2025年无菌试题及答案

2025年无菌试题及答案一、单项选择题（每题1分，共20分）1.以下哪种灭菌方式的无菌保证水平（SAL）最高？A.湿热灭菌（121℃，15min）B.干热灭菌（160℃，2h）C.辐射灭菌（25kGy）D.过滤除菌（0.22μm滤膜）2.无菌药品生产洁净区A级区的沉降菌（90mm培养皿，暴露4h）最大允许值为？A.0CFU/皿B.1CFU/皿C.2CFU/皿D.5CFU/皿3.某注射液采用过度杀灭法灭菌，其F0值应不低于？A.8B.12C.15D.204.培养基模拟灌装试验中，对于最终灭菌产品的无菌灌装模拟，最小灌装数量应不低于？A.1000支B.2000支C.3000支D.5000支5.以下哪种微生物最可能通过0.22μm除菌级滤器？A.大肠杆菌（直径约2μm）B.支原体（直径约0.1-0.3μm）C.枯草芽孢杆菌（直径约1μm）D.白色念珠菌（直径约3-5μm）6.无菌原料药结晶工序应在以下哪个洁净级别区域进行？A.D级B.C级背景下的局部A级C.B级背景下的局部A级D.A级7.湿热灭菌设备的温度分布验证中，空载热分布测试的温度波动范围应不超过？A.±0.5℃B.±1℃C.±1.5℃D.±2℃8.无菌生产区工作服的清洗应使用？A.纯化水B.注射用水C.饮用水D.去离子水9.某冻干制剂在轧盖后进行密封性检测，首选的非破坏性检测方法是？A.染色渗透法B.高压放电法C.微生物挑战法D.真空衰减法10.无菌工艺验证中，连续成功的验证批次数量应为？A.1批B.2批C.3批D.5批11.干热灭菌适用于以下哪种物料的灭菌？A.含蛋白的注射液B.玻璃安瓿C.塑料瓶D.液体培养基12.洁净区浮游菌检测时，采样流量为100L/min，采样时间10min，若检测结果为5CFU，则浮游菌浓度为？A.5CFU/m³B.50CFU/m³C.500CFU/m³D.5000CFU/m³13.无菌药品生产中，未灭菌的胶塞转运至B级区前应经过？A.酒精擦拭B.臭氧灭菌C.湿热灭菌D.在线清洗（CIP）+在线灭菌（SIP）14.以下哪项不属于无菌保证的关键要素？A.人员培训B.设备校准C.原料价格D.环境监测15.过滤除菌时，为防止滤膜堵塞，药液的最大流速应控制在？A.0.1m/sB.0.5m/sC.1m/sD.2m/s16.无菌灌装线的气流模式验证中，应确保关键操作区域的气流为？A.乱流B.层流C.旋流D.自然对流17.培养基模拟灌装的最长模拟时间应不超过实际生产时间的？A.1.2倍B.1.5倍C.2倍D.3倍18.湿热灭菌中，F0值的计算基于以下哪种微生物的耐热性？A.嗜热脂肪芽孢杆菌B.枯草芽孢杆菌C.金黄色葡萄球菌D.黑曲霉19.无菌生产区人员手消毒应使用？A.75%乙醇B.2%戊二醛C.0.1%新洁尔灭D.3%过氧化氢20.某产品灭菌后生物指示剂（嗜热脂肪芽孢杆菌）培养7天后未生长，说明？A.灭菌过程完全杀灭微生物B.生物指示剂失效C.需延长培养时间至14天确认D.灭菌温度可能未达标二、多项选择题（每题2分，共20分。每题至少2个正确选项，多选、少选、错选均不得分）21.以下属于无菌药品生产中“关键操作”的是？A.药液配制B.胶塞清洗C.灌装封口D.轧盖22.湿热灭菌设备的验证项目包括？A.空载热分布B.满载热穿透C.生物指示剂挑战试验D.冷却速率测试23.洁净区环境监测的参数包括？A.温度B.相对湿度C.压差D.悬浮粒子数24.过滤除菌的局限性包括？A.无法去除病毒B.可能吸附药物成分C.不能用于高粘度液体D.需进行滤膜完整性测试25.无菌工艺验证的内容包括？A.人员操作模拟B.环境监测结果分析C.设备运行参数确认D.培养基模拟灌装26.干热灭菌的适用范围包括？A.玻璃器具B.金属器械C.油类物质D.塑料包装材料27.无菌生产区人员行为规范包括？A.避免剧烈动作B.减少说话次数C.定期更换手套D.直接接触已灭菌物品28.灭菌效果的影响因素包括？A.微生物初始负荷B.物品装载方式C.灭菌介质穿透力D.操作人员资质29.无菌药品包装材料的质量要求包括？A.无热原B.化学稳定性C.密封性D.透明度30.培养基模拟灌装失败的可能原因包括？A.人员操作污染B.培养基配制错误C.环境监测超标D.设备故障三、判断题（每题1分，共10分。正确填“√”，错误填“×”）31.无菌药品的最终灭菌产品可以在D级区完成灌装。（）32.过滤除菌的滤膜使用后无需进行完整性测试。（）33.湿热灭菌中，F0值是指以121℃为参考温度，将实际灭菌过程中不同温度下的灭菌时间折算为等效的121℃灭菌时间。（）34.洁净区A级区的气流应从关键操作区域向非关键区域流动。（）35.无菌原料药的精烘包工序应在B级背景下的局部A级区进行。（）36.干热灭菌的温度通常高于湿热灭菌，因此适用于所有不耐热物料。（）37.培养基模拟灌装的阳性对照应使用已知污染的培养基。（）38.无菌生产区的压差应保持从低洁净区向高洁净区递增。（）39.灭菌后的物品可以在常温下无限期保存。（）40.浮游菌检测的采样点应包括关键操作点和人员活动频繁区域。（）四、简答题（每题6分，共30分）41.简述湿热灭菌与干热灭菌的主要区别（从灭菌原理、适用范围、参数要求三方面回答）。42.列出无菌药品生产中洁净区环境监测的主要项目及A级区的标准（至少4项）。43.说明培养基模拟灌装试验的目的及合格标准。44.过滤除菌时，为何需要进行滤膜的完整性测试？常用的测试方法有哪些？45.简述无菌工艺验证的“三批连续成功”原则及其意义。五、案例分析题（每题15分，共30分）46.某企业生产的无菌注射液在灭菌后微生物检测中发现1批样品阳性（检测到枯草芽孢杆菌）。已知该批次灭菌参数为121℃、15min（F0=12），灭菌柜空载热分布测试显示温度波动±1℃，满载热穿透测试显示最冷点温度120℃、持续时间16min。请分析可能的原因，并提出调查与纠正措施。47.某冻干制剂生产线在培养基模拟灌装试验中，第3批出现1支样品长菌（共灌装3000支）。该线此前2批模拟灌装均未长菌，环境监测数据显示B级区浮游菌1CFU/m³，A级区沉降菌0CFU/皿，人员操作符合SOP。请分析可能的污染来源，并说明后续处理措施。答案一、单项选择题1-5：C、A、B、A、B6-10：C、B、B、D、C11-15：B、B、D、C、B16-20：B、B、A、A、A二、多项选择题21：AC22：ABCD23：ABCD24：ABCD25：ABCD26：ABC27：ABC28：ABC29：ABC30：ABCD三、判断题31：×32：×33：√34：√35：√36：×37：×38：×39：×40：√四、简答题41.主要区别：（1）灭菌原理：湿热灭菌通过饱和蒸汽的潜热使微生物蛋白质变性；干热灭菌通过高温使微生物脱水、氧化。（2）适用范围：湿热灭菌适用于耐高温的液体、培养基、器械；干热灭菌适用于玻璃、金属、油类等不耐湿物料。（3）参数要求：湿热灭菌通常121℃、15min（F0≥8）；干热灭菌需160℃、2h或170℃、1h（适用于除热原时需250℃、30min）。42.监测项目及A级标准：（1）悬浮粒子：≥0.5μm≤3520个/m³，≥5μm≤0个/m³；（2）沉降菌（4h）：0CFU/皿；（3）浮游菌：≤1CFU/m³；（4）表面微生物（接触碟）：≤1CFU/碟；（5）压差：相对于相邻低洁净区≥10Pa。43.目的：模拟实际生产过程，验证无菌灌装工艺的可靠性，确认人员操作、设备、环境等要素对无菌保证的贡献。合格标准：连续3批模拟灌装中，每批灌装数量≥3000支时，污染数≤0；若灌装数量<3000支，污染数≤1且需调查；阳性对照需全部长菌，阴性对照无菌生长。44.原因：滤膜可能存在物理破损或缺陷，完整性测试可确认滤膜在过滤前后的结构完整性，确保除菌效果。常用方法：气泡点测试（检测滤膜最大孔径）、扩散流测试（检测微小孔径泄漏）、压力保持测试（监测压力下降速率）。45.原则：无菌工艺验证需连续完成3批成功的模拟灌装试验（每批均符合合格标准）。意义：通过多批次验证排除偶然因素干扰，确认工艺处于稳定受控状态，证明人员、设备、环境等要素的协同作用可持续保证无菌生产。五、案例分析题46.可能原因：（1）灭菌前微生物初始负荷过高（如药液配制过程污染）；（2）灭菌柜装载方式不当，导致部分产品未达到F0值（虽最冷点120℃、16min，但F0=（10^((120-121)/10))×16=10^(-0.1)×16≈12.6，理论达标，可能存在装载过密导致蒸汽穿透不足）；（3）灭菌后冷却过程污染（如冷却介质或包装破损）；（4）微生物检测操作污染（需复核检测过程）。调查与纠正措施：（1）追溯生产记录，检查药液配制、过滤、灌装环节的环境监测数据及人员操作记录；（2）重新进行灭菌柜满载热穿透验证（更换装载方式，增加生物指示剂布点）；（3）检查灭菌后产品包装密封性（如真空衰减法检测）；（4）复核微生物检测实验室的阳性样品复核，确认是否为实验室污染；（5）若确认灭菌过程问题，调整装载方式并重新验证；若为上游污染，加强配制区环境控制及人员培训。47.可能污染来源：（1）人员操作的瞬间污染（如手套破损、动作幅度过大导致气流扰动）；（2）设备隐性故障（如灌装针密封性下降、胶塞转运过程短暂暴露）；（3）培养基本身的质量问题（如灭菌不彻底或储存不当）；（4）环境微漏（如传递窗密封不良、高效过滤器局部泄漏）。后续处理措施：（1）对