2024-2025学年广东省惠州五校高二下学期第二次联考（期中）生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1广东省惠州五校2024-2025学年高二下学期第二次联考（期中）一、选择题：本题共16小题，第1~12题，每小题2分，第13~16题，每小题4分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1.关于微生物的培养和利用，下列说法正确的是（）A.常用的灭菌方法包括：高压蒸汽灭菌、干热灭菌和湿热灭菌三种B.为了避免感染，操作者使用过的培养基应尽快扔进垃圾桶C.利用发酵工程生产的食品在分离、提纯之后即可包装上市D.进入微生物实验室必须穿工作服，必要时还应戴好口罩、帽子和手套【答案】D〖祥解〗灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面合或内部的部分微生物（不包括芽孢与孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法，巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。【详析】A、常用的灭菌方法包括：灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌三种，A错误；B、使用过培养基应先灭菌再丢弃，B错误；C、利用发酵工程生产的食品在分离、提纯之后要进行检测，合格之后才能包装上市，C错误；D、进入微生物实验室必须穿工作服，必要时还应戴好口罩、帽子和手套，防止自身被微生物感染，D正确。故选D。2.在动物细胞工程和胚胎工程中所用的物质或方法和其发挥的作用正确的组合是（）A肝素——诱导精子与卵细胞受精B.胃蛋白酶——动物细胞培养时分散细胞C.聚乙二醇——诱导细胞分化D.显微操作法——卵母细胞去核【答案】D〖祥解〗诱导动物细胞融合的方法有：电融合法，聚乙二醇融合法，灭活病毒诱导法。【详析】A、肝素可诱导精子获能，A错误；B、将动物组织细胞分散开的酶是胰蛋白酶，因为胃蛋白酶适宜的pH为2左右，当pH大于6时，胃蛋白酶活性丧失，而胰蛋白酶的适宜pH为7.2～8.4，B错误；C、聚乙二醇诱导细胞融合，C错误；D、显微操作法可将次级卵母细胞去核，D正确。故选D。3.面包、酸奶、腐乳的制作等离不开传统发酵技术；啤酒、味精乃至胰岛素等药物的工业化生产，比传统发酵生产要复杂的多，需要通过发酵工程来实现。下列关于发酵工程的叙述错误的是（）A.在适宜条件下，将原料通过微生物无氧呼吸转化为人类所需要的产物的过程称作发酵B.微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来改良土壤C.青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力D.发酵工程生产白僵菌可以防治玉米螟、松毛虫等虫害【答案】A〖祥解〗发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。【详析】A、在适宜条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程称作发酵，该过程微生物不一定都进行无氧呼吸，A错误；B、微生物肥料是利用微生物代谢产生的有机酸、生物活性物质等来改良土壤肥力，发挥作用，B正确；C、微生物在农牧业上的应用，可用于生产微生物饲料，如在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力，C正确；D、白僵菌是一种具有广泛应用价值的广谱性昆虫病原真菌，它能够寄生在100多种昆虫和螨类体内，通过产生的孢子侵染害虫，在害虫体内生长繁殖，从而导致害虫死亡，发酵工程生产白僵菌可以防治玉米螟、松毛虫等虫害，D正确。故选A。4.铁皮石斛是非常好的药材，但其自然繁殖力极弱，生长缓慢，由于人们的掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列说法正确的是（）A.外植体脱分化后形成具有特定结构和功能的愈伤组织B.提高培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽C.接种时注意应将茎段的形态学上端插入培养基中D.通过植物细胞培养技术获得铁皮石斛的次生代谢物体现了细胞的全能性【答案】B〖祥解〗植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导形成完整植株的技术；原理为植物细胞的全能性；基本流程为：外植体→愈伤组织→诱导生芽、生根→完整植株。【详析】A、愈伤组织没有特定的结构，A错误；B、细胞分裂素促进发芽，提高培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽，B正确；C、接种时注意应将茎段的形态学下端插入培养基中，C错误；D、通过植物细胞培养技术获得铁皮石斛的次生代谢物没有发育成一个个体，不能体现细胞的全能性，D错误。故选B。5.传统发酵食品是我国饮食文化的重要组成部分。下表中发酵食品制作所使用的主要菌种和制作条件均正确的是（）选项食品名称主要菌种制作条件A腐乳毛霉有氧B果醋醋酸菌无氧C酸奶乳酸菌有氧D泡菜酵母菌无氧A.A B.B C.C D.D【答案】A〖祥解〗（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。（2）参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。（3）参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。（4）泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【详析】A、腐乳制作的主要菌种是毛霉，毛霉是需氧型微生物，在有氧条件下生长繁殖，将豆腐中的成分进行分解等一系列反应，A正确；B、果醋制作的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，需要在有氧条件下将酒精转化为醋酸，B错误；C、酸奶制作的主要菌种是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，在无氧条件下将葡萄糖分解产生乳酸，C错误；D、泡菜制作的主要菌种是乳酸菌，而不是酵母菌，乳酸菌在无氧条件下发酵产生乳酸，D错误。故选A。6.幽门螺旋杆菌（能分解对热不稳定的尿素）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病菌。从带菌者胃黏膜样本中分离出该细菌，相关实验步骤和方法不合理的是（）A.选择培养基应以尿素为唯一氮源，制备时应先灭菌后加入无菌尿素B.若要判断选择培养基是否起到作用，可设置接种相同菌液的牛肉膏蛋白胨培养基做为对照组C.幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用尿素D.尿素分解后培养基中pH升高，可利用刚果红染液进行鉴定【答案】D〖祥解〗（1）培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物；（2）分解尿素的细菌的鉴定：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。【详析】A、幽门螺杆菌能分解对热不稳定的尿素，故选择培养基应以尿素为唯一氮源，因为灭菌时温度较高，对热不稳定的尿素可能分解，故制备时应先灭菌后加入无菌尿素，A正确；B、要判断选择培养基是否起到作用，设置接种相同菌液的牛肉膏蛋白胨培养基做为对照组，若在选择培养基上只有目标菌生长，而牛肉膏蛋白胨培养基上多种菌生长，就说明选择培养基起到了筛选作用，B正确；C、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用尿素，C正确；D、尿素分解后产生氨，使培养基中pH升高，应利用酚红指示剂进行鉴定，而刚果红染液是用于鉴定纤维素分解菌的，D错误。故选D。7.精喹禾灵（分子式：C19H17ClN2O4）是一种旱田除草剂，能被土壤微生物分解。研究人员配制了甲、乙两种培养基用于从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物，甲的组分为无机盐、水和精喹禾灵，乙的组分为无机盐、水、精喹禾灵和琼脂，其操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（）A.两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐B.甲培养基的作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种C.乙培养基的作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种D.平板划线法可用于测定土壤中能降解精喹禾灵的细菌细胞数【答案】D〖祥解〗微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等，有的还需要生长因子等特殊的营养，微生物培养的关键是无菌操作，筛选和分离微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。【详析】A、两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐，A正确；B、甲培养基为液体培养基，其作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种，B正确；C、乙培养基含琼脂，为固体培养基，其作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种，C正确；D、稀释涂布平板法或显微镜直接计数法可用于测定土壤中能降解精喹禾灵的细菌细胞数，但平板划线法不能用于微生物计数，D错误。故选D。8.下图表示水稻单倍体育种过程，用秋水仙素处理幼苗的作用是（）A.提高突变频率B.能大大缩短育种所需的年限C.引起细胞内染色体数目加倍D.诱导植物细胞表达出全能性【答案】C〖祥解〗题意分析，图示为单倍体育种过程，基因型为AB的花粉含有1个染色体组，花粉离体培养形成单倍体幼苗，用秋水仙素处理后形成二倍体水稻，含有2个染色体组。【详析】A、用秋水仙素处理幼苗的作用是抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，A错误；B、单倍体育种能大大缩短育种年限，不是秋水仙素单独使用的作用，B错误；C、图示中含一个染色体组的单倍体幼苗用秋水仙素处理后形成的水稻含有2个染色体组，该过程中秋水仙素的作用是抑制纺锤体形成使染色体数目加倍，C正确；D、图中植物细胞表达出全能性，但与秋水仙素的施用无关，D错误。故选C。9.下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（）A.DNA聚合酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针”B.用做分子运输车的质粒有抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选C.DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的氢键D.不同的限制酶可能可以产生相同的黏性末端【答案】D〖祥解〗基因工程常用的运载体常用的有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，其中质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。【详析】A、基因工程中的“分子缝合针”是DNA连接酶而非DNA聚合酶，A错误；B、作为载体的质粒通常采用抗性基因（四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因）作为标记基因，便于成功导入重组DNA分子的受体细胞的筛选，B错误；C、T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，而不是氢键，C错误；D、不同限制酶识别的碱基序列一般不同，但切割后所产生的黏性未端可能是一样的，像这种能切割不同的DNA片段但产生相同黏性末端的一类限制酶称为同尾酶，D正确。故选D。10.中国制茶工艺源远流长。红茶制作包括凋萎、揉捻、发酵、高温干燥等工序，茶叶细胞液中的茶多酚（C22H18O11）被多酚氧化酶催化形成适量茶黄素是红茶风味形成的关键。近年来被消费者追捧的黑茶，其茶多酚在黑曲霉、根霉等发酵菌种分泌多种胞外酶的参与下，使茶叶成分发生复杂的变化并衍生出具有营养和药用价值的物质，这些物质对黑茶品质的形成起着重要的作用。下列关于红茶制作工序的相关叙述，错误的是（）A.揉捻能破坏细胞结构使多酚氧化酶与茶多酚接触B.发酵时保持适宜的温度以维持多酚氧化酶的活性C.发酵时有机酸含量增加不会影响多酚氧化酶活性D.高温灭活多酚氧化酶以防止过度氧化影响茶品质【答案】C〖祥解〗（1）酶是由活细胞产生的具有催化活性的有机物，其中大部分是蛋白质、少量是RNA。（2）酶的特性：①高效性；②专一性；③酶的作用的最适条件较温和（温度过高、PH过酸或过碱，酶的空间结构被破坏，酶失活）。【详析】A、揉捻能破坏细胞结构，使多酚氧化酶释放后与茶多酚充分接触，利于多酚氧化酶催化茶多酚生成适量茶黄素，A正确；B、酶的作用条件较温和，酶的活性受温度条件影响，因此发酵时保持适宜的温度以维持多酚氧化酶的活性，B正确；C、pH影响酶的活性，发酵时有机酸含量增加导致pH下降，进而影响多酚氧化酶活性，C错误；D、高温处理的目的是使多酚氧化酶失活，防止过度氧化影响茶品质，D正确。故选C。11.酸笋是广西的传统发酵食品，以其独特乳酸风味闻名。其制作流程包括选笋、切块、蒸煮、冷却、装坛（添加适量食盐）、密封发酵等。下列叙述错误的是（）A.煮笋可使蛋白质变性从而容易被微生物利用B.装坛前用沸水冲洗容器，并用75%酒精擦拭内壁C.腌制过程加入的食盐多会缩短发酵的时间D.发酵初期可能出现少量气泡，与微生物代谢有关【答案】C〖祥解〗无菌技术：(1)关键：防止外来杂菌的入侵。(2)具体操作：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。【详析】A、煮笋可使蛋白质变性，结构变得松散，易于消化和吸收，从而容易被微生物利用，A正确；B、发酵过程中应避免杂菌污染，可用开水烫洗玻璃罐，并用酒精擦拭消毒，B正确；C、腌制过程加入的食盐多，会抑制微生物的活性，从而延长发酵的时间，C错误；D、酸笋腌制发酵的过程有多种微生物的参与，如酵母菌、乳酸菌等，酵母菌进行细胞呼吸会释放出CO2，D正确。故选C。12.如图为诺贝尔奖获得者山中伸弥团队制备iPS细胞（诱导多能干细胞）的过程示意图：①小鼠胚胎成纤维细胞培养→②用分别含有Oct4、Sox2、c－Myc、Klf4基因的四种慢病毒载体感染小鼠胚胎成纤维细胞→③置于含有饲养层细胞的胚胎干细胞培养基中培养→④鼠胚胎成纤维细胞脱分化，形成iPS细胞。下列相关叙述正确的是（）A.步骤①应在含10％CO2恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pHB.步骤②由于慢病毒载体会受到免疫细胞的攻击，可能导致感染效率的降低C.步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子D.步骤④形成iPS细胞实质是基因的选择性表达，使其功能趋向于专门化【答案】C〖祥解〗诱导的多能性干细胞可以通过基因转染等细胞重编程技术人工诱导获得的，具有类似于胚胎干细胞多能性分化潜力的干细胞。干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能APSC多能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。【详析】A、据图可知，步骤①是小鼠胚胎成纤维细胞培养，应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，其中O2是细胞代谢必需的，CO2的作用是维持培养液的pH，A错误；B、图中培养基中培养的是胚胎成纤维细胞，没有免疫细胞，因此慢病毒载体不会受到免疫细胞的攻击，B错误；C、细胞需依赖于饲养层细胞所分泌的生长因子，以维持自身生长、繁殖的需要，因此步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子，C正确；D、步骤④是脱分化形成iPS细胞，未发生基因的选择性表达，其功能未趋向于专门化，在诱导因子的作用下，iPS细胞可分化成多种细胞，D错误。故选C。13.图1为某种质粒结构简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是（）A.在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRIB.如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRI酶切点有1个C.为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理D.质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体【答案】B〖祥解〗限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，限制酶切割DNA后会使DNA片段形成黏性末端或平末端。【详析】A、在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ，因为EcoRⅠ在质粒和外源DNA上都有酶切位点，A正确；B、如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，而不是1个，B错误；C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，这样可以使质粒和目的基因两端的黏性末端不同，避免自身环化，C正确；D、质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体，D正确。故选B。14.我国科学家为扩大大熊猫培育，进行了开创性研究。他们选择出生夭折的大熊猫作为供核个体，家兔细胞作为受体细胞，巧妙构建出大熊猫-兔重构胚。随后，科学家利用这一独特的重构胚进行了实验，实验处理及结果如下图所示。（注：CB为细胞松弛素，Colc为秋水仙素，均为细胞骨架抑制剂，使用时用DMSO溶剂溶解）。下列叙述错误的是（）A.DMSO组的作用是作为对照，DMSO溶剂本身对核移植成功率有显著影响B.取出生夭折的熊猫相应组织，剪碎后需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理C.需要通过对家兔进行超数排卵处理，获得大量处于MⅡ期的去核卵母细胞D.细胞松弛素能够提高核移植成功率，且其成功率高于对照组和其他实验组【答案】A〖祥解〗动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。【详析】A、DMSO组的作用是作为对照，其目的是排除DMSO溶剂本身对核移植成功率的影响，根据实验中的数据不能得出DMSO溶剂本身对核移植成功率有显著影响的结论，A错误；B、取出生夭折的熊猫相应组织，剪碎后需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，其目的是获得单细胞悬液，B正确；C、实验过程中需要通过对家兔进行超数排卵处理，其目的是获得大量处于MⅡ期的去核卵母细胞，为核移植提供更多的实验材料，C正确；D、实验数据显示，第1组的细胞数高于其他实验组和对照组，故实验结果表明细胞松弛素能够提高核移植成功率，D正确。故选A。15.下列有关实验的描述中，正确的有（）①腐乳制作过程有多种微生物参与，其中毛霉和根霉为互利共生关系②果酒发酵的最适温度为30～35℃，果醋发酵的最适温度为18～30℃③传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主④果酒、泡菜发酵利用的主要菌种均是真核生物，果醋、腐乳发酵利用的主要菌种均是原核生物⑤在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，才可以洗得彻底⑥制作泡菜时要选无裂纹无砂眼、盖子吻合好的坛子，需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制杂菌繁殖A.1项 B.2项 C.3项 D.4项【答案】A〖祥解〗果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵，果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精转变成醋酸的代谢，腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类，泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸发酵。【详析】①毛霉和根霉都能参与腐乳的制作，但是缺少二者之一，另一微生物并不会死亡，所以两者并不是互利共生关系，二者为竞争关系，①错误；②果酒发酵的最适温度为18~30°C，果醋发酵的最适温度为30~35°C，②错误；③发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程，传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主，③正确；④果酒、腐乳发酵利用的主要菌种分别是酵母菌和毛霉，均是真核生物，果醋、泡菜发酵利用的主要菌种分别是醋酸菌和乳酸菌，均是原核生物，④错误；⑤在果酒的制作过程中，应先进行冲洗，然后再去除葡萄的枝梗，且冲洗时不能反复冲洗，避免冲洗掉菌种，⑤错误；⑥制作泡菜时要选用火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的泡菜坛子，坛子需要加水密封目的是隔绝空气，为乳酸菌发酵提供无氧环境，⑥错误；综上所述，③正确，A正确，BCD错误。故选A。16.某同学实验时选取了长度为14kb（kb表示千碱基对）的某DNA分子，并用限制酶A、限制酶B进行充分酶切，结果如表，下列叙述错误的是（）实验用酶限制酶A限制酶B限制酶A和限制酶B得到的片段长度14kb6kb、8kb3kb、5kb、6kbA.酶A和酶B切割可能产生相同的黏性末端B.该DNA分子上可能不含限制酶A的酶切位点C.DNA连接酶和限制酶都作用于磷酸二酯键D.限制酶需要在适宜温度下才能更好地发挥作用【答案】B〖祥解〗【详析】A、不同限制酶可能切割出相同的黏性末端，酶A和酶B切割可能产生相同的黏性末端，A正确；B、当该DNA为环状DNA且只有一个酶A的酶切位点，用酶A切割后得到14kb的片段，B错误；C、限制酶切割磷酸二酯键，DNA连接酶连接磷酸二酯键，因此DNA连接酶和限制酶都作用于磷酸二酯键，C正确；D、酶活性受温度影响，限制酶需要在适宜温度下才能更好地发挥作用，D正确。故选B。二、非选择题：本题共5小题，共60分。17.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术，生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题：（1）图2中过程②选用的骨髓瘤细胞________（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________和________才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是_______（至少答出两点）。（3）与植物体细胞杂交相比，诱导动物细胞融合特有的方法是用________诱导融合。体外培养杂交瘤细胞从培养基的成分来看，由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚还需要加入_______。（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合给药后，对人体副作用更小，原因是________。【答案】（1）不能（2）①.抗体检测②.克隆化培养③.特异性强、灵敏度高、纯度高，可大量制备（3）①.灭活的病毒②.血清（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤〖祥解〗单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。【解析】（1）图2中过程②选用的杂交瘤细胞才能在HAT培养基上生长，骨髓瘤细胞和骨髓瘤与骨髓瘤融合细胞唯一的一条DNA复制途径被阻断，不能在HAT培养基上生长。（2）要筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，需对③筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测。传统血清抗体特异性弱，产量低，单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高、纯度高，可大量制备。（3）植物体细胞杂交可用物理和化学方法诱导原生质体融合，诱导动物细胞融合除物理和化学方法外，特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。动物血清含有动物细胞生长所必需物质，故体外培养杂交瘤细胞还需要加入动物血清。（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤，故与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合给药后，对人体副作用更小。18.中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图。回答下列问题：（1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，每次消毒处理处理后用_______冲洗叶片2~3次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。（2）上图①过程利用_______酶处理获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合以及再生），过程②常用的方法有_______（至少答出两种）。该诱导融合过程利用的原理是_______。（3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。组别A组B组C组（空白对照组）实验处理三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物每天一次，等量灌胃，连续一周，最后检测各组小鼠的胸腺重量①表格中C组的实验处理为_______。②若实验结果为_______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。【答案】（1）无菌水（2）①.纤维素酶和果胶②.聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法、电融合法、离心法③.细胞膜的流动性（3）①.等量的蒸馏水②.A、B两组的胸腺重量（基本）相同，且都大于C组〖祥解〗分析图可知，图中表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。【解析】（1）为防止消毒液对外植体造成伤害，每次处理后用无菌水冲洗叶片2~3次，去除残留于叶片上的药剂。（2）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以上图①过程利用纤维素酶和果胶酶处理获取原生质体。过程②原生质体融合常用的方法有物理法（如电融合法、离心法）和化学法（如聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法）。该诱导融合过程利用的原理是细胞膜具有一定的流动性，原生质体才能够相互融合。（3）①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。②若实验结果为A、B两组的胸腺重量（基本）相同，且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。19.淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作和计数操作，过程如图1。回答下列问题：（1）取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要________（填操作），要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株，所用培养基的碳源是________；接种时需设置一组未接种培养基进行培养的目的是_______。（2）根据图1可得出每克菌液中的活菌数________个。用此方法获得的菌落数一般比活菌的实际数目少，原因是_______。（3）如图2所示，为正确完成整个接种过程，接种环至少进行________次灼烧灭菌。【答案】（1）①.灭菌②.淀粉③.作对照，检测培养基是否被污染（2）①.1.7×109②.当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（3）6〖祥解〗在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。【解析】（1）为了避免杂菌污染，取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要进行灭菌处理，要筛选出产淀粉酶的活性菌株，由于该菌株能分解利用淀粉，所以所用培养基的碳源是淀粉；接种时设置一组未接种培养基进行培养，目的是作对照，检测培养基是否被污染，若未接种的培养基上没有菌落生长，说明培养基未被污染，若有菌落生长，则说明培养基被杂菌污染。（2）由图1可知，对菌液进行了5次10倍稀释，从最后一个试管中取0.1mL菌液进行涂布，统计的三个平板上的菌落数分别为168个、175个、167个，平均菌落数为（168+175+167）/3=170个，每克菌液中的活菌数计算公式为C/V×M（C为平均菌落数，V为涂布时所用菌液体积，M为稀释倍数），这里C=170，V=0.1mL，M=106，则每克菌液中的活菌数为170/0.1×106=1.7×109个。用稀释涂布平板法获得的菌落数一般比活菌的实际数目少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（3）平板划线法接种时，在每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，从图2可以看出，一共进行了5次划线，所以接种环至少进行6次灼烧灭菌，分别是接种前灼烧，每次划线后灼烧，最后一次划线结束后灼烧。20.某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验，选择了不同温度（20℃、-20℃）条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，部分实验步骤如图1所示。回答下列问题：（1）选择花菜等植物材料时，加入少量石英砂，其作用是_________，同时加入洗涤剂可_______。（2）图1中，将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，进行离心处理，再取________（填“上清液”或“沉淀物”）放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA，这样做的原理是_______。（3）向其中加入NaCl溶液调节浓度至0.14mol/L时，DNA在溶液中溶解度________，从而析出。（4）DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析，相同温度条件下，________的DNA粗提取含量最低。【答案】（1）①.有助于研磨得更充分②.瓦解细胞膜，有利于DNA释放（2）①.上清液②.DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精（3）最小（4）辣椒〖祥解〗DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。【解析】（1）加入少量石英砂，其作用是有助于研磨的更充分，因为石英砂硬度较大，在研磨过程中可以增加摩擦力，使植物细胞更好地破碎，从而释放出细胞内的DNA等物质，同时加入洗涤剂可以瓦解细胞膜，有利于DNA释放，洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜上的脂质和蛋白质，破坏细胞膜的结构，进而使细胞内的DNA更容易被释放到研磨液中。（2）将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中进行离心处理，由于DNA溶解在溶液中，而一些不溶性的杂质会沉淀下来，所以要取上清液放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA，这样做的原理是DNA不溶于酒精溶液，某些蛋白质溶于酒精，通过加入预冷酒精，可使DNA析出，而杂质仍留在酒精溶液中，从而达到初步分离DNA的目的。（3）DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，当向其中加入NaCl溶液调节浓度至0.14mol/L时，DNA在溶液中溶解度最小，从而析出。（4）从图2中可以看出，在相同温度条件下，无论是20℃还是-20℃，辣椒对应的蓝色深浅相对程度都最低，而蓝色深浅程度可以反映DNA的含量（蓝色越深，DNA含量越高），所以辣椒的DNA粗提取含量最低。21.2N/4N嵌合体胚胎是指用四倍体（4N）胚胎与二倍体胚胎（2N）或胚胎干细胞（ES细胞）进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2N/4N嵌合体胚胎的构建常用方法如图，据图分析回答下列问题：（1）受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞发育到________时期，才具备受精的能力，而精子需经过________过程才能和卵细胞结合。胚胎移植前，要对受体进行________处理，以保证胚胎能在受体子宫内正常发育。（2）2N的ES细胞来自胚胎发育过程的________期，本实验中从功能上说明了该细胞_______。（3）2N/4N嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有_______（至少答出两种）。（4）ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比，遗传物质来源的区别主要是_______。【答案】（1）①.MⅡ②.获能③.同期发情（2）①.囊胚②.具有发育的全能性（3）动物细胞的培养、动物细胞的融合、胚胎移植（4）用ES细胞经嵌合体方法克隆的动物是完全的复制体而用核移植方法克隆的动物只是核型一致，但细胞质类型不一定相同〖祥解〗胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术，经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。【解析】（1）在受精过程中，卵细胞需要达到减数第二次分裂中期（MⅡ）才具备受精能力，而精子不能直接与卵细胞结合，必须先在雌性生殖道中停留一段时间，经历精子获能过程，才具备与卵子受精的能力。胚胎移植前，要对受体进行同期发情处理，以保证胚胎能在受体子宫内正常发育。（2）囊胚期的特点是细胞开始出现分化，不过该时期细胞的全能性仍比较高，其中聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来会发育成胎儿的各种组织，2N的ES细胞就来自胚胎发育过程的囊胚期，从本实验能看出该细胞具有发育的全能性，可参与到嵌合体胚胎的发育过程中。（3）从构建2n/4n嵌合体胚胎的过程来看，首先要对相关细胞进行动物细胞的培养，将四倍体（4n）胚胎与二倍体胚胎（2n）或胚胎干细胞（ES细胞）进行聚合，这涉及动物细胞融合技术，最后要将构建好的胚胎移植到雌性动物体内，用到了胚胎移植技术。（4）ES细胞经嵌合体方法培育的动物，其细胞来源于二倍体胚胎的内细胞团，因此是原来细胞的完全复制体，而核移植也就是克隆，克隆动物的遗传物质中细胞核DNA与供核细胞一致，但细胞质遗传物质来自提供细胞质的细胞，所以用核移植方法克隆的动物只是核型一致，但胞质类型却不一定相同。广东省惠州五校2024-2025学年高二下学期第二次联考（期中）一、选择题：本题共16小题，第1~12题，每小题2分，第13~16题，每小题4分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1.关于微生物的培养和利用，下列说法正确的是（）A.常用的灭菌方法包括：高压蒸汽灭菌、干热灭菌和湿热灭菌三种B.为了避免感染，操作者使用过的培养基应尽快扔进垃圾桶C.利用发酵工程生产的食品在分离、提纯之后即可包装上市D.进入微生物实验室必须穿工作服，必要时还应戴好口罩、帽子和手套【答案】D〖祥解〗灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面合或内部的部分微生物（不包括芽孢与孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法，巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。【详析】A、常用的灭菌方法包括：灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌三种，A错误；B、使用过培养基应先灭菌再丢弃，B错误；C、利用发酵工程生产的食品在分离、提纯之后要进行检测，合格之后才能包装上市，C错误；D、进入微生物实验室必须穿工作服，必要时还应戴好口罩、帽子和手套，防止自身被微生物感染，D正确。故选D。2.在动物细胞工程和胚胎工程中所用的物质或方法和其发挥的作用正确的组合是（）A肝素——诱导精子与卵细胞受精B.胃蛋白酶——动物细胞培养时分散细胞C.聚乙二醇——诱导细胞分化D.显微操作法——卵母细胞去核【答案】D〖祥解〗诱导动物细胞融合的方法有：电融合法，聚乙二醇融合法，灭活病毒诱导法。【详析】A、肝素可诱导精子获能，A错误；B、将动物组织细胞分散开的酶是胰蛋白酶，因为胃蛋白酶适宜的pH为2左右，当pH大于6时，胃蛋白酶活性丧失，而胰蛋白酶的适宜pH为7.2～8.4，B错误；C、聚乙二醇诱导细胞融合，C错误；D、显微操作法可将次级卵母细胞去核，D正确。故选D。3.面包、酸奶、腐乳的制作等离不开传统发酵技术；啤酒、味精乃至胰岛素等药物的工业化生产，比传统发酵生产要复杂的多，需要通过发酵工程来实现。下列关于发酵工程的叙述错误的是（）A.在适宜条件下，将原料通过微生物无氧呼吸转化为人类所需要的产物的过程称作发酵B.微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来改良土壤C.青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力D.发酵工程生产白僵菌可以防治玉米螟、松毛虫等虫害【答案】A〖祥解〗发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。【详析】A、在适宜条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程称作发酵，该过程微生物不一定都进行无氧呼吸，A错误；B、微生物肥料是利用微生物代谢产生的有机酸、生物活性物质等来改良土壤肥力，发挥作用，B正确；C、微生物在农牧业上的应用，可用于生产微生物饲料，如在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力，C正确；D、白僵菌是一种具有广泛应用价值的广谱性昆虫病原真菌，它能够寄生在100多种昆虫和螨类体内，通过产生的孢子侵染害虫，在害虫体内生长繁殖，从而导致害虫死亡，发酵工程生产白僵菌可以防治玉米螟、松毛虫等虫害，D正确。故选A。4.铁皮石斛是非常好的药材，但其自然繁殖力极弱，生长缓慢，由于人们的掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列说法正确的是（）A.外植体脱分化后形成具有特定结构和功能的愈伤组织B.提高培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽C.接种时注意应将茎段的形态学上端插入培养基中D.通过植物细胞培养技术获得铁皮石斛的次生代谢物体现了细胞的全能性【答案】B〖祥解〗植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导形成完整植株的技术；原理为植物细胞的全能性；基本流程为：外植体→愈伤组织→诱导生芽、生根→完整植株。【详析】A、愈伤组织没有特定的结构，A错误；B、细胞分裂素促进发芽，提高培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽，B正确；C、接种时注意应将茎段的形态学下端插入培养基中，C错误；D、通过植物细胞培养技术获得铁皮石斛的次生代谢物没有发育成一个个体，不能体现细胞的全能性，D错误。故选B。5.传统发酵食品是我国饮食文化的重要组成部分。下表中发酵食品制作所使用的主要菌种和制作条件均正确的是（）选项食品名称主要菌种制作条件A腐乳毛霉有氧B果醋醋酸菌无氧C酸奶乳酸菌有氧D泡菜酵母菌无氧A.A B.B C.C D.D【答案】A〖祥解〗（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。（2）参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。（3）参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。（4）泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【详析】A、腐乳制作的主要菌种是毛霉，毛霉是需氧型微生物，在有氧条件下生长繁殖，将豆腐中的成分进行分解等一系列反应，A正确；B、果醋制作的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，需要在有氧条件下将酒精转化为醋酸，B错误；C、酸奶制作的主要菌种是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，在无氧条件下将葡萄糖分解产生乳酸，C错误；D、泡菜制作的主要菌种是乳酸菌，而不是酵母菌，乳酸菌在无氧条件下发酵产生乳酸，D错误。故选A。6.幽门螺旋杆菌（能分解对热不稳定的尿素）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病菌。从带菌者胃黏膜样本中分离出该细菌，相关实验步骤和方法不合理的是（）A.选择培养基应以尿素为唯一氮源，制备时应先灭菌后加入无菌尿素B.若要判断选择培养基是否起到作用，可设置接种相同菌液的牛肉膏蛋白胨培养基做为对照组C.幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用尿素D.尿素分解后培养基中pH升高，可利用刚果红染液进行鉴定【答案】D〖祥解〗（1）培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物；（2）分解尿素的细菌的鉴定：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。【详析】A、幽门螺杆菌能分解对热不稳定的尿素，故选择培养基应以尿素为唯一氮源，因为灭菌时温度较高，对热不稳定的尿素可能分解，故制备时应先灭菌后加入无菌尿素，A正确；B、要判断选择培养基是否起到作用，设置接种相同菌液的牛肉膏蛋白胨培养基做为对照组，若在选择培养基上只有目标菌生长，而牛肉膏蛋白胨培养基上多种菌生长，就说明选择培养基起到了筛选作用，B正确；C、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用尿素，C正确；D、尿素分解后产生氨，使培养基中pH升高，应利用酚红指示剂进行鉴定，而刚果红染液是用于鉴定纤维素分解菌的，D错误。故选D。7.精喹禾灵（分子式：C19H17ClN2O4）是一种旱田除草剂，能被土壤微生物分解。研究人员配制了甲、乙两种培养基用于从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物，甲的组分为无机盐、水和精喹禾灵，乙的组分为无机盐、水、精喹禾灵和琼脂，其操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（）A.两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐B.甲培养基的作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种C.乙培养基的作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种D.平板划线法可用于测定土壤中能降解精喹禾灵的细菌细胞数【答案】D〖祥解〗微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等，有的还需要生长因子等特殊的营养，微生物培养的关键是无菌操作，筛选和分离微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。【详析】A、两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐，A正确；B、甲培养基为液体培养基，其作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种，B正确；C、乙培养基含琼脂，为固体培养基，其作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种，C正确；D、稀释涂布平板法或显微镜直接计数法可用于测定土壤中能降解精喹禾灵的细菌细胞数，但平板划线法不能用于微生物计数，D错误。故选D。8.下图表示水稻单倍体育种过程，用秋水仙素处理幼苗的作用是（）A.提高突变频率B.能大大缩短育种所需的年限C.引起细胞内染色体数目加倍D.诱导植物细胞表达出全能性【答案】C〖祥解〗题意分析，图示为单倍体育种过程，基因型为AB的花粉含有1个染色体组，花粉离体培养形成单倍体幼苗，用秋水仙素处理后形成二倍体水稻，含有2个染色体组。【详析】A、用秋水仙素处理幼苗的作用是抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，A错误；B、单倍体育种能大大缩短育种年限，不是秋水仙素单独使用的作用，B错误；C、图示中含一个染色体组的单倍体幼苗用秋水仙素处理后形成的水稻含有2个染色体组，该过程中秋水仙素的作用是抑制纺锤体形成使染色体数目加倍，C正确；D、图中植物细胞表达出全能性，但与秋水仙素的施用无关，D错误。故选C。9.下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（）A.DNA聚合酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针”B.用做分子运输车的质粒有抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选C.DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的氢键D.不同的限制酶可能可以产生相同的黏性末端【答案】D〖祥解〗基因工程常用的运载体常用的有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，其中质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。【详析】A、基因工程中的“分子缝合针”是DNA连接酶而非DNA聚合酶，A错误；B、作为载体的质粒通常采用抗性基因（四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因）作为标记基因，便于成功导入重组DNA分子的受体细胞的筛选，B错误；C、T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，而不是氢键，C错误；D、不同限制酶识别的碱基序列一般不同，但切割后所产生的黏性未端可能是一样的，像这种能切割不同的DNA片段但产生相同黏性末端的一类限制酶称为同尾酶，D正确。故选D。10.中国制茶工艺源远流长。红茶制作包括凋萎、揉捻、发酵、高温干燥等工序，茶叶细胞液中的茶多酚（C22H18O11）被多酚氧化酶催化形成适量茶黄素是红茶风味形成的关键。近年来被消费者追捧的黑茶，其茶多酚在黑曲霉、根霉等发酵菌种分泌多种胞外酶的参与下，使茶叶成分发生复杂的变化并衍生出具有营养和药用价值的物质，这些物质对黑茶品质的形成起着重要的作用。下列关于红茶制作工序的相关叙述，错误的是（）A.揉捻能破坏细胞结构使多酚氧化酶与茶多酚接触B.发酵时保持适宜的温度以维持多酚氧化酶的活性C.发酵时有机酸含量增加不会影响多酚氧化酶活性D.高温灭活多酚氧化酶以防止过度氧化影响茶品质【答案】C〖祥解〗（1）酶是由活细胞产生的具有催化活性的有机物，其中大部分是蛋白质、少量是RNA。（2）酶的特性：①高效性；②专一性；③酶的作用的最适条件较温和（温度过高、PH过酸或过碱，酶的空间结构被破坏，酶失活）。【详析】A、揉捻能破坏细胞结构，使多酚氧化酶释放后与茶多酚充分接触，利于多酚氧化酶催化茶多酚生成适量茶黄素，A正确；B、酶的作用条件较温和，酶的活性受温度条件影响，因此发酵时保持适宜的温度以维持多酚氧化酶的活性，B正确；C、pH影响酶的活性，发酵时有机酸含量增加导致pH下降，进而影响多酚氧化酶活性，C错误；D、高温处理的目的是使多酚氧化酶失活，防止过度氧化影响茶品质，D正确。故选C。11.酸笋是广西的传统发酵食品，以其独特乳酸风味闻名。其制作流程包括选笋、切块、蒸煮、冷却、装坛（添加适量食盐）、密封发酵等。下列叙述错误的是（）A.煮笋可使蛋白质变性从而容易被微生物利用B.装坛前用沸水冲洗容器，并用75%酒精擦拭内壁C.腌制过程加入的食盐多会缩短发酵的时间D.发酵初期可能出现少量气泡，与微生物代谢有关【答案】C〖祥解〗无菌技术：(1)关键：防止外来杂菌的入侵。(2)具体操作：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。【详析】A、煮笋可使蛋白质变性，结构变得松散，易于消化和吸收，从而容易被微生物利用，A正确；B、发酵过程中应避免杂菌污染，可用开水烫洗玻璃罐，并用酒精擦拭消毒，B正确；C、腌制过程加入的食盐多，会抑制微生物的活性，从而延长发酵的时间，C错误；D、酸笋腌制发酵的过程有多种微生物的参与，如酵母菌、乳酸菌等，酵母菌进行细胞呼吸会释放出CO2，D正确。故选C。12.如图为诺贝尔奖获得者山中伸弥团队制备iPS细胞（诱导多能干细胞）的过程示意图：①小鼠胚胎成纤维细胞培养→②用分别含有Oct4、Sox2、c－Myc、Klf4基因的四种慢病毒载体感染小鼠胚胎成纤维细胞→③置于含有饲养层细胞的胚胎干细胞培养基中培养→④鼠胚胎成纤维细胞脱分化，形成iPS细胞。下列相关叙述正确的是（）A.步骤①应在含10％CO2恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pHB.步骤②由于慢病毒载体会受到免疫细胞的攻击，可能导致感染效率的降低C.步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子D.步骤④形成iPS细胞实质是基因的选择性表达，使其功能趋向于专门化【答案】C〖祥解〗诱导的多能性干细胞可以通过基因转染等细胞重编程技术人工诱导获得的，具有类似于胚胎干细胞多能性分化潜力的干细胞。干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能APSC多能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。【详析】A、据图可知，步骤①是小鼠胚胎成纤维细胞培养，应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，其中O2是细胞代谢必需的，CO2的作用是维持培养液的pH，A错误；B、图中培养基中培养的是胚胎成纤维细胞，没有免疫细胞，因此慢病毒载体不会受到免疫细胞的攻击，B错误；C、细胞需依赖于饲养层细胞所分泌的生长因子，以维持自身生长、繁殖的需要，因此步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子，C正确；D、步骤④是脱分化形成iPS细胞，未发生基因的选择性表达，其功能未趋向于专门化，在诱导因子的作用下，iPS细胞可分化成多种细胞，D错误。故选C。13.图1为某种质粒结构简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是（）A.在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRIB.如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRI酶切点有1个C.为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理D.质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体【答案】B〖祥解〗限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，限制酶切割DNA后会使DNA片段形成黏性末端或平末端。【详析】A、在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ，因为EcoRⅠ在质粒和外源DNA上都有酶切位点，A正确；B、如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，而不是1个，B错误；C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，这样可以使质粒和目的基因两端的黏性末端不同，避免自身环化，C正确；D、质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体，D正确。故选B。14.我国科学家为扩大大熊猫培育，进行了开创性研究。他们选择出生夭折的大熊猫作为供核个体，家兔细胞作为受体细胞，巧妙构建出大熊猫-兔重构胚。随后，科学家利用这一独特的重构胚进行了实验，实验处理及结果如下图所示。（注：CB为细胞松弛素，Colc为秋水仙素，均为细胞骨架抑制剂，使用时用DMSO溶剂溶解）。下列叙述错误的是（）A.DMSO组的作用是作为对照，DMSO溶剂本身对核移植成功率有显著影响B.取出生夭折的熊猫相应组织，剪碎后需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理C.需要通过对家兔进行超数排卵处理，获得大量处于MⅡ期的去核卵母细胞D.细胞松弛素能够提高核移植成功率，且其成功率高于对照组和其他实验组【答案】A〖祥解〗动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。【详析】A、DMSO组的作用是作为对照，其目的是排除DMSO溶剂本身对核移植成功率的影响，根据实验中的数据不能得出DMSO溶剂本身对核移植成功率有显著影响的结论，A错误；B、取出生夭折的熊猫相应组织，剪碎后需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，其目的是获得单细胞悬液，B正确；C、实验过程中需要通过对家兔进行超数排卵处理，其目的是获得大量处于MⅡ期的去核卵母细胞，为核移植提供更多的实验材料，C正确；D、实验数据显示，第1组的细胞数高于其他实验组和对照组，故实验结果表明细胞松弛素能够提高核移植成功率，D正确。故选A。15.下列有关实验的描述中，正确的有（）①腐乳制作过程有多种微生物参与，其中毛霉和根霉为互利共生关系②果酒发酵的最适温度为30～35℃，果醋发酵的最适温度为18～30℃③传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主④果酒、泡菜发酵利用的主要菌种均是真核生物，果醋、腐乳发酵利用的主要菌种均是原核生物⑤在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，才可以洗得彻底⑥制作泡菜时要选无裂纹无砂眼、盖子吻合好的坛子，需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制杂菌繁殖A.1项 B.2项 C.3项 D.4项【答案】A〖祥解〗果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵，果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精转变成醋酸的代谢，腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类，泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸发酵。【详析】①毛霉和根霉都能参与腐乳的制作，但是缺少二者之一，另一微生物并不会死亡，所以两者并不是互利共生关系，二者为竞争关系，①错误；②果酒发酵的最适温度为18~30°C，果醋发酵的最适温度为30~35°C，②错误；③发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程，传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主，③正确；④果酒、腐乳发酵利用的主要菌种分别是酵母菌和毛霉，均是真核生物，果醋、泡菜发酵利用的主要菌种分别是醋酸菌和乳酸菌，均是原核生物，④错误；⑤在果酒的制作过程中，应先进行冲洗，然后再去除葡萄的枝梗，且冲洗时不能反复冲洗，避免冲洗掉菌种，⑤错误；⑥制作泡菜时要选用火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的泡菜坛子，坛子需要加水密封目的是隔绝空气，为乳酸菌发酵提供无氧环境，⑥错误；综上所述，③正确，A正确，BCD错误。故选A。16.某同学实验时选取了长度为14kb（kb表示千碱基对）的某DNA分子，并用限制酶A、限制酶B进行充分酶切，结果如表，下列叙述错误的是（）实验用酶限制酶A限制酶B限制酶A和限制酶B得到的片段长度14kb6kb、8kb3kb、5kb、6kbA.酶A和酶B切割可能产生相同的黏性末端B.该DNA分子上可能不含限制酶A的酶切位点C.DNA连接酶和限制酶都作用于磷酸二酯键D.限制酶需要在适宜温度下才能更好地发挥作用【答案】B〖祥解〗【详析】A、不同限制酶可能切割出相同的黏性末端，酶A和酶B切割可能产生相同的黏性末端，A正确；B、当该DNA为环状DNA且只有一个酶A的酶切位点，用酶A切割后得到14kb的片段，B错误；C、限制酶切割磷酸二酯键，DNA连接酶连接磷酸二酯键，因此DNA连接酶和限制酶都作用于磷酸二酯键，C正确；D、酶活性受温度影响，限制酶需要在适宜温度下才能更好地发挥作用，D正确。故选B。二、非选择题：本题共5小题，共60分。17.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术，生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题：（1）图2中过程②选用的骨髓瘤细胞________（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________和________才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是_______（至少答出两点）。（3）与植物体细胞杂交相比，诱导动物细胞融合特有的方法是用________诱导融合。体外培养杂交瘤细胞从培养基的成分来看，由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚还需要加入_______。（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合给药后，对人体副作用更小，原因是________。【答案】（1）不能（2）①.抗体检测②.克隆化培养③.特异性强、灵敏度高、纯度高，可大量制备（3）①.灭活的病毒②.血清（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤〖祥解〗单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。【解析】（1）图2中过程②选用的杂交瘤细胞才能在HAT培养基上生长，骨髓瘤细胞和骨髓瘤与骨髓瘤融合细胞唯一的一条DNA复制途径被阻断，不能在HAT培养基上生长。（2）要筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，需对③筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测。传统血清抗体特异性弱，产量低，单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高、纯度高，可大量制备。（3）植物体细胞杂交可用物理和化学方法诱导原生质体融合，诱导动物细胞融合除物理和化学方法外，特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。动物血清含有动物细胞生长所必需物质，故体外培养杂交瘤细胞还需要加入动物血清。（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤，故与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合给药后，对人体副作用更小。18.中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图。回答下列问题：（1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，每次消毒处理处理后用_______冲洗叶片2~3次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。（2）上图①过程利用_______酶处理获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合以及再生），过程②常用的方法有_______（至少答出两种）。该诱导融合过程利用的原理是_______。（3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。组别A组B组C组（空白对照组）实验处理三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物每天一次，等量灌胃，连续一周，最后检测各组小鼠的胸腺重量①表格中C组的实验处理为_______。②若实验结果为_______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。【答案】（1）无菌水（2）①.纤维素酶和果胶②.聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法、电融合法、离心法③.细胞膜的流动性（3）①.等量的蒸馏水②.A、B两组的胸腺重量（基本）相同，且都大于C组〖祥解〗分析图可知，图中表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。【解析】（1）为防止消毒液对外植体造成伤害，每次处理后用无菌水冲洗叶片2~3次，去除残留于叶片上的药剂。（2）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以上图①过程利用纤维素酶和果胶酶处理获取原生质体。过程②原生质体融合常用的方法有物理法（如电融合法、离心法）和化学法（如聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法）。该诱导融合过程利用的原理是细胞膜具有一定的流动性，原生质体才能够相互融合。（3）①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。②若实验结果为A、B两组的胸腺重量（基本）相同，且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。19.淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作和计数操作，过程如图1。回答下列问题：（1）取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要________（填操作），要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株，所用培养基的碳源是________；接种时需设置一组未接种培养基进行培养的目的是_______。（2）根据图1可得出每克菌液中的活菌数________个。用此方法获得的菌落数一般比活菌的实际数目少，原因是_______。（3）如图2所示，为正确完成整个接种过程，接种环至少进行________次灼烧灭菌。【答案】（1）①.灭菌