检验科血液凝固功能检测操作规范

演讲人：日期:检验科血液凝固功能检测操作规范目录CATALOGUE01标本采集与处理02检测项目流程03仪器操作维护04质量控制管理05结果审核报告06生物安全防护PART01标本采集与处理抗凝剂选择与比例控制推荐使用3.2%或3.8%枸橼酸钠溶液，因其能有效螯合钙离子，确保凝血因子活性稳定，避免假性结果。枸橼酸钠抗凝剂优选抗凝剂与血液比例需精确为1:9（真空采血管），比例偏差超过±10%可能导致凝血时间（如PT、APTT）检测结果异常。严格比例控制静脉采血规范技术要点穿刺部位选择优先选择肘前静脉，避免反复穿刺或淤血部位，确保血流顺畅，防止组织因子混入导致标本溶血或凝血激活。止血带使用时限绑扎时间不超过1分钟，长时间压迫可能引起血液浓缩或局部纤溶系统激活，影响凝血因子检测准确性。采血针规格要求使用21-23G标准针头，过细针头易导致剪切力诱发血小板活化，过粗针头可能增加血管损伤风险。标本标识与转运要求双人核对标识标本采集后需立即标注患者姓名、唯一编号及采集时间，并由采集者与接收者双人核对，防止样本混淆或信息遗漏。转运温度与时效全血标本需在2小时内（室温18-25℃）送达实验室，若延迟需离心分离血浆并冷冻保存（-20℃以下），避免凝血因子降解。拒收标准明确溶血（血红蛋白>0.5g/L）、凝固、量不足（<90%标称体积）或标识不清的标本需拒收并记录，确保检测前质量可控。PART02检测项目流程试剂复溶与预温标准试剂复溶需在洁净实验环境下进行，使用专用去离子水或配套稀释液，严格按说明书要求体积复溶，避免反复冻融导致效价降低。复溶环境控制复溶后试剂需在37±1℃恒温水浴箱中预温至少15分钟，确保试剂活性完全恢复，但总预温时间不得超过4小时以防降解。预温时间与温度每批复溶试剂需同步检测正常和异常质控血浆，确保PT/APTT结果在允许范围内，偏差超过10%需重新配制。质量控制验证静脉血采集后需立即轻柔颠倒混匀5-8次，3000rpm离心15分钟获取乏血小板血浆，溶血或脂血样本需标记并评估干扰程度。样本加样精准操作规范样本预处理要求使用校准后的微量移液器，加样体积误差需小于1%，建议采用反向吸液技术减少气泡干扰，加样后10秒内启动检测。加样体积精度控制优先进行APTT检测（对接触激活敏感），其次PT检测，最后进行纤维蛋白原测定，避免交叉污染影响结果。多项目检测顺序光学通道校准实时监测反应曲线拐点，异常曲线（如延迟启动、平台期波动）需结合凝固时间人工复核，必要时重新检测。反应过程监控环境参数记录持续监控反应舱温度（37±0.5℃）、机械臂运动轨迹及磁珠搅拌频率，偏离设定参数时自动终止检测并报警。每日检测前执行光电比色系统基线校准，使用配套校准品验证吸光度线性范围（通常0.1-2.5OD），漂移值需小于5%。检测系统启动与监控PART03仪器操作维护每日开机校准程序启动设备后需完成系统预热，运行内置自检程序，确保光学模块、温控系统及液路压力参数处于标准范围。仪器预热与自检质控品检测环境参数记录使用配套质控血浆进行PT、APTT、FIB等项目校准，验证仪器精密度与准确性，偏差超过±5%需重新校准。检查实验室温湿度是否符合要求（温度18-25℃，湿度30-70%），记录设备运行日志并签字确认。反应杯更换与清洁反应杯拆卸流程关闭液路阀门后取出旧反应杯，避免残留试剂污染机械臂，使用无尘棉签清洁杯槽内壁及传感器触点。新杯安装与测试废弃反应杯按生物危害废物处置，接触过凝血试剂的耗材需用1%次氯酸钠溶液浸泡后再丢弃。安装前检查反应杯批次号及有效期，装载后执行空杯吸光度检测，确保基线值≤0.02ABS方可用于样本检测。废液处理规范液路系统维护每季度用标准滤光片校准光度计波长精度，清洁比色窗时使用镜头纸蘸取无水乙醇单向擦拭。光学组件校准机械部件润滑对样本针轨道、转盘轴承等金属部件涂抹高真空硅脂，降低磨损并保证运动轨迹精度。每月拆卸泵管检查老化裂纹，冲洗管路时交替使用去离子水与专用清洗液，防止蛋白沉积堵塞。定期维护保养步骤PART04质量控制管理每日开机后首次检测在仪器启动并完成校准后，必须立即运行质控品检测，确保仪器状态稳定且试剂性能符合要求。每批次样本检测前在开展患者样本检测前，需穿插质控品检测，验证当前检测系统的可靠性，避免因试剂或仪器波动导致结果偏差。更换试剂或校准后新试剂批号启用或完成校准程序后，必须重新检测质控品，确认检测系统的精密度和准确度符合标准。周期性监控即使无试剂更换或仪器维护，仍需按实验室规定周期（如每8小时）运行质控品，持续监控系统稳定性。室内质控品检测频率质控数据记录与分析电子化记录系统所有质控数据应实时录入实验室信息管理系统（LIS），包括检测时间、操作人员、质控品批号及结果数值，确保数据可追溯。多规则质控判读采用Westgard规则或其他多规则逻辑分析质控数据，识别随机误差或系统误差，如连续超出±2SD需启动预警机制。趋势分析与图形化展示通过Levey-Jennings质控图动态观察数据波动，结合移动均值或标准差计算，早期发现潜在漂移趋势。周期性数据回顾每月汇总质控数据，计算累积均值、CV值等指标，评估长期精密度，并与厂商声明或行业标准对比。失控处理与纠正措施发现失控后，立即重复检测同一质控品，排除操作失误或临时干扰因素，确认失控是否持续存在。即时复测与确认针对不同失控原因采取对应措施，如更换试剂、重新校准、联系工程师维修，并记录所有干预步骤及效果验证结果。纠正措施分级实施依次检查试剂有效期、仪器状态（如加样针堵塞、温控异常）、质控品储存条件及校准曲线有效性，定位问题根源。系统性排查流程010302失控期间检测的患者样本需暂停报告，待问题解决后重新检测或评估潜在影响，必要时通知临床科室。患者样本追溯与重测04PART05结果审核报告由资深检验师对异常样本进行复测，包括重新上机检测、手工复核或更换检测方法，确保结果可靠性。多环节复核机制若复核后仍存疑，需与申请医生沟通患者病史或用药情况，并在系统中详细记录复核过程及结论。临床沟通与记录01020304检验人员需通过仪器报警、结果偏离参考范围或临床不符等情况识别异常结果，并标记为待复核状态。初步异常识别经技术负责人签字确认后，方可发布异常结果报告，同时归档原始数据和复核记录备查。最终结果确认异常结果复核流程危急值报告制度危急值定义与清单明确列出凝血功能检测中的危急值标准（如PT、APTT延长超过临界值），并定期更新清单以适应临床需求。01即时通报流程检测到危急值后，检验人员需立即电话通知临床科室，随后发送书面报告，并记录接听人姓名及通知时间。双人核对机制危急值结果需由两名授权人员共同核对仪器原始数据、质控状态及患者信息，避免误报或漏报。追踪与反馈要求临床科室在接收到危急值后反馈处理措施，检验科定期汇总分析危急值案例以优化流程。020304报告签发审核权限分级授权管理初级检验人员可签发常规结果，异常或复杂病例报告需由中级以上职称人员审核，危急值报告必须由科室主任签发。02040301审核内容标准化审核时需核查患者信息一致性、检测时间逻辑性、质控数据合规性及结果与临床的吻合度。电子签名系统采用生物识别或密码保护的电子签名系统，确保报告签发人身份可追溯且不可篡改。归档与调阅权限已签发报告按加密格式归档，仅限授权人员调阅，修改需提交变更申请并附书面说明。PART06生物安全防护个人防护装备规范防护服与隔离衣选择必须穿戴一次性无纺布防护服或防水隔离衣，确保覆盖全身并避免血液渗透。高风险操作需加穿防液体喷溅围裙。030201手套与护目镜使用佩戴双层乳胶手套（内层无菌手套+外层防刺穿手套），操作中若涉及离心或开盖步骤需佩戴侧面全封闭护目镜或面屏。口罩与鞋套要求使用N95及以上级别口罩防止气溶胶吸入，鞋套需具备防滑底纹且完全包裹实验鞋，离开操作区前需消毒后丢弃。标本溢洒处理流程小范围溢洒处理立即用吸附材料（如消毒纸巾或专用吸附颗粒）覆盖污染区，由外向内喷洒含氯消毒剂（有效氯浓度≥5000mg/L），作用30分钟后清除废弃物。锐器污染特殊处理若溢洒物含破碎采血管或针头，需先用止血钳夹取锐器放入耐刺穿容器，再按感染性废物流程处置，严禁徒手接触。大范围溢洒处置启动生物安全应急预案，封锁污染区域，使用专用消毒设备（如电动喷雾器）进行终末消毒，处理人员需升级至三级防护（包括正压呼吸器）。血液标本、废弃凝血试剂及接触标本