2025年生化检测考试题及答案

2025年生化检测考试题及答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.关于ELISA双抗体夹心法的描述，错误的是（）A.需使用针对同一抗原不同表位的两种抗体B.待测抗原需同时与包被抗体和酶标抗体结合C.适用于检测大分子抗原（如蛋白质）D.若待测抗原浓度过高可能出现钩状效应E.显色强度与待测抗原浓度呈严格正相关2.实时荧光定量PCR（qPCR）中，SYBRGreenI荧光染料的作用机制是（）A.特异性结合引物二聚体B.嵌入双链DNA的小沟区发出荧光C.与单链DNA的磷酸基团共价结合D.标记在探针5'端并被3'端淬灭基团抑制E.仅与目标扩增产物的特定序列结合3.以下哪种生化检测项目的参考区间需要根据性别进行区分（）A.血清总蛋白B.空腹血糖C.血清肌酸激酶（CK）D.糖化血红蛋白（HbA1c）E.C反应蛋白（CRP）4.血气分析中，若患者PaCO2为55mmHg（正常35-45mmHg），HCO3-为32mmol/L（正常22-27mmol/L），pH为7.32（正常7.35-7.45），最可能的酸碱平衡紊乱类型是（）A.代谢性酸中毒B.呼吸性酸中毒合并代谢性碱中毒C.呼吸性酸中毒代偿期D.代谢性碱中毒E.呼吸性碱中毒合并代谢性酸中毒5.质谱技术在临床生化检测中的应用不包括（）A.新生儿遗传代谢病筛查（如苯丙酮尿症）B.治疗药物监测（如免疫抑制剂血药浓度）C.肿瘤标志物的定性检测（如CEA）D.维生素D代谢物的定量分析E.氨基酸谱和脂肪酸谱的分析6.关于糖化血红蛋白（HbA1c）检测的描述，正确的是（）A.反映近1-2周的平均血糖水平B.检测结果受近期饮食或运动影响显著C.标准化方法需采用高效液相色谱（HPLC）或免疫比浊法D.糖尿病诊断切点为≥6.0%（NGSP标准）E.溶血性贫血患者检测结果会假性升高7.全自动生化分析仪的交叉污染主要来源于（）A.样本针或试剂针清洗不彻底B.比色杯光学性能下降C.反应温度控制偏差D.校准品赋值不准确E.试剂稳定性不足8.用于评估肾小球滤过率（GFR）的最佳内源性标志物是（）A.血清尿素氮（BUN）B.血清肌酐（Scr）C.胱抑素C（CysC）D.β2-微球蛋白（β2-MG）E.尿酸（UA）9.以下哪种检测方法属于均相免疫测定技术（）A.化学发光免疫分析（CLIA）B.时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）C.酶联免疫吸附试验（ELISA）D.速率法免疫比浊E.放射免疫分析（RIA）10.血清淀粉酶（AMY）升高最常见于（）A.急性胰腺炎B.慢性肾炎C.甲状腺功能亢进D.心肌梗死E.肝硬化11.关于血氨检测的注意事项，错误的是（）A.需使用肝素抗凝管采集血样B.样本应在采集后30分钟内离心分离血浆C.避免溶血（红细胞内氨浓度是血浆的2-3倍）D.可使用EDTA抗凝管替代肝素管E.检测前患者需禁食高蛋白饮食12.以下哪种技术可用于检测微小残留病灶（MRD）的基因突变（）A.普通PCRB.数字PCR（dPCR）C.免疫印迹（WesternBlot）D.透射电镜E.流式细胞术（FCM）13.血清铁蛋白（SF）降低常见于（）A.缺铁性贫血B.慢性炎症性贫血C.溶血性贫血D.铁粒幼细胞性贫血E.白血病14.用于评估胰腺外分泌功能的检测项目是（）A.血清脂肪酶（LPS）B.粪便弹性蛋白酶-1（FE-1）C.血清胰高血糖素D.尿淀粉酶（UAMY）E.血清胃泌素15.以下哪项是干扰生化检测结果的常见内源性物质（）A.胆红素（溶血时释放）B.肝素（抗凝剂残留）C.脂血（乳糜微粒）D.类风湿因子（RF）E.EDTA（螯合金属离子）二、简答题（每题8分，共40分）1.简述ELISA双抗体夹心法的主要操作步骤及关键质量控制要点。2.实时荧光定量PCR（qPCR）中“Ct值”的定义是什么？其与初始模板量的关系如何？请用公式说明。3.质谱技术（如LC-MS/MS）在代谢组学检测中的优势有哪些？举例说明其在临床中的具体应用。4.血气分析报告中通常包含哪些核心指标？简述pH、PaCO2、HCO3-在判断酸碱平衡紊乱中的作用。5.糖化血红蛋白（HbA1c）检测的标准化为何重要？目前常用的标准化方法有哪些？其临床应用价值体现在哪些方面？三、案例分析题（共30分）案例1（15分）：患者男性，58岁，因“多饮、多尿2周，意识模糊1天”入院。实验室检查结果：空腹血糖28.6mmol/L（参考值3.9-6.1mmol/L），血酮体3.2mmol/L（参考值<0.6mmol/L），血气分析：pH7.25，PaCO228mmHg，HCO3-12mmol/L，BE（碱剩余）-10mmol/L。问题：（1）该患者最可能的诊断是什么？依据是什么？（2）分析血气结果提示的酸碱平衡紊乱类型及代偿机制。（3）需进一步检测哪些生化指标以评估病情严重程度？案例2（15分）：患儿女性，3月龄，因“发育迟缓、反复呕吐”就诊。串联质谱（MS/MS）筛查显示：苯丙氨酸（Phe）浓度12mg/dL（参考值<2mg/dL），酪氨酸（Tyr）浓度1.5mg/dL（参考值2-6mg/dL），Phe/Tyr比值6.0（参考值<2.0）。问题：（1）该患儿最可能的疾病是什么？诊断依据是什么？（2）简述该疾病的发病机制及生化检测的关键指标。（3）若未及时干预，可能导致的严重后果有哪些？参考答案一、单项选择题1.E（显色强度在一定范围内与抗原浓度正相关，超过线性范围会出现平台期或钩状效应）2.B（SYBRGreenI是非特异性染料，嵌入双链DNA小沟区发出荧光）3.C（男性CK参考区间通常高于女性）4.C（PaCO2↑提示呼吸性酸中毒，HCO3-代偿性↑，但pH未恢复正常，为代偿期）5.C（质谱主要用于定量或半定量分析，肿瘤标志物定性检测多用免疫方法）6.C（HbA1c反映2-3个月平均血糖，不受短期波动影响；诊断切点为≥6.5%；溶血性贫血时红细胞寿命缩短，结果假性降低）7.A（交叉污染主要因采样针/试剂针清洗不彻底导致样本或试剂残留）8.C（CysC受年龄、性别、肌肉量影响小，是评估GFR更敏感的指标）9.D（均相免疫测定无需分离游离与结合标记物，速率法免疫比浊属于此类）10.A（AMY升高最常见于急性胰腺炎，发病后2-12小时开始升高）11.D（EDTA可与氨反应干扰检测，必须使用肝素抗凝）12.B（dPCR通过单分子扩增实现绝对定量，可检测低丰度突变）13.A（SF是铁储存指标，降低提示缺铁）14.B（FE-1反映胰腺外分泌功能，不受消化酶影响）15.D（RF是内源性异嗜性抗体，可干扰免疫检测；胆红素、脂血为外源性干扰）二、简答题1.操作步骤：①包被：将捕获抗体固定于固相载体（如微孔板）；②封闭：用无关蛋白（如BSA）封闭未结合位点；③加样：加入待测样本，抗原与包被抗体结合；④加酶标抗体：加入针对抗原另一表位的酶标记抗体，形成“包被抗体-抗原-酶标抗体”复合物；⑤洗涤：去除未结合的酶标抗体；⑥加底物：酶催化底物显色；⑦终止反应并检测吸光度。关键质控要点：①抗体特异性（避免交叉反应）；②包被浓度（需优化以避免非特异性结合）；③洗涤彻底性（防止残留干扰）；④温育时间与温度（影响抗原抗体结合效率）；⑤底物稳定性（避免提前分解）；⑥设置阴阳性对照（监控实验有效性）。2.Ct值（循环阈值）定义为荧光信号达到设定阈值时所经历的PCR循环数。Ct值与初始模板量的对数呈线性负相关，公式为：Ct=-k·log(初始模板量)+b（k为斜率，b为截距）。初始模板量越多，Ct值越小；反之，Ct值越大。该关系基于PCR指数扩增阶段的规律，是qPCR定量的数学基础。3.质谱优势：①高灵敏度（可检测pg级物质）；②高特异性（通过质荷比和碎片离子定性）；③多指标同时检测（如氨基酸、脂肪酸、维生素等）；④宽线性范围（覆盖不同浓度代谢物）。临床应用举例：新生儿遗传代谢病筛查，通过LC-MS/MS同时检测血滤纸片中的氨基酸、酰基肉碱，可筛查苯丙酮尿症、甲基丙二酸血症等20余种疾病；治疗药物监测，如检测他克莫司、环孢素等免疫抑制剂的血药浓度，指导个体化用药。4.核心指标：pH、PaCO2（动脉血二氧化碳分压）、PaO2（动脉血氧分压）、HCO3-（碳酸氢根）、BE（碱剩余）、SaO2（血氧饱和度）。作用：①pH直接反映血液酸碱度（<7.35为酸血症，>7.45为碱血症）；②PaCO2是呼吸性指标（↑提示呼吸性酸中毒，↓提示呼吸性碱中毒）；③HCO3-是代谢性指标（↓提示代谢性酸中毒，↑提示代谢性碱中毒）。三者结合可判断酸碱紊乱类型（如pH↓+PaCO2↑+HCO3-↑为呼吸性酸中毒代偿；pH↓+PaCO2↓+HCO3-↓为代谢性酸中毒代偿）。5.标准化重要性：不同检测方法结果差异可能导致临床判断错误（如诊断糖尿病切点不一致）。常用方法：①基于NGSP（美国国家糖化血红蛋白标准化计划）的高效液相色谱（HPLC）法；②免疫比浊法（需溯源至NGSP）；③毛细管电泳法。临床价值：①糖尿病诊断（HbA1c≥6.5%）；②评估长期血糖控制（2-3个月平均水平）；③指导治疗方案调整（目标通常<7.0%）；④预测糖尿病并发症风险（每降低1%，微血管并发症风险降低约37%）。三、案例分析题案例1（1）诊断：糖尿病酮症酸中毒（DKA）。依据：高血糖（28.6mmol/L）、高血酮（3.2mmol/L）、意识障碍，血气提示酸中毒（pH7.25<7.35）。（2）酸碱紊乱类型：代谢性酸中毒（HCO3-↓至12mmol/L，BE-10mmol/L<-2mmol/L）合并呼吸性代偿（PaCO2↓至28mmHg，通过肺过度通气排出CO2，降低血中H2CO3浓度）。（3）需检测：血电解质（K+、Na+、Cl-，DKA常伴低钾）、肾功能（Scr、BUN，评估脱水及肾损伤）、乳酸（排除乳酸酸中毒）、尿常规（酮体、葡萄糖）、渗透压（评估高渗状态）。案例2（1）疾病：苯丙酮尿症（PKU）。依据：质谱显示Phe显著升高（12mg/dL>2mg/dL），Tyr降低（1.5mg/dL<2mg/dL），