生物反应器无菌灭菌技师（中级）考试试卷及答案

生物反应器无菌灭菌技师（中级）考试试卷及答案填空题（10题，每题1分）1.生物反应器常用的湿热灭菌方式主要有______和______。2.培养基灭菌的关键参数是温度、时间和______。3.无菌空气制备中，过滤介质的除菌效率主要取决于______和______。4.生物反应器灭菌前需对夹套进行______，防止冷热冲击损坏设备。5.灭菌过程中，排气阀的作用是排出______，保证灭菌温度均匀。6.在线灭菌（SIP）通常采用的灭菌介质是______。7.无菌检测常用的培养基是______。8.灭菌后生物反应器的冷却介质需经过______处理。9.干热灭菌的温度一般控制在______℃以上。10.培养基灭菌时，需确保培养基______，避免局部过热。答案1.饱和蒸汽灭菌；过热水灭菌2.蒸汽压力3.孔径大小；介质厚度4.预热5.冷空气6.饱和蒸汽7.营养琼脂培养基8.无菌9.16010.充分搅拌单项选择题（10题，每题2分）1.下列属于湿热灭菌的是？A.干热空气灭菌B.环氧乙烷灭菌C.饱和蒸汽灭菌D.紫外线灭菌2.生物反应器灭菌时，饱和蒸汽压力通常控制在？A.0.1-0.15MPaB.0.2-0.3MPaC.0.3-0.4MPaD.0.4-0.5MPa3.无菌空气预过滤器的作用是去除？A.微生物B.大颗粒杂质C.水分D.油雾4.灭菌失败的常见原因不包括？A.冷空气未排尽B.蒸汽压力不足C.培养基搅拌充分D.灭菌时间不够5.在线灭菌（SIP）设备的死角率应控制在多少以下？A.1%B.2%C.3%D.5%6.不能用于生物反应器灭菌的介质是？A.饱和蒸汽B.过热水C.干热空气D.酒精7.培养基灭菌后需冷却至多少温度以下接种？A.30℃B.40℃C.50℃D.60℃8.无菌检测的培养温度通常为？A.25℃B.30℃C.37℃D.42℃9.灭菌前无需检查的部件是？A.阀门密封性B.搅拌器转速C.蒸汽过滤器完整性D.培养基pH10.湿热灭菌的原理是？A.蛋白质变性B.破坏细胞膜C.氧化微生物D.干扰核酸合成答案1-5：CABCC；6-10：DBCDA多项选择题（10题，每题2分）1.生物反应器灭菌的对象包括？A.培养基B.设备内壁C.空气系统D.冷却系统2.湿热灭菌的优点有？A.穿透力强B.灭菌温度低C.时间短D.对设备腐蚀小3.无菌空气制备流程包括？A.粗过滤B.加热除湿C.精过滤D.冷却4.灭菌需监控的参数有？A.温度B.压力C.时间D.蒸汽流量5.生物反应器死角类型包括？A.管道盲端B.阀门内部C.搅拌轴密封D.夹套缝隙6.在线灭菌（SIP）注意事项有？A.蒸汽分布均匀B.控制升温速率C.灭菌后干燥D.冷却介质无菌7.培养基灭菌方式包括？A.分批灭菌B.连续灭菌C.辐照灭菌D.化学灭菌8.无菌检测方法包括？A.沉降菌检测B.表面擦拭检测C.培养基无菌试验D.浮游菌检测9.灭菌失败处理措施包括？A.查找原因B.重新灭菌C.废弃培养基D.记录分析10.灭菌前准备工作包括？A.设备清洁B.阀门检查C.蒸汽供应确认D.培养基配制答案1.ABCD；2.ABC；3.ABCD；4.ABCD；5.ABCD；6.ABCD；7.AB；8.ABCD；9.ABCD；10.ABCD判断题（10题，每题2分）1.饱和蒸汽温度越高，灭菌效果越好，无需控制时间。（×）2.无菌空气精过滤器孔径通常小于0.2μm。（√）3.生物反应器灭菌可直接通高温蒸汽，无需预热。（×）4.培养基灭菌后需立即接种，无需冷却。（×）5.干热灭菌适用于不耐湿热的物品。（√）6.SIP时所有阀门需打开，确保蒸汽流通。（×）7.无菌检测培养时间通常为48小时。（√）8.灭菌过程中排气阀应始终关闭。（×）9.过热水灭菌温度通常为121℃。（×）10.灭菌后需无菌确认才能使用。（√）简答题（4题，每题5分）1.简述湿热灭菌的基本原理。答案：湿热灭菌利用高温（饱和蒸汽、过热水等）使微生物体内蛋白质、核酸变性凝固，破坏代谢活性。饱和蒸汽穿透力强，冷凝释放潜热提升效率，相比干热灭菌温度更低、时间更短，适用于生物反应器、培养基灭菌，对设备损伤小。2.说明无菌空气制备的关键步骤及注意事项。答案：关键步骤：粗过滤（除大颗粒）→加热除湿（降湿度）→精过滤（0.2μm滤膜除菌）→冷却。注意事项：过滤器定期完整性检测；蒸汽灭菌控制升温速率（防滤膜损坏）；空气系统定期清洁；灭菌后干燥滤器（防潮）。3.简述生物反应器在线灭菌（SIP）的操作流程。答案：①准备：关闭外接阀门，确认清洁；②预热：夹套通温水至80-90℃；③灭菌：通饱和蒸汽，升温≤1℃/min，121℃/0.1MPa维持30-60min；④排气：缓慢排蒸汽；⑤干燥：通无菌空气；⑥冷却：通无菌介质至接种温度；⑦无菌确认：取样检测。4.说明培养基灭菌失败的常见原因及排查方法。答案：常见原因：冷空气未排尽、蒸汽参数不达标、搅拌不充分、设备死角、过滤器损坏。排查方法：检查排气阀、校准温压传感器、验证搅拌系统、检查死角、培养基无菌检测。讨论题（2题，每题5分）1.讨论如何控制生物反应器灭菌死角对效果的影响。答案：①设计优化：减少盲端、缝隙，死角率≤3%；②灭菌前清洁：无残留杂质；③蒸汽分布：安装喷射器，均匀覆盖；④参数监控：死角装温度传感器；⑤生物验证：用枯草芽孢杆菌芽孢验证；⑥维护：定期清理死角，更换积污部件。