2025年卫生高级职称考试(预防疾控微生物检验技术)真题附答案

2025年卫生高级职称考试(预防疾控微生物检验技术)练习题附答案一、单项选择题（共20题，每题1分，每题仅有一个正确选项）1.结核分枝杆菌的典型染色特性是A.革兰阳性，抗酸染色阴性B.革兰阴性，抗酸染色阳性C.革兰阳性，抗酸染色阳性D.革兰阴性，抗酸染色阴性答案：C解析：结核分枝杆菌细胞壁含大量分枝菌酸，革兰染色不易着色（呈阳性），但抗酸染色呈红色（阳性）。2.流感病毒分型的主要依据是A.血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）B.核蛋白（NP）和基质蛋白（M1）C.包膜糖蛋白ED.聚合酶复合体（PB1、PB2、PA）答案：B解析：流感病毒根据核蛋白（NP）和基质蛋白（M1）抗原性不同分为甲、乙、丙三型；亚型划分依据为HA和NA。3.高压蒸汽灭菌法的标准参数是A.100℃，30分钟B.115℃，15分钟C.121℃，1520分钟D.134℃，3分钟答案：C解析：常规高压蒸汽灭菌参数为121℃、103.4kPa（1.05kg/cm²）维持1520分钟，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。4.用于分离霍乱弧菌的选择性培养基是A.SS琼脂B.麦康凯琼脂C.TCBS琼脂D.巧克力琼脂答案：C解析：TCBS（硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖）琼脂通过高pH（8.59.5）抑制革兰阳性菌，蔗糖发酵产酸使霍乱弧菌呈黄色菌落。5.以下哪种病原体需在生物安全三级（BSL3）实验室进行操作？A.金黄色葡萄球菌B.新型冠状病毒（Omicron变异株）C.麻疹病毒D.沙门菌答案：B解析：根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》，新型冠状病毒（原代分离培养、感染性材料操作）需在BSL3实验室进行。6.检测梅毒螺旋体最常用的血清学试验是A.快速血浆反应素试验（RPR）B.甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）C.梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）D.以上均是答案：D解析：RPR和TRUST为非特异性初筛试验，TPPA为特异性确认试验，临床常联合使用。7.以下哪项是革兰染色的关键步骤？A.结晶紫初染B.碘液媒染C.95%乙醇脱色D.沙黄复染答案：C解析：脱色时间过长会使革兰阳性菌被误染为阴性，过短则革兰阴性菌被误染为阳性，是染色成败的关键。8.用于检测军团菌的特异性培养基是A.BCYE琼脂（缓冲活性炭酵母浸膏琼脂）B.血琼脂C.营养琼脂D.中国蓝琼脂答案：A解析：BCYE琼脂含L半胱氨酸和铁离子，是军团菌生长的必需成分，可抑制其他细菌生长。9.以下哪种病毒不能通过细胞培养分离？A.脊髓灰质炎病毒B.轮状病毒C.诺如病毒D.单纯疱疹病毒答案：C解析：诺如病毒目前尚无稳定的细胞培养体系，主要通过RTPCR检测。10.实验室质量控制中，“室内质控”的核心目的是A.评价实验室间检测结果的一致性B.监测检测过程的稳定性C.验证新方法的准确性D.确保仪器设备的正常运行答案：B解析：室内质控通过定期检测质控品，监测检测系统的精密度和准确性，及时发现批内/批间变异。11.肺炎支原体的主要致病物质是A.荚膜B.黏附素P1蛋白C.内毒素D.外毒素答案：B解析：P1蛋白介导肺炎支原体黏附于呼吸道上皮细胞，是定植和致病的关键。12.检测乙型肝炎病毒（HBV）复制活跃的指标是A.HBsAgB.HBeAgC.抗HBsD.抗HBc答案：B解析：HBeAg阳性提示HBV复制活跃，传染性强；HBsAg为感染标志，抗HBs为保护性抗体。13.以下哪种真菌可引起“鹅口疮”？A.皮肤癣菌B.新生隐球菌C.白假丝酵母菌D.曲霉菌答案：C解析：白假丝酵母菌是机会致病菌，免疫低下时可引起口腔黏膜白色假膜（鹅口疮）。14.用于检测结核分枝杆菌耐药性的常用方法是A.纸片扩散法（KB法）B.比例法（Proportionmethod）C.Etest法D.以上均是答案：D解析：结核分枝杆菌生长缓慢，比例法为金标准，KB法和Etest法也可用于快速检测。15.以下哪种细菌的鞭毛为周鞭毛？A.霍乱弧菌（单鞭毛）B.伤寒沙门菌C.铜绿假单胞菌（单端丛鞭毛）D.空肠弯曲菌（双端单鞭毛）答案：B解析：伤寒沙门菌周身有鞭毛，运动活跃；霍乱弧菌为单端单鞭毛。16.检测脑膜炎奈瑟菌的最佳标本是A.痰液B.脑脊液C.尿液D.粪便答案：B解析：脑膜炎奈瑟菌主要引起化脓性脑膜炎，脑脊液中细菌浓度高，需保温快速送检。17.以下哪种方法可用于区分肠杆菌科细菌和非发酵菌？A.氧化酶试验B.触酶试验C.凝固酶试验D.尿素酶试验答案：A解析：肠杆菌科细菌氧化酶阴性，非发酵菌（如铜绿假单胞菌）氧化酶阳性，是重要鉴别点。18.人乳头瘤病毒（HPV）分型的主要依据是A.L1基因序列B.E6/E7基因C.包膜蛋白D.核衣壳蛋白答案：A解析：HPV分型基于L1基因的核酸序列差异，WHO推荐使用PCR结合测序或基因芯片方法。19.以下哪种消毒方法属于湿热消毒？A.紫外线照射B.环氧乙烷气体灭菌C.巴氏消毒法（62℃，30分钟）D.干热灭菌（160℃，2小时）答案：C解析：湿热消毒利用水蒸气或热水，巴氏消毒、高压蒸汽灭菌均属此类；干热灭菌为干热法。20.布鲁菌的主要传播途径是A.呼吸道飞沫B.消化道（食入未消毒乳制品）C.虫媒叮咬D.性接触答案：B解析：布鲁菌可通过接触感染动物或食入未消毒的牛奶、奶酪等传播，职业暴露（兽医、牧民）为高危人群。二、多项选择题（共10题，每题2分，每题有25个正确选项，错选、漏选均不得分）1.以下属于高致病性病原微生物的有A.鼠疫耶尔森菌B.炭疽芽胞杆菌（肺炭疽）C.新型冠状病毒（原始株）D.金黄色葡萄球菌答案：ABC解析：根据《人间传染的病原微生物名录》，鼠疫耶尔森菌、肺炭疽芽胞杆菌、新型冠状病毒（感染性材料操作）属于第一类/第二类高致病性病原微生物。2.实验室生物安全柜的作用包括A.保护实验人员B.保护实验样本C.保护环境D.替代通风系统答案：ABC解析：生物安全柜通过定向气流和高效过滤器（HEPA）实现人员、样本和环境的三重保护，但不能替代实验室整体通风。3.以下哪些是结核分枝杆菌的特性？A.生长缓慢（代时1824小时）B.耐干燥（在痰液中可存活68个月）C.对75%乙醇敏感D.对紫外线敏感答案：ABCD解析：结核分枝杆菌因细胞壁含大量脂质，耐干燥、酸、碱，但对乙醇、紫外线（30分钟）和湿热敏感。4.检测病毒核酸的常用方法有A.实时荧光定量PCR（qPCR）B.逆转录PCR（RTPCR）C.核酸杂交（如FISH）D.酶联免疫吸附试验（ELISA）答案：ABC解析：ELISA检测病毒抗原或抗体，不属于核酸检测；qPCR、RTPCR、FISH均为核酸检测技术。5.以下哪些措施可用于控制实验室细菌污染？A.定期进行环境微生物监测（如沉降菌计数）B.操作前用75%乙醇擦拭台面C.污染区域用含氯消毒剂（有效氯5000mg/L）消毒D.所有废弃物高压灭菌后处理答案：ABCD解析：实验室污染控制需结合环境监测、表面消毒、污染物处理等综合措施。6.以下属于肠道正常菌群的有A.大肠埃希菌B.双歧杆菌C.产气荚膜梭菌D.霍乱弧菌答案：ABC解析：霍乱弧菌为外来致病菌，正常肠道无定植；大肠埃希菌、双歧杆菌、产气荚膜梭菌（少量）为正常菌群。7.以下哪些是金黄色葡萄球菌的致病物质？A.血浆凝固酶B.肠毒素C.杀白细胞素D.链激酶答案：ABC解析：链激酶是A群链球菌的致病物质；血浆凝固酶、肠毒素（引起食物中毒）、杀白细胞素均为金葡菌致病因子。8.以下哪些病毒可通过垂直传播（母婴传播）？A.乙型肝炎病毒（HBV）B.风疹病毒C.人类免疫缺陷病毒（HIV）D.甲型肝炎病毒（HAV）答案：ABC解析：HAV主要通过粪口传播，无垂直传播；HBV（产时）、风疹病毒（宫内）、HIV（宫内/产时/哺乳）可垂直传播。9.以下哪些是真菌的实验室检测方法？A.直接镜检（KOH湿片法）B.真菌培养（沙保弱培养基）C.血清学检测（G试验、GM试验）D.核酸检测（ITS区测序）答案：ABCD解析：真菌检测包括形态学（镜检）、培养、血清学（G试验检测βD葡聚糖，GM试验检测半乳甘露聚糖）及分子生物学方法。10.以下哪些是实验室质量控制的关键要素？A.人员培训与考核B.仪器设备校准C.标准物质使用D.室间质评（EQA）参与答案：ABCD解析：质量控制涵盖人员、设备、试剂、操作、结果验证等全流程，室间质评用于评价实验室间一致性。三、填空题（共10题，每题1分）1.细菌的基本形态包括球状、杆状和__________。答案：螺旋状2.检测军团菌抗体的常用方法是__________（如间接免疫荧光法）。答案：血清学试验3.生物安全柜II级A2型的气流模式为__________（垂直层流）。答案：部分循环，部分外排4.支原体缺乏__________，因此对青霉素类抗生素不敏感。答案：细胞壁5.用于分离培养流感病毒的常用细胞系是__________（如MDCK细胞）。答案：狗肾传代细胞6.结核菌素试验（PPD试验）的原理是__________（迟发型超敏反应）。答案：IV型超敏反应7.霍乱弧菌的主要致病物质是__________（可引起剧烈腹泻）。答案：霍乱肠毒素（CT）8.实验室检测HIV的“金标准”是__________（如WesternBlot）。答案：蛋白印迹法9.真菌的无性孢子包括分生孢子、孢囊孢子和__________。答案：芽生孢子10.高压蒸汽灭菌效果监测的生物指示剂是__________（需121℃、15分钟被杀灭）。答案：嗜热脂肪芽胞杆菌四、简答题（共5题，第12题每题5分，第35题每题8分）1.简述革兰染色的操作步骤及各步骤的作用。答案：（1）初染：结晶紫染色1分钟，使所有细菌着色（紫色）。（2）媒染：碘液处理1分钟，与结晶紫结合形成复合物，增强染料与细胞的结合力。（3）脱色：95%乙醇脱色30秒1分钟，革兰阳性菌因细胞壁肽聚糖层厚，保留紫色；革兰阴性菌肽聚糖层薄，脱色后无色。（4）复染：沙黄（或稀释石碳酸复红）染色30秒，革兰阴性菌被染成红色，革兰阳性菌保持紫色。2.列举5种实验室常用的分子生物学检测技术及其应用。答案：（1）实时荧光定量PCR（qPCR）：定量检测病原体核酸（如新冠病毒载量）。（2）聚合酶链式反应（PCR）：扩增特定基因片段（如结核分枝杆菌IS6110基因）。（3）基因测序（如Sanger测序）：确定病原体基因序列（如流感病毒分型）。（4）基因芯片：同时检测多种病原体（如呼吸道病毒多重检测）。（5）环介导等温扩增（LAMP）：快速检测病原体（如登革病毒现场筛查）。3.分析实验室发生细菌交叉污染的可能原因及预防措施。答案：可能原因：（1）操作不规范：如未在生物安全柜内操作、样本开盖时气溶胶扩散。（2）实验室分区不合理：清洁区与污染区未严格分隔。（3）设备污染：移液枪、离心管架未定期消毒。（4）样本处理不当：同一操作台同时处理多份样本。（5）培养基或试剂污染：灭菌不彻底的培养基含杂菌。预防措施：（1）严格遵守生物安全操作规范（如戴手套、穿隔离衣）。（2）实验室分区管理（清洁区、半污染区、污染区），单向流动。（3）定期对设备（如生物安全柜、离心机）进行消毒（75%乙醇擦拭，紫外线照射30分钟）。（4）样本处理时使用一次性吸头，避免重复使用。（5）培养基灭菌后做无菌试验（37℃培养24小时无细菌生长）。4.简述新型冠状病毒（SARSCoV2）实验室检测的主要方法及质量控制要点。答案：主要检测方法：（1）核酸检测：RTPCR（检测ORF1ab、N基因），为确诊依据。（2）抗原检测：胶体金法（快速筛查，适用于高流行区）。（3）抗体检测：ELISA/化学发光法（检测IgM、IgG，用于流行病学调查）。质量控制要点：（1）样本采集：鼻咽拭子需规范操作（深入咽后壁/鼻甲，旋转3圈），避免唾液污染。（2）核酸提取：使用经认证的试剂盒，设置阴/阳性对照（如内标基因RNP）。（3）扩增过程：严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增分析区），避免气溶胶污染。（4）结果判读：Ct值＜37为阳性，≥40为阴性，3740需复检。（5）设备校准：实时荧光PCR仪定期校准（温度、荧光强度）。5.试述肠出血性大肠埃希菌（EHEC，如O157:H7）的实验室检测流程。答案：检测流程：（1）样本处理：粪便/食品样本接种选择性培养基（如山梨醇麦康凯琼脂，SMAC）。（2）初步筛选：O157:H7不发酵山梨醇，在SMAC上形成无色菌落（普通大肠埃希菌为粉红色）。（3）生化鉴定：氧化酶阴性，靛基质阳性，IMViC试验（++）。（4）血清学确认：用O157和H7抗血清做玻片凝集试验。（5）毒力检测：PCR检测志贺样毒素基因（stx1、stx2）和eae基因（黏附素）。（6）分型检测（可选）：脉冲场凝胶电泳（PFGE）用于爆发株溯源。五、应用题（共3题，第1题10分，第23题每题15分）1.某医院检验科报告1例疑似炭疽病例（皮肤黑痂样本），请设计实验室检测方案（包括样本处理、检测方法及结果判读）。答案：检测方案：（1）样本处理：皮肤黑痂用无菌生理盐水湿润后研磨，制成悬液。（2）涂片镜检：革兰染色见革兰阳性粗大杆菌，呈竹节状排列；荚膜染色可见明显荚膜（在含血清培养基中更易观察）。（3）分离培养：接种血琼脂平板（37℃，24小时），观察典型菌落（灰白色、卷发状边缘）；同时接种碳酸氢钠琼脂（5%CO₂环境），形成黏液型菌落（有荚膜）。（4）生化鉴定：触酶阳性，分解葡萄糖产酸不产气，动力阴性（与其他需氧芽胞杆菌鉴别）。（5）毒力检测：PCR检测炭疽毒素基因（pagA、lef、cya）和荚膜基因（capBCAD）。（6）动物实验（可选）：小鼠皮下接种培养物，72小时内死亡，剖检可见脾脏肿大，心血涂片见大量有荚膜的革兰阳性杆菌。结果判读：镜检、培养、生化及毒力基因检测均阳性可确诊为炭疽芽胞杆菌；若仅镜检或培养阳性需结合临床症状。2.某社区爆发诺如病毒胃肠炎疫情（50例患者，症状为呕吐、水样便），作为疾控中心微生物检验人员，需完成以下任务：（1）设计样本采集与运输方案；（2）制定实验室检测流程；（3）提出防控建议。答案：（1）样本采集与运输：采集对象：急性期患者（发病2448小时内）粪便/肛拭子，至少10份；环境样本（患者呕吐物、水龙头表面）。采集量：粪便510g/份，肛拭子用含病毒保存液的管收集。运输条件：样本置于4℃冷藏（避免冻融），24小时内送检；若需长途运输，加冰袋（20℃以下可长期保存）。（2）实验室检测流程：核酸提取：粪便样本用RNA提取试剂盒（如QIAampViralRNAMiniKit）提取病毒RNA。RTPCR检测：扩增诺如病毒RNA依赖的RNA聚合酶（RdRp）基因或衣壳蛋白（VP1）基因，引物覆盖GI、GII群。基因测序：阳性样本进行VP1区测序，确定基因型（如GII.4型）。环境样本检测：呕吐物用