生物合成药物中间体研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

生物合成药物中间体研发工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.生产青霉素中间体6-APA的关键酶是______。2.生物合成紫杉醇中间体10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的常用宿主是______。3.检测生物合成中间体中糖基含量的常用方法是______。4.目的基因与载体连接的关键酶是______。5.L-苯丙氨酸中间体的合成途径是______。6.发酵控制溶解氧的方式除搅拌、通气外，还可______。7.分离小分子中间体的常用色谱技术是______。8.洛伐他汀中间体的关键前体是______。9.前体物质添加需遵循______原则（举1例）。10.表达载体中启动子的作用是______。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.生物合成维生素B12中间体的常用微生物是？A.大肠杆菌B.丙酸杆菌C.枯草芽孢杆菌D.假单胞菌2.发酵pH控制的常用方式是？A.补碳源B.补酸/碱C.补氮源D.变温度3.属于次级代谢产物中间体的是？A.葡萄糖B.6-APAC.氨基酸D.ATP4.检测目的蛋白表达量的常用方法是？A.电泳B.ELISAC.比色法D.滴定法5.红霉素中间体合成的关键酶是？A.PKSB.NRPSC.糖苷转移酶D.羟化酶6.碳源的作用不包括？A.供能B.碳骨架C.调节pHD.前体7.离子交换树脂选择依据是中间体的？A.分子量B.电荷性质C.溶解度D.挥发性8.紫杉醇中间体的前体物质是？A.苯丙氨酸B.异戊二烯C.亮氨酸D.丙氨酸9.载体选择无需考虑的是？A.宿主兼容性B.标记基因C.价格D.启动子强度10.代谢流分析的主要目的是？A.提高中间体产量B.降成本C.优化培养基D.测菌体浓度三、多项选择题（共10题，每题2分）1.生物合成中间体的常用宿主有？A.大肠杆菌B.酵母菌C.放线菌D.植物细胞2.影响中间体产量的因素包括？A.温度B.pHC.溶氧D.前体添加量3.检测中间体的常用仪器有？A.HPLCB.GC-MSC.NMRD.紫外分光光度计4.基因工程菌构建步骤包括？A.目的基因克隆B.载体构建C.转化D.筛选5.他汀类中间体的合成途径有？A.MVAB.MEVC.莽草酸D.糖酵解6.代谢调控方法有？A.关键酶过表达B.反馈抑制解除C.前体定向供给D.变溶氧7.分离纯化方法有？A.萃取B.结晶C.色谱D.离心8.抗生素中间体包括？A.6-APAB.7-ACAC.10-去乙酰巴卡亭ⅢD.洛伐他汀中间体9.培养基灭菌方法有？A.湿热灭菌B.干热灭菌C.过滤灭菌D.紫外线灭菌10.常用标记基因有？A.氨苄抗性B.卡那抗性C.荧光蛋白D.启动子四、判断题（共10题，每题2分）1.生物合成比化学合成更环保。（）2.大肠杆菌可直接合成复杂次级代谢中间体。（）3.前体添加越多，产量越高。（）4.HPLC可用于中间体分离纯化。（）5.基因克隆无需考虑密码子偏好性。（）6.搅拌转速越高，溶氧越高。（）7.莽草酸途径合成芳香族氨基酸。（）8.PKS参与红霉素中间体合成。（）9.植物细胞可合成紫杉醇中间体。（）10.ELISA可检测目的蛋白表达量。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述生物合成中间体的优势。2.简述目的基因克隆的基本步骤。3.简述发酵溶氧的控制策略。4.简述中间体分离纯化的基本原则。六、讨论题（共2题，每题5分）1.如何从代谢调控和工艺优化两方面提高中间体产量？2.如何解决重组菌的代谢负荷问题？---参考答案一、填空题1.青霉素酰化酶2.红豆杉内生真菌3.苯酚-硫酸法4.DNA连接酶5.莽草酸途径6.分批补料7.高效液相色谱（HPLC）8.甲羟戊酸（MVA）9.低浓度分批添加（或无毒性）10.驱动目的基因转录二、单项选择题1-5:BBBBA6-10:CBCDA三、多项选择题1-5:ABCDABCDABCDABCDAB6-10:ABCABCDABABCABC四、判断题1.√2.×3.×4.√5.×6.×7.√8.√9.√10.√五、简答题1.生物合成优势：①环保：常温常压、无有毒副产物；②特异性：酶催化立体选择性高，避免消旋体；③经济：复杂中间体（如6-APA）合成步骤简化；④可持续：利用可再生原料，规模化生产。2.克隆步骤：①提取供体DNA/cDNA；②PCR扩增目的基因；③双酶切目的基因与载体；④DNA连接构建重组质粒；⑤转化感受态菌；⑥筛选阳性克隆。3.溶氧控制：①基础调控：调搅拌转速、通气量；②补料：分批补碳源/前体；③在线监测：设阈值自动调节；④代谢优化：过表达呼吸链基因；⑤消泡：加消泡剂减少泡沫影响。4.纯化原则：①目标明确：依纯度选方法；②效率优先：简化步骤（萃取→结晶→色谱）；③保持活性：避免高温/强酸强碱；④经济：优先低成本方法；⑤环保：减少有毒试剂；⑥可放大：实验室方法适配工业生产。六、讨论题1.提高产量策略：①代谢调控：过表达关键限速酶（如紫杉醇P450羟化酶），敲除竞争途径，解除反馈抑制；②工艺优化：优化碳氮比、补加前体，动态调控温度/pH/溶氧，采用流加发酵，优化分离收率；③合成生物学：重构代谢途径，提升合成效率。2.代谢负荷解决：①