2025年中国农科院生物技术研究所棉花丰产耐逆分子育种创新组科研助理公开招聘1人笔试历年典型考题（历年真题考点）解题思路附带答案详解

2025年中国农科院生物技术研究所棉花丰产耐逆分子育种创新组科研助理公开招聘1人笔试历年典型考题（历年真题考点）解题思路附带答案详解一、选择题从给出的选项中选择正确答案（共50题）1、某农业科研团队在开展棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在盐碱胁迫条件下表达显著增强。为验证该基因功能，研究人员构建了过表达该基因的转基因植株，并设置野生型作为对照。在相同盐碱环境下培养后，发现转基因植株存活率明显高于对照组。这一实验设计主要体现了生物学研究中的哪一基本原则？A.对照原则B.重复原则C.随机原则D.可控变量原则2、在分子育种研究中，利用CRISPR/Cas9技术对棉花某一基因进行定点编辑时，需设计特异性引导RNA（sgRNA）。该sgRNA必须具备的关键特征是：A.与目标DNA序列互补配对，并引导Cas9蛋白切割B.直接编码抗逆蛋白的氨基酸序列C.作为DNA聚合酶的启动子元件D.与mRNA结合并抑制翻译过程3、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因序列在盐碱胁迫条件下表达量显著上升。为验证该基因的功能，研究人员最适宜采用的分子生物学技术是：A.聚合酶链式反应（PCR）B.蛋白质免疫印迹（Westernblot）C.RNA干扰（RNAi）D.凝胶电泳4、在植物分子育种中，利用CRISPR/Cas9系统对目标基因进行编辑时，该系统识别并切割DNA序列的关键决定因素是：A.Cas9蛋白的大小B.向导RNA（gRNA）的碱基序列C.细胞内的ATP浓度D.目标DNA的甲基化状态5、某农业科研团队在开展棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在干旱胁迫下表达显著上调。为验证该基因功能，研究人员构建了过表达该基因的转基因植株，并设置野生型作为对照。在相同干旱条件下，转基因植株存活率明显高于对照组。这一实验设计主要体现了生物学研究中的哪一基本原则？A.对照原则B.随机原则C.重复原则D.均衡原则6、在分子育种研究中，利用PCR技术扩增目标基因片段时，下列哪种情况最可能导致扩增产物出现非特异性条带？A.引物退火温度过高B.模板DNA浓度过低C.Taq酶活性不足D.引物序列与非目标区域部分互补7、在基因编辑技术中，CRISPR-Cas9系统能够精准切割DNA双链，其引导RNA（gRNA）的主要作用是：A.直接剪切目标DNA序列B.提供修复模板以实现基因插入C.识别并与目标DNA序列互补配对D.激活细胞凋亡pathway以筛选编辑细胞8、植物在遭受干旱胁迫时，体内含量显著上升并发挥关键信号调节作用的植物激素是：A.生长素B.赤霉素C.脱落酸D.细胞分裂素9、某农业科研团队在进行棉花品种改良时，通过基因编辑技术精准修改目标基因，以增强其抗旱能力。这一过程主要体现了现代生物技术中哪一核心技术的应用？A.蛋白质电泳技术B.细胞融合技术C.CRISPR-Cas9基因编辑技术D.DNA分子杂交技术10、在棉花分子育种研究中，科研人员常需快速检测特定基因是否成功导入植株基因组，以下哪种技术最适用于该检测过程？A.聚合酶链式反应（PCR）B.离心分离技术C.显微注射技术D.水培栽培技术11、某农业科研团队在开展棉花抗逆性研究时，发现某一基因片段在干旱胁迫下表达显著增强。为验证该基因的功能，研究人员最适宜采用的分子生物学技术是：A.聚合酶链式反应（PCR）B.基因沉默技术（RNA干扰）C.蛋白质电泳（SDS）D.光谱分析法12、在棉花分子育种过程中，若需快速检测多个转基因植株中目的基因的整合情况，最高效且特异性强的技术方法是：A.Southern杂交B.Western杂交C.紫外分光光度法D.实时荧光定量PCR（qRT-PCR）13、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在盐碱胁迫条件下表达显著增强。为验证该基因的功能，研究人员将其转入模式植物拟南芥，并观察其在高盐环境下的生长表现。这一研究主要运用了下列哪项生物技术？A.基因编辑技术B.分子标记辅助选择C.转基因技术D.蛋白质组学分析14、在生物学实验中，为确保实验结果的可靠性，常设置对照组。若要研究某种新型植物生长调节剂对棉花幼苗根系发育的影响，最科学的对照处理应为：A.使用高浓度调节剂处理B.不做任何处理的自然生长组C.使用等量蒸馏水处理D.用已知促进生根的激素处理15、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在盐碱胁迫条件下表达显著增强。为验证该基因功能，研究人员构建了过表达该基因的转基因植株。下列哪种实验设计最能有效验证该基因与耐盐性的因果关系？A.检测转基因植株在正常条件下的生长速率B.观察转基因植株与野生型植株在盐胁迫下的存活率差异C.测定野生型植株中该基因的表达量变化D.分析该基因在不同组织中的表达分布16、在分子育种过程中，利用CRISPR/Cas9技术对棉花基因组进行定点编辑时，下列哪一因素最直接影响编辑的精确性？A.目的基因的转录水平高低B.sgRNA与靶序列的互补匹配度C.细胞分裂周期的长短D.培养基中植物激素的配比17、在一项农业科学研究中，研究人员发现某种棉花品种在盐碱地中的产量显著高于其他品种。为验证该品种的耐盐性是否由特定基因控制，最科学的实验设计是：A.将该棉花品种种植在不同温度条件下观察生长情况B.将该棉花品种与普通品种在相同盐碱地环境中对比种植C.对该棉花品种进行施肥处理后观察产量变化D.仅在实验室中对该棉花品种进行显微镜观察18、某科研团队利用分子标记技术追踪棉花某一优良性状的遗传规律，在F₂代群体中发现该性状分离比接近3:1。据此可推断该性状最可能由：A.一对等位基因控制，显性完全B.两对独立基因互作控制C.环境因素单独决定D.多个基因累加效应控制19、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在干旱条件下表达显著增强。为验证该基因功能，研究人员构建了过表达该基因的转基因植株，并设置野生型作为对照。在相同干旱处理下，转基因植株的存活率明显高于对照组。这一实验设计主要体现了生物学研究中的哪种科学方法？A.对比分析法B.模拟实验法C.抽样调查法D.系统分类法20、某农业科研团队在开展棉花抗逆性状研究时，发现某一基因在盐胁迫条件下表达量显著上升，且转基因植株表现出更强的耐盐性。据此推断，该基因最可能参与的生物学过程是：A.光合作用光反应阶段B.细胞壁合成与离子稳态调控C.DNA复制起始过程D.蛋白质降解途径中的泛素化修饰21、在分子育种中，利用CRISPR/Cas9技术对棉花特定基因进行编辑时，设计向导RNA（gRNA）最关键的依据是：A.目标基因启动子区域的甲基化状态B.目标基因编码序列中是否存在PAM序列邻近的互补片段C.基因在染色体上的物理位置D.基因转录产物的长度22、某农业科研团队在培育耐盐碱棉花新品种时，发现某一基因片段在高盐环境中表达显著增强。为验证该基因的功能，研究人员将其导入普通棉花植株中，结果显示转基因植株在盐胁迫下的存活率明显提高。这一研究过程主要运用了下列哪项生物技术？A.基因编辑技术B.分子标记辅助选择C.转基因技术D.蛋白质组学分析23、在棉花抗逆育种中，科研人员常通过检测植株体内脯氨酸、可溶性糖等物质的含量变化来评估其抗旱能力。这类物质在植物抗旱过程中主要发挥的作用是？A.促进细胞分裂B.维持细胞渗透平衡C.增强光合作用效率D.抑制病原菌繁殖24、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因在盐胁迫条件下表达量显著上升，推测该基因可能参与调控棉花的耐盐机制。为验证这一假设，最适宜采用的分子生物学技术是：A.蛋白质电泳B.基因组测序C.实时荧光定量PCRD.细胞染色25、在植物分子育种中，利用CRISPR/Cas9技术对目标基因进行编辑时，其特异性主要依赖于：A.Cas9蛋白的切割活性B.向导RNA（gRNA）与靶DNA序列的互补配对C.DNA修复酶的种类D.载体的启动子强度26、某农业科研团队在进行棉花品种改良时，发现某一性状受两对独立遗传的等位基因控制（A/a和B/b）。当双显性个体（A_B_）自交时，后代中出现目标性状的比例为9/16。若将该双显性个体与隐性纯合个体（aabb）测交，后代中表现目标性状的个体所占比例为：A.1/2B.1/4C.3/4D.1/1627、在植物耐逆性研究中，科研人员发现某种棉花品系在干旱条件下气孔开度显著减小，从而降低蒸腾作用。这一生理调节过程主要依赖于哪种植物激素的积累？A.生长素B.赤霉素C.脱落酸D.细胞分裂素28、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在干旱条件下表达显著增强。为验证该基因的功能，研究人员构建了过表达该基因的转基因植株，并设置野生型作为对照。在相同干旱处理下，转基因植株的存活率明显高于对照组。以下哪项结论最合理？A.该基因直接参与棉花纤维发育B.该基因可能增强棉花的抗旱能力C.干旱诱导了棉花光合作用基因表达D.转基因操作导致棉花生长周期缩短29、在分子育种研究中，利用PCR技术扩增目标基因片段时，下列哪种因素最可能影响扩增产物的特异性？A.模板DNA的纯度B.引物与模板的匹配程度C.反应体系中Mg²⁺浓度过低D.电泳电压设置过高30、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因序列在盐碱胁迫下表达量显著上升。为验证该基因功能，最适宜采用的分子生物学技术是：A.蛋白质电泳B.基因定点突变C.实时荧光定量PCRD.Southern杂交31、在植物分子育种中，利用CRISPR/Cas9技术对目标基因进行编辑时，其特异性主要依赖于：A.Cas9蛋白的切割活性B.向导RNA（gRNA）与靶DNA序列的碱基互补配对C.DNA修复酶的类型D.载体质粒的大小32、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在盐碱胁迫条件下表达量显著上升。为验证该基因的功能，研究人员将其转入模式植物拟南芥中，结果显示转基因植株在高盐环境中生长优于野生型。这一研究主要运用了下列哪种生物学技术？A.基因编辑技术B.蛋白质组学分析C.外源基因转化技术D.细胞融合技术33、在分子育种研究中，利用分子标记辅助选择（MAS）的主要优势在于能够：A.直接改变作物的遗传结构B.提高目标性状选择的准确性和效率C.完全替代田间表型鉴定D.促进植物细胞全能性表达34、某研究团队对不同环境条件下棉花植株的生长表现进行观测，发现盐碱胁迫下植株叶片出现萎蔫、光合速率下降等现象。进一步检测发现，细胞内活性氧（ROS）水平显著升高，抗氧化酶系统被激活。这一系列反应主要体现了植物对逆境的哪种生物学响应？A.细胞凋亡机制启动B.渗透调节与氧化应激防御C.光周期调控失常D.激素合成完全抑制35、在分子育种研究中，科研人员常利用CRISPR/Cas9技术对目标基因进行定向编辑。若需提高棉花植株的抗旱性，最应优先编辑与下列哪类基因功能相关的序列？A.纤维素合成酶基因B.脱落酸（ABA）信号通路基因C.花青素合成调控基因D.细胞周期调控基因36、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在干旱胁迫下表达量显著上升，推测该基因可能参与调控植物应答逆境的信号通路。为验证其功能，最直接有效的实验方法是：A.利用PCR技术对该基因进行测序分析B.构建该基因的过表达和敲除突变体并进行干旱处理对比C.通过生物信息学预测该基因的启动子区域顺式作用元件D.采用Westernblot检测该基因在不同组织中的蛋白表达水平37、在分子育种中，利用CRISPR/Cas9技术对棉花目标基因进行编辑时，设计向导RNA（gRNA）的关键原则是：A.gRNA序列需与目标基因的启动子区完全互补B.gRNA应包含T7启动子以利于体外转录C.gRNA20nt序列须与目标DNA特异互补且其3'端紧邻PAM序列D.gRNA必须靶向基因的内含子区域以避免影响蛋白功能38、某农业科研团队在试验田中对棉花品种进行抗逆性观察，发现甲品种在盐碱地环境中生长良好，乙品种在干旱条件下表现稳定，丙品种在病虫害频发区仍能保持较高产量。若需综合选育兼具耐盐碱、抗旱、抗病虫害特性的新品种，最适宜采用的育种方法是：A.单倍体育种B.转基因育种C.杂交育种D.诱变育种39、在分子生物学实验中，研究人员需快速检测棉花植株是否成功导入特定抗逆基因，最常用的检测技术是：A.蛋白质电泳B.PCR扩增C.细胞组织培养D.显微观察40、某农业科研团队在试验田中对不同基因型棉花植株进行耐盐性测试，发现某一突变体在高盐环境下仍能维持较高的光合速率。这一现象最可能与下列哪种生理机制密切相关？A.气孔导度显著增加以促进二氧化碳吸收B.细胞内渗透调节物质如脯氨酸的积累C.叶绿体数量异常增多以提升光能捕获D.根系固氮能力增强以提高氮素供应41、在分子育种过程中，利用CRISPR/Cas9技术对棉花基因进行定点编辑时，设计向导RNA（gRNA）最关键的依据是什么？A.目标基因编码蛋白质的氨基酸序列B.目标基因DNA序列中紧邻PAM序列的特异性片段C.基因启动子区域的甲基化状态D.mRNA剪接位点的保守性42、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因序列在盐碱胁迫条件下表达显著上调。为验证该基因功能，最适宜采用的分子生物学技术是：A.蛋白质电泳B.PCR扩增C.基因沉默技术D.平板划线法43、在植物组织培养过程中，外植体脱分化形成愈伤组织的关键调控因素是：A.光照强度B.水分含量C.激素配比D.培养基pH值44、某农业科研团队在培育耐盐碱棉花品种时，发现某一基因片段在高盐环境下表达显著增强，推测其可能参与耐逆调控。为验证该基因功能，最直接有效的实验方法是：A.利用PCR技术对该基因进行测序分析B.通过基因编辑技术敲除该基因并观察植株表型变化C.采用Westernblot检测该基因的蛋白质结构D.使用显微镜观察细胞形态变化45、在分子育种研究中，若发现某棉花品系在干旱条件下气孔开度显著减小，蒸腾速率降低，这一生理变化主要有助于：A.提高光合作用效率B.增强根系吸收能力C.减少水分流失，维持细胞膨压D.促进叶片扩展生长46、某科研团队在进行棉花抗逆性状研究时，发现某一基因片段在干旱胁迫下表达量显著上升，推测其可能参与调控植物应激反应。为验证该基因功能，最直接有效的实验方法是：A.利用PCR技术对该基因进行克隆测序B.构建该基因的过表达和敲除突变体并进行表型分析C.通过生物信息学预测该基因的启动子区域D.使用Westernblot检测该基因的蛋白结构47、在分子育种中，利用CRISPR/Cas9技术对棉花基因组进行编辑时，设计sgRNA的关键原则是：A.与目标基因启动子区域完全互补配对B.识别长度为18-20bp的DNA序列并紧邻PAM序列C.位于基因内含子区域以避免影响编码序列D.与多个非目标基因具有高度同源性48、在基因工程中，常用于将目的基因导入植物细胞的载体是：A.质粒B.噬菌体C.动物病毒D.农杆菌Ti质粒49、下列关于植物耐逆性的分子机制描述正确的是：A.脱落酸（ABA）在干旱胁迫下减少合成，降低气孔关闭B.超氧化物歧化酶（SOD）可清除活性氧，减轻氧化损伤C.高盐环境下，植物细胞主动排出钠离子以维持低钾环境D.热激蛋白仅在高温下表达，无其他胁迫响应功能50、某研究团队对棉花植株在盐碱胁迫条件下的生长表现进行观测，发现某一突变体植株的根系长度显著长于野生型，且叶片中脯氨酸积累量明显升高。据此推测，该突变可能增强了植株的哪项生理功能？A.光合作用效率B.细胞分裂速率C.渗透调节能力D.营养元素吸收

参考答案及解析1.【参考答案】A【解析】本题考查生物学实验设计的基本原则。题干中明确提到“设置野生型作为对照”，并将转基因植株与之比较，体现了对照原则的核心——通过对照组与实验组的对比，判断处理因素（基因过表达）的作用。虽然实验也可能涉及重复和控制变量，但题干突出强调“设置对照”，因此最符合的是对照原则。2.【参考答案】A【解析】CRISPR/Cas9系统中，sgRNA的作用是通过其序列与目标DNA互补配对，引导Cas9核酸酶定位到特定基因位点并进行切割。该过程不直接编码蛋白，也不作为启动子或翻译抑制剂。选项A准确描述了sgRNA的功能机制，符合分子生物学原理。其他选项混淆了RNA类型的功能，故错误。3.【参考答案】C【解析】要验证某一基因在盐碱胁迫中的功能，需通过敲低或沉默该基因表达，观察表型变化。RNA干扰（RNAi）可特异性降解目标基因的mRNA，实现功能缺失研究，是功能验证的关键技术。PCR和凝胶电泳主要用于检测基因存在或扩增，Westernblot检测蛋白表达水平，但均不能直接验证基因功能。因此，C项最符合实验目的。4.【参考答案】B【解析】CRISPR/Cas9系统通过向导RNA（gRNA）与目标DNA序列互补配对，引导Cas9蛋白定位至特定位置进行切割。gRNA的碱基序列决定了靶向特异性，是识别关键。Cas9蛋白本身无序列识别能力，ATP浓度和DNA甲基化可能影响编辑效率，但不决定靶点选择。因此，B项正确。5.【参考答案】A【解析】本题考查生物学实验设计的基本原则。题干中明确提到“设置野生型作为对照”，并比较转基因植株与野生型在干旱条件下的表现，体现了实验中的“对照原则”，即通过对照组与实验组的对比，判断处理因素（基因过表达）的作用。随机、重复、均衡虽为实验设计的重要原则，但题干未体现分组随机性或多次重复实验等信息。故正确答案为A。6.【参考答案】D【解析】PCR扩增的特异性主要取决于引物与模板DNA的匹配程度。若引物序列与非目标区域存在部分互补，可能在错误位点结合并启动扩增，产生非特异性条带。退火温度过高通常导致扩增效率下降甚至无产物，而温度过低才易引起非特异扩增；模板浓度过低或酶活性不足主要影响产量，不直接导致非特异性条带。因此，D选项是导致非特异性扩增的根本原因，答案为D。7.【参考答案】C【解析】gRNA（向导RNA）由crRNA和tracrRNA融合而成，其核心功能是通过碱基互补配对识别目标DNA序列，并引导Cas9核酸酶定位至特定基因位点。Cas9蛋白执行DNA双链切割，而gRNA本身不具备剪切能力。修复模板需额外引入，非gRNA功能。因此，C项正确。8.【参考答案】C【解析】脱落酸（ABA）被称为“应激激素”，在干旱、高盐等逆境条件下迅速积累，诱导气孔关闭以减少水分蒸腾，并启动抗逆相关基因表达。生长素、赤霉素和细胞分裂素主要参与生长发育调控，常在逆境中含量下降。因此，C项正确。9.【参考答案】C【解析】题干中提到“通过基因编辑技术精准修改目标基因”，这是CRISPR-Cas9技术的典型应用特征，该技术具有高效、精准、可定向编辑基因的优点，广泛应用于作物耐逆性改良。蛋白质电泳用于分析蛋白质大小，细胞融合用于制备杂交细胞，DNA分子杂交用于检测特定序列，均不涉及基因的定向编辑。因此，正确答案为C。10.【参考答案】A【解析】PCR技术可通过特异性引物扩增目标DNA片段，快速判断外源基因是否整合到棉花基因组中，是分子检测的常规手段。离心用于分离组分，显微注射用于基因导入操作，水培用于栽培，均不具备基因检测功能。因此，A项正确。11.【参考答案】B【解析】题干强调“验证基因功能”，特别是在胁迫条件下表达增强的基因是否参与抗逆反应。PCR用于扩增基因片段，不能验证功能；蛋白质电泳分析蛋白表达量，亦不直接证明功能；光谱分析多用于物质成分检测。而RNA干扰可通过特异性降低目标基因表达，观察植株抗逆性变化，从而反向验证基因功能，是功能研究的常用手段。因此选B。12.【参考答案】A【解析】目的基因是否整合到基因组DNA中，需从DNA水平检测。Southern杂交能特异性检测外源基因在基因组中的整合位置与拷贝数，是转基因整合检测的“金标准”。Western杂交检测蛋白质表达，属于翻译水平；qRT-PCR主要用于检测基因表达量（mRNA水平），虽灵敏但无法确认是否稳定整合；紫外分光光度法仅测核酸浓度，无特异性。因此选A。13.【参考答案】C【解析】题干描述将某一基因片段转入拟南芥并观察性状变化，属于外源基因导入并实现表达的过程，符合转基因技术的定义。基因编辑（A）侧重对原有基因的修饰或敲除，分子标记（B）用于辅助筛选而非直接改变基因，蛋白质组学（D）是研究蛋白质表达的技术，均不符合题意。故正确答案为C。14.【参考答案】C【解析】对照组需排除处理因素的干扰，同时保持其他条件一致。等量蒸馏水处理可排除溶剂或操作本身的影响，构成空白对照。A为实验组，B未控制变量（如浇水量），D属于阳性对照，虽有用但非“最科学”的基础对照。故正确答案为C。15.【参考答案】B【解析】验证基因与性状的因果关系需在相同胁迫条件下比较转基因与野生型植株的表现。B项通过设置盐胁迫环境，对比存活率，能直接反映该基因是否提升耐盐性。A、D项未涉及胁迫条件，无法验证功能；C项仅为相关性分析，不能证明因果。故B为最有效设计。16.【参考答案】B【解析】CRISPR/Cas9系统的编辑精确性主要依赖sgRNA与基因组靶序列的特异性结合。若sgRNA与非靶位点存在部分互补，易导致脱靶效应。B项直接决定识别准确性；A、C、D项影响编辑效率或后续再生，但不主导精确性。因此，sgRNA设计的匹配度是关键因素。17.【参考答案】B【解析】验证耐盐性是否由遗传因素决定，需在相同环境（尤其是盐碱胁迫）下进行品种间对照实验。B项通过设置对照组（普通品种）与实验组（耐盐品种）在相同盐碱地种植，可排除环境干扰，科学比较性状差异，从而推断基因作用。其他选项未聚焦盐胁迫或缺乏对照，无法有效验证耐盐性机制。18.【参考答案】A【解析】F₂代性状分离比为3:1，是孟德尔一对相对性状杂交实验的典型结果，表明该性状由一对等位基因控制，且显性完全。该比例在分子育种中常用于判断单基因遗传模式。B项通常产生9:3:3:1等比例，D项表现为连续变异，C项无固定分离比，均不符合题意。19.【参考答案】A【解析】本题考查科学研究方法的识别。题干中研究人员通过设置转基因植株（实验组）与野生型（对照组），在相同条件下比较其抗旱表现，体现了“对照实验”思想，属于对比分析法。对比分析法通过比较不同组别间的差异来推断变量影响，广泛应用于生物学功能验证。其他选项中，模拟实验法侧重于模拟自然条件，抽样调查法用于群体数据采集，系统分类法用于生物分类，均不符合题意。20.【参考答案】B【解析】在盐胁迫环境下，植物主要通过调节离子吸收与分布、维持细胞渗透平衡和保护细胞结构来增强耐逆性。该基因在盐胁迫下表达上升且提升耐盐性，表明其功能与离子稳态或细胞保护机制相关。细胞壁合成有助于维持细胞结构稳定，离子转运蛋白参与调控Na⁺/K⁺平衡，均属于典型抗盐机制。而光合作用、DNA复制和泛素化修饰虽与植物生长有关，但非直接响应盐胁迫的核心途径。故B项最符合。21.【参考答案】B【解析】CRISPR/Cas9系统中，Cas9蛋白需识别目标DNA上的PAM序列（NGG），并向导RNA与下游DNA序列互补配对才能实现精准切割。因此，设计gRNA必须以目标基因序列中靠近PAM位点的可配对区域为依据。启动子甲基化、染色体位置和转录本长度虽影响基因表达研究，但不决定gRNA设计的核心条件。故B项正确。22.【参考答案】C【解析】题干描述将特定基因片段导入普通棉花，使植株获得新的耐盐性状，符合转基因技术的定义，即外源目的基因导入受体生物并实现表达。基因编辑（A）强调对自身基因组的定点修改；分子标记（B）用于筛选而非直接导入基因；蛋白质组学（D）属于分析技术，不涉及基因导入。因此选C。23.【参考答案】B【解析】脯氨酸和可溶性糖是重要的渗透调节物质，能在干旱条件下积累，降低细胞渗透势，维持细胞水分吸收和膨压，保护生物大分子结构。此过程核心是渗透调节，而非促进分裂（A）、提升光合（C）或抗病（D）。因此选B。24.【参考答案】C【解析】实时荧光定量PCR（qRT-PCR）可精确定量特定基因在不同条件下的表达水平，适用于检测基因在盐胁迫前后表达量的变化，从而验证其是否参与耐盐调控。蛋白质电泳主要用于检测蛋白质表达，基因组测序用于获取DNA序列信息，细胞染色用于观察细胞结构，均不直接反映基因表达量变化。25.【参考答案】B【解析】CRISPR/Cas9系统的靶向特异性由向导RNA（gRNA）决定，gRNA通过碱基互补配对识别并结合靶DNA序列，引导Cas9蛋白进行切割。Cas9的切割活性是功能基础，但不决定特异性；DNA修复酶影响编辑结果类型，启动子影响表达水平，均不决定靶向特异性。26.【参考答案】B【解析】目标性状由双显性基因型（A_B_）控制，符合自由组合定律。双显性个体（AaBb）与隐性纯合体（aabb）测交，后代基因型及比例为：AaBb:Aabb:aaBb:aabb=1:1:1:1。其中只有AaBb表现为双显性，即具有目标性状，占比为1/4。故正确答案为B。27.【参考答案】C【解析】脱落酸（ABA）是调控植物应对逆境的关键激素之一。在干旱胁迫下，棉花叶片合成并积累脱落酸，传递信号使气孔关闭，减少水分流失，提高抗旱能力。生长素主要调节细胞伸长，赤霉素促进萌发和生长，细胞分裂素促进细胞分裂，均不主导气孔关闭反应。故正确答案为C。28.【参考答案】B【解析】题干描述了某一基因在干旱下表达增强，且过表达该基因的植株在干旱中存活率更高，说明该基因与抗旱性存在正相关。选项B基于实验数据得出合理推论，符合“基因功能验证”实验的逻辑。A项无纤维发育相关信息支持；C项提及光合作用基因，未在题干中体现；D项生长周期变化未被提及。故选B。29.【参考答案】B【解析】PCR扩增特异性主要取决于引物与模板DNA的结合特异性。若引物设计不合理或与非目标序列部分匹配，易产生非特异条带。模板纯度影响扩增效率但不直接决定特异性；Mg²⁺浓度影响酶活性，属效率因素；电泳电压影响条带分离效果，不改变PCR产物本身。因此，引物与模板匹配程度是关键因素，选B。30.【参考答案】C【解析】题干核心是“验证基因在胁迫下的表达变化”，即检测mRNA水平的表达量。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）是检测特定基因转录水平最灵敏、常用的技术。A项用于检测蛋白分离情况，不直接反映基因表达量；B项用于改变基因序列功能，适用于功能缺失研究，但非表达检测；D项用于检测基因组中特定DNA序列是否存在及拷贝数，不反映表达动态。因此，C项最符合实验目的。31.【参考答案】B【解析】CRISPR/Cas9系统的靶向特异性由向导RNA（gRNA）决定，gRNA通过碱基互补配对识别并结合靶DNA序列，引导Cas9蛋白进行切割。A项是执行切割的工具，但无自主靶向能力；C项影响编辑结果（如插入或缺失），但不决定靶点选择；D项与特异性无关。因此，B项是决定编辑特异性的关键因素。32.【参考答案】C【解析】题干描述将某一基因片段转入拟南芥并观察其表型变化，属于典型的外源基因转化技术，即通过转基因手段使受体生物表达新的基因以研究其功能。基因编辑技术（如CRISPR）侧重于对原有基因进行敲除或修饰，而本题未涉及基因修改，排除A；蛋白质组学用于分析蛋白质表达谱，细胞融合用于原生质体杂交，均不符合题意。故正确答案为C。33.【参考答案】B【解析】分子标记辅助选择（MAS）是通过与目标性状紧密连锁的DNA标记进行早期筛选，可在幼苗期精准识别优良基因型，显著提高选择效率和准确性，尤其适用于隐性性状或后期表达性状的选育。它并不直接改变遗传结构（A错误），也不能完全替代田间鉴定（C错误），D项涉及组织培养，与MAS无关。因此正确答案为B。34.【参考答案】B【解析】在盐碱胁迫下，植物会积累渗透调节物质（如脯氨酸、可溶性糖）以维持细胞水分平衡，同时活性氧积累引发氧化应激，激活超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）等抗氧化酶系统，清除过量ROS，保护细胞结构。这属于典型的渗透调节与氧化应激防御机制。A虽可能发生，但非主要响应；C、D与题干现象无直接关联。35.【参考答案】B【解析】脱落酸（ABA）是调控植物响应干旱胁迫的关键激素，能诱导气孔关闭、减少水分蒸腾，并激活抗旱相关基因表达。编辑ABA信号通路基因（如PYR/PYL受体、SnRK2激酶）可增强植株抗旱能力。A影响纤维品质，C涉及色素积累，D调控细胞分裂，均非抗旱核心机制。故B为最优选择。36.【参考答案】B【解析】验证基因功能最直接的方法是通过遗传操作改变其表达水平，观察表型变化。构建过表达和基因敲除突变体，并在干旱胁迫下比较植株生长状况，能明确该基因是否参与抗旱调控。A项测序仅获序列信息，无法判断功能；C项为预测分析，间接且不确凿；D项检测表达量，仍属相关性分析。唯有B项具备功能验证的因果性，故选B。37.【参考答案】C【解析】CRISPR/Cas9系统中，gRNA通过其5'端约20个核苷酸与靶DNA互补配对，引导Cas9蛋白切割，且靶位点3'端必须紧邻PAM序列（NGG），否则无法识别。A项错误，gRNA无需与启动子特异结合；B项是载体构建策略，非设计原则；D项错误，编辑通常靶向外显子以造成功能缺失。C项准确描述了gRNA设计的核心要求，故为正确答案。38.【参考答案】C【解析】杂交育种通过不同优良性状亲本的杂交，使后代聚合多个优良基因，适用于将耐盐碱、抗旱、抗病虫等性状逐步整合。虽然周期较长，但安全性高、符合常规育种流程。转基因育种虽可精准导入性状，但涉及外源基因，监管严格；单倍体育种和诱变育种随机性强，难以定向聚合多个复杂性状。因此，杂交育种是最稳妥且广泛应用的方法。39.【参考答案】B【解析】PCR（聚合酶链式反应）可在短时间内特异性扩增目标DNA片段，用于快速检测外源基因是否成功整合到棉花基因组中。该方法灵敏度高、操作简便，是分子检测的常规手段。蛋白质电泳检测表达产物，滞后于基因整合；组织培养和显微观察无法直接确认基因存在，故PCR为首选。40.【参考答案】B【解析】在高盐胁迫下，植物常通过积累渗透调节物质（如脯氨酸、甜菜碱）来维持细胞渗透平衡，防止水分流失并保护酶活性。该突变体维持较高光合速率，表明其细胞生理功能稳定，这与渗透调节能力密切相关。气孔导度在高盐下通常会下降以减少水分散失，A错误；叶绿体数量不会短期内显著变化，C不符合实际；棉花为非固氮植物，根系不具备固氮能力，D错误。因此B为科学合理的解释。41.【参考答案】B【解析】CRISPR/Cas9系统中，Cas9蛋白需识别目标DNA上的PAM序列（5'-NGG-3'），并向导RNA与PAM上游的DNA序列互补配对，实现精准切割。因此gRNA设计必须基于目标基因中紧邻PAM的特异DNA序列。虽然氨基酸序列可反推DNA序列，但非直接依据，A错误；启动子甲基化影响表达但不决定编辑靶点，C错误；mRNA剪接位点虽重要，但编辑仍需在DNA层面定位，D非