浊液、菌丝团表面生长:菌膜,沉振荡培养形成菌丝球
养
培养絮状沉淀、表面淀;均一的混浊液
特
生长菌环、菌膜
性
固体菌落圆形,光滑湿圆形,表面呈干粉菌落圆形、大而厚霉菌的菌落大、疏松、
培养润、,无色透明状,有泥腥味②表面光滑、湿润,干燥、不透明,多呈绒
质地均匀,有臭粘稠、易挑起毛状、絮状或网状等
昧④常有酒香味。常有霉味
培养基牛肉膏蛋白陈高氏一号培养基查氏培养基麦芽汁培养基
PDA培养基
10.根霉,毛霉,青霉,曲霉四种常见霉菌的重要生物学特性。
菌种根霉毛霉曲每青霉
菌丝无隔多核无隔多核有隔多核有隔多核
单细胞单细胞多细胞多细胞
特化构假根,匍匐枝,足细胞,
造
产抱泡子囊梗,囊抱子囊梗,囊分生狗子梗分生抱子梗,
构造轴,囊托轴,顶囊(两圈辐射分生抱子头
囊领小梗,分生狗子
头)
无性繁抱囊抱子抱囊抱子分生抱子分生抱子
殖
有性繁接合抱子接合抱子不明(少数子不明(少数子
殖囊)囊)
什么是鉴别培养基?试以EMB为例,分析其鉴别作用原理。
鉴别培养基是一类在成分中加有能与FI的曲的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,
从而到达只须用肉眼鉴别颜色就能以便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。EMB培
养基中的伊红和美蓝可克制革兰氏阳性菌和某些难养的革兰氏阴性菌。产酸菌由于产酸能
力不--样,菌体表面带质子,与伊红美蓝结合从而有不•样的颜色反应,可用肉眼直接判
断。
选择培养基:用来将某种或某类微生物营养从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。
(1、根据某些微生物的特殊营养需求设计“投其所好”,2、根据不一样类微生物对某种化
学物质的敏感性不一样设计“取其所抗可用来从环境中分离细菌。
.简述G+与G-在细胞壁的构造和化学构成上的异同点,并指出与此有关的重要特性。
性质GG-
构造厚度(nm)20-8010-15
层次单层(肽聚糖层)两层:肽聚糖内壁2~3nm
脂多糖脂蛋白外壁层(8-IOnm)
肽聚糖构造多层(约40层)1〜2层
75%肽聚糖亚单位交联30%肽聚糖亚单位交联
肽聚糖网格紧密牢固肽聚糖网格疏稀、机械强度弱
与细胞膜关系不紧密紧密
学
化
肽聚糖含量很高(40-90)含量很低(10-20)
成
构
磷壁酸含量较高(<50)无
类脂质•般无(<2)含量较高(20)脂多糖
蛋白质无含量较高脂蛋白
增殖过程中的基因体现
子代力NA包
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烈性噬菌体:感染细胞后,能在寄主细胞内增殖,产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬
菌体。
一步生长曲线:描述烈性噬菌体生长规律的试验曲线。运用烈性噬菌体的生活周期测定噬
菌体侵染和成熟病毒体释放的时间间隔,用于估计每个被侵染的细胞释放出来的新的噬菌
体粒子数量的生长曲线,称为一步生长曲线原噬菌体(prophage)(或前噬菌体):即整
合在宿主核DNA上的噬菌体的核酸。
病毒的形态构造:
形态:球状、杆状(丝状)、砖块状、弹状、蝌蚪状
构造:核衣壳,包膜,核酸。
病毒粒子(virion):成熟的具有侵染力的单个病毒颗粒。又称病毒颗粒
一种病毒只具有一种核酸(DNA或RNA)o植物病毒绝大多数含DNA;少数含RNA:动
物病毒一部分含DNA,一部分含RNA;细菌病毒普遍含DNA,含RNA的很少。
病毒增殖的5个过程:吸附,侵入,生物合成,装配,裂解
微生物的六大类营养要素:碳源,氮源,能源,水,无机盐,生长因子
噬菌斑(plaque):噬菌斑是
・试验过程:
指在宿主细菌的菌苔上,噬菌
高浓度敏感菌Phage稀悬液(I:10)
混勾工使之吸附体使菌体裂解而形成的空斑。
,中和尚未吸附的phage噬菌体效价(titer):单位体
积悬浮液中可产生噬菌斑的噬
菌体数最。即噬菌斑形成单
用附phage的菌悬液(洗去抗血清)
位。(双层平板法)
病毒的重要性
,并作噬菌体效价测定益处:生命科学研究,基因治
疗生产疫苗生物防治
危害:人和动物、植物的病原
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温和噬菌体:噬菌体感染细胞后,将其核
酸整合(插入)到宿主的核DNA上,并且
可以随宿主DNA的复制而进行同步复制,
在一般状况下,不引起寄主细胞裂解的噬
菌体。
一步生长曲线的三个周期:潜伏期,裂解
期,平稳期
温和噬菌体的生活周期(简图)
成
熟
溶原性循环
15.试述微生物营养中6大要素物质以及生理功能,并举例。
I)碳源:凡可被用来构成细胞物质或代谢产物中碳素来源的营养物质。
提供合成细胞物质及代谢物的原料;并为整个生理活动提供所需要能源(异养微生物),
无机碳源:如CO2和碳酸盐等。
有机碳源:糖与糖的衍生物(多糖:如淀粉、款皮、米犍等;饴糖;双糖;单糖),脂类、
醇类。有机酸、烧类、芳香族化合物以及多种含碳的化合物。
2)氮源:凡用来构成菌体物质或代谢产物中氮素来源的营养源。
提供合成细胞中含氮物,如蛋白质、核酸,以及含氮代谢物等的原料;少数细菌可以钱
盐、硝酸盐等氮源为能源,
无机氮:铁盐、硝酸盐、亚硝酸盐、氨、N2等;
有机氮:尿素,蛋白质及其降解产物(如陈、肽、氨基酸等)、牛肉音、鱼粉、花生饼
粉、黄豆饼粉、玉米浆、酵母膏等
3)无机盐:为微生物细胞生长提供碳、氮源以外的多种重要元素(包括大量元素和微量元
素)的物质,多以无机盐为形式共给。
4)生长因子:是一类对微生物正常生活所不可缺乏而需要量又不大,但微生物自身不能用
简朴的碳源或氮源合成,或合成量局限性以满足机体生长需要的有机营养物质。
噪吟和喀啜;氨基酸;维生素;其他
6)能源:指能为微生物的生命活动提供最初能最来源的营养物或辐射能。
化学物质一有机物(化能异养,同碳源):无机物(化能自养,不一样于碳源)
辐射能:光能自养和光能异养微生物的能源
☆16.根据碳源,能源和电子供体的不一样可将微生物划分为几种类型?试各举一例
营养类型碳源能源氢供体代表
H2s硫代硫酸钠等无机硫化
光能自养co2日光蓝细菌,绿烧细
物菌
紫硫细菌
光能异养日光有机物(异丙醉)红螺菌
co2
化能自养CO2或还京态无机物H2,H2S,Fe2+,亚硝酸盐硝化/硫化细菌,
碳酸盐氧化亚铁硫杆菌
氢细菌,
化能异养有机物有机物有机物大多异养菌:大
肠杆菌
光能自养型:以C02作为唯一碳源或重要碳源,并运用光能,以无机物如H2S,硫代硫酸
钠等无机硫化物作为供氢体将CO?还原成细胞物质,同步产生元素硫的一类微生物。
光能异氧型:以CO?作为唯一碳源或重要碳源,并运用光能,以有机物如异丙醇作为供氢
体将CO?还原成细胞物质的一类微生物,红螺菌属中的某些细菌。
化能自养型:以CO2或碳酸盐作为唯一碳源或重要碳源,以无机物氧化释放的化学能为能
源,运用电子供体如H?,FhS.Fe?:亚硝酸盐等使CO2还原成细胞物质的一类微生物。
化能异养型:以有机物作为碳源和能源的一类微生物。可分为腐生,寄生,兼性。
培养基:应科研或生产的需要,由人工配制的、适合于不一样微生物生长繁殖或积累代谢
产物用的营养基质(混合养料)。
培养基的配制四大原则
(一)培养基组分应适合微生物的营养特点(目的明确)
(二)营养物的浓度与比例应恰当(营养协调)
(三)物理化学条件合适(条件合适)
(四)根据培养目的选择原料及其来源(经济节省)
培养基配制的四大措施:1.生态模拟(调查所培养菌的生态条件,查看“嗜好",对"症''下
料-----初级天然培养基.)
2.查阅文献:(查阅、分析文献,调查前人的工作资料,借鉴人家的经验,以便从中得到
启发设计有自己特色的培养基配方.)
3.精心设计(借助优选法或正交试验设计法等措施.)
4、试验比较:(不一样培养基配方的选择比较,单种成分来源和数量的比较,几种成分
浓度比例调配的比较,小型试验放大到大型生产条件的比较,pH和温度试验。)
野生型(原养型):不需要生长因子而能在基础培养基上生长的菌株
营养缺陷型:由于自发或诱发突变等原因从野生型菌株产生的需要提供特定生长素物质才能
生长的菌株.
20.假如要从自然界中选育不一样微生物类群或具有不一样特性的微生物菌株,你怎样根据
学到的知识去选用以及制备不一样的培养基?
菌落计数法:稀释浇注平板法、稀释涂布分离法,原菌液的含菌量=菌落数X稀释度c
22.什么是纯培养?获得纯培养的措施有哪些?适应的范围是什么?
1)纯培养:微生物学中把从•种细胞或一群相似的细胞通过培养繁殖而得到的后裔,称纯
培养.
2)用固体培养基分离:稀释倒平板法(包括简朴易行,但易导致热敏感菌死亡)
稀释涂布平板法(简朴易行,但易导致机械损伤)
平皿划线分离法(分区划线合用于浓度较大的样品;持续划线
合用于浓度较小的样品。迅速、以便)
运用选择培养基分离法(从混杂的微生物群体中分离出某种微生物
用液体培养基分离:稀释法(适合于细胞较大的微生物如原生动物和藻类)
单细胞挑取法:用显微操作器直接分离单个细胞或单个个体进行培养。
24.试述同型乳酸发酵与异型乳酸发酵之间的不一样点。
同型乳酸发酵异型乳酸发酵
途径EMP糖酵解PK途径
产物乳酸2ATP乳酸,乙醇,CO2、ATP各1分子
菌种乳链球菌、植物乳杆菌短乳杆菌、肠膜明串珠菌
同型乳酸发酵:在糖的发酵中,产物只有乳酸并产生2ATP的发酵。
异型乳酸发酵:产物除乳酸外尚有乙醇与CO2并产生1ATP的发酵。
31.试就青霉素,链霉素,磺胺类药物的作用机制阐明为何这些药只作用于细菌而对人体没
有毒害作用?
青霉素药理作用是干扰细菌细胞壁的合成。青霉素的构造与细胞壁的成分粘肽构造中的
D-丙氨酰-D-丙氨酸近似,可与后者竞争转肽酶,阻碍粘肽的形成,导致细胞壁的缺损,使
细菌失去细胞壁的渗透屏障,对细菌起到杀灭作用。哺乳动物无细胞壁,不受p-内酰胺类
药物的影响,因而本类药具有对细菌的选择性杀菌作用,对宿主毒性小。
对革兰阳性球菌及革兰阳性杆菌、螺旋体、梭状芽抱杆菌、放线菌以及部分拟杆菌有抗菌
作用。
磺胺类与甲氧茉咤(TMP)可分别克制二氢叶酸合成酶与二氢叶酸还原酶,阻碍叶酸代
谢,最终影响核酸合成,从而克制细菌的生长和繁殖
硝酸盐呼吸/反硝化作用:硝酸盐还原菌将硝酸盐还原成亚硝酸盐,并深入还原成NO、
N2O、N2的过程。(反硝化细菌:地衣芽狗杆菌)
硝化作用,在好氧条件下,无机化能硝化细菌将氮氮化成硝酸盐的过程。
硫酸盐呼吸:在厌氧条件下,硫酸盐还原细菌(脱硫弧菌)以外源硫酸盐(SO42-)作为
最终电子受体的呼吸。
基因重组:把两个性状不一样的个体内的遗传基因转移在一起,通过遗传分子间的重新组
合,形成新遗传型个体的方式。
ED途径是少数缺乏完整EMP途径的微生物的一种替代途径,未发现存在于其他生物中。
是微生物特有的代谢途径:ED途径可不依赖于EMP与HMP而单独存在
化能异养三种产能方式:有氧呼吸,无氟呼吸(反硝化作用,反硫化作用),发酵(不经
呼吸链)
盐生盐杆菌细胞膜含细菌视紫红质。
32.什么叫生长曲线?单细胞微生物的经典生长曲线可以分为几种时期?划分根据?
1)将少许单细胞的纯培养,接种到一恒定容积的新鲜液体培养基中,在合适条件下培养,
每隔一定期间取样,测菌细胞数目。以培养时间为横坐标,以细菌增长数目的对数为纵坐
标,绘制所得的曲线。是反应细菌生长繁殖规律的曲线。
2)缓慢期:细菌数量维捋恒定,或增长很少,基本平行于横轴。
对数生长期:细菌生长和分裂速率最大,平衡生长。其对数与时间呈直线关系。
稳定生长期:活菌数最高并维持稳定。
衰亡期:细菌代谢活性减少,细菌衰老并出现白溶。死亡细菌以对数方式增长。
50.简介机体对病原微生物的防御机制。
机体固有的抵御内外致病因子侵害的功能。机体常常处在多种致病因子的威胁下,如生物性
因子(细菌、病毒、真菌、寄生虫等)、物理性因子(如过冷、过热、电、放射等)、化学性因
子(如强酸、强碱、药物等),以及机体自身免疫反应引起的损伤等,都也许引起机体的损
害。同步,机体自身也具有完整的防御体系,以保护机体免遭致病因子的损害。机体防御
功能被破坏,则疾病发生。疾病发生后,机体的防御功能乂能尽量消除致病因子,减少损害,
使病变愈合,使受损害组织的功能尽量恢复。但有时损伤。
灭菌:采用强烈的理化原因杀灭任何物体内外部的一切微生物的措施,称为灭菌。
常用的化学措施:消毒剂与防腐剂,化学治疗剂
常用的物理措施:高温和低温,辐射作用,干燥和渗透压,过滤,超声波
焚「法:简朴彻底,破坏极大;镣子接种环试管等无经济价值物品
干热|
干收热空气灭菌法:空气传热穿透力差故温度高时间长;玻璃,陶瓷,金属
高「蒸汽灭菌法:耐高温物品,玻璃仪器,含水或不含水物品;注意要排净冷空气,
灭菌终了要缓慢降压,完毕后趁热取出物品。
j煮沸消毒法:杀死所有营养细胞和部分芽抱;注射器,解剖用品
巴卜德消毒法:较低温度,保持食品的营养风味。牛奶(试验室不用)
间M灭菌法:长亚蒸汽反惹几次,不耐热的培养基和药物等。
大题:
试验室常用的5种灭菌措施:焚烧法,干燥热空气灭菌法,高压蒸汽灭菌法,煮沸消毒
法,过滤(血清,酶,维生素)。
灼烧灭菌法(焚烧法)(incineration)
措施:是将被灭菌物品在火焰中燃烧,使所有的生物质碳化。简朴、彻底,但对被灭菌物
品的破坏极大。
合用范围:无经济价值的物品灭菌,及不怕烧的试验器具,如接种环、镜子、试管或三角
瓶的灭菌等。
效果:最彻底的灭菌,包括芽抱。
干燥热空气灭菌法(hot・airoven)
操作:将物品放入电热恒温干燥箱(烘箱)内,然后升温至16()℃—17()°C,维持1一2
小时。
合用范围:适合玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌,不适合液体样品及棉花、纸张、纤维和橡
胶类物质的灭菌。
效果:最彻底的灭菌,包括芽泡。
高压蒸汽灭菌法
措施:121℃(lkg/cm2或15磅/英寸2)维持20min。
II2℃(0.5kg/cm2或8唠/英寸2)20-30mino
115℃(0.75kg/cm2或11磅/英寸2)20-30min(.
根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度
例如:生理盐水、营养琼脂等培养基用121
含前萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112°C。
合用范围:耐高温物品,玻璃仪器、含水或不含水的物品。
效果:相似时间和温度比干热灭菌法更有效。
煮沸消毒法
物品在水中煮沸15min,可杀死所有营养细胞和一部分芽胞。在水中加入1%的Na2c03
或2—5%的石碳酸效果更好。此法适合注射器和解剖用品的消毒。
巴斯德消毒法(Pasteurization):
用较低的温度来杀死其中的病源微生物,这样既保持食品的营养风味,又进行了消毒
该法一般是将待消毒的液体食品置于61.7—62.8。(3处理30min或716C度处理15-30min,
然后迅速冷却。即可到达消毒目的。
低温长时法:62.9℃30min处理牛奶
高温瞬时法:71.6℃15s处理牛奶
超高温巴斯德灭菌法让液体食品停留在140c左右3-4s,急剧冷却至75℃,经匀质化后
冷却至20℃。
试验室好氧微生物的液体培养措施(操作程序,特点):试管培养,三角瓶(摇瓶)培
养,台式发酵罐培养
44.微生物菌种保藏的原理是什么,基于这些原理菌种保藏可分为哪些措施?其重要优缺
陷?
原理:低温,干燥,缺氧
①选用优良的纯种(最佳是休眠体,如分生抱子、芽胞等)
②发明减少微生物代谢活动强度,生长繁殖受克制,难以发生突变的环境条件
措施:
①斜面低温保藏法:菌种管置4c冰箱、超低温冰箱(-80°C)保藏,定期传代。低温
下,微生物代谢强度明显下降。(保留2到4个月。长处:简朴以便,可随时检查状态;
缺陷:时叵短,易变异要定期转接)
②石蜡油封藏法(隔绝空气保藏法):橡皮塞取代棉塞、加石蜡油。合用各大类菌种、1-2
年
③砂土管保藏法:干燥无营养,保藏时间1〜。合用于产胞子种类
④真空冷冻干燥法:加有保护剂的菌悬液在冻结状态下予以真空干燥。合用于多种微生
物,便于大量保藏,菌种存活时间长,5~,是目前最佳的保藏措施。
⑤液氮超低温保臧法:将菌种置于保护剂中,预冻后保留在液氮超低温冰箱中(-
196℃)oo合用于多种微生物的较理想的保藏措施。缺陷:价格太贵。
菌种保藏机构
中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM)
美国的经典菌种保藏中心(ATCC)
英国国家经典菌种保藏所(NCTC)
法国里昂巴斯德研究所(IPL)
选择题:遗传学的三个经典试验:肺炎双球菌的转化试验,噬菌体的感染试验,烟草花叶
病毒的重建试验。证明了核酸是遗传变异的物质基础。
基因突变的应用:诱变育种
营养缺陷型:经诱变产生的某些合成能力出现缺陷,而必须在培养基内加入对应有机养分
才能正常生长的变异菌株,
大题:产量突变菌株或者营养缺陷菌株的筛选(五大环节同样,在筛选的环节不一样样,
要展开)
选择合适的出发菌株f制备待处理的菌悬液f诱变处理f筛选:初筛复筛f保藏和扩大试
验。
1.出发菌株的选择:
出发菌株------用来育种处理的
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