生物药层析柱压力稳定性测试技师（初级）考试试卷及答案

生物药层析柱压力稳定性测试技师（初级）考试试卷及答案填空题（每题1分，共10分）1.生物药层析常用填料类型包括琼脂糖、______和离子交换树脂等。2.层析柱压力测试常用压力单位是______（bar/kPa）。3.压力稳定性测试前，柱平衡时间通常不少于______分钟。4.层析柱压力波动允许范围不超过平均压力的______%。5.压力测试常用恒流泵流速设置为______mL/min（常规分析柱）。6.缓冲液pH测试前误差需控制在______以内。7.压力稳定性测试需记录的核心参数：流速、压力和______。8.柱效与压力的关系通常为______（正/负）相关。9.柱接口检漏常用试剂是______。10.测试前需确认缓冲液过滤膜孔径为______μm。单项选择题（每题2分，共20分）1.导致柱压突然升高的原因是？A.填料破碎B.缓冲液过滤不彻底C.流速降低D.温度升高2.判断柱稳定的标准：连续______分钟压力波动≤允许范围。A.10B.20C.30D.603.不适用于生物药层析的填料是？A.琼脂糖B.葡聚糖C.正相硅胶D.DEAE树脂4.柱压超耐受值时应立即______。A.提高流速B.更换缓冲液C.关闭泵D.升温5.生物药分析柱常用柱径范围是？A.1-5mmB.5-20mmC.20-50mmD.50-100mm6.缓冲液过滤膜孔径通常为？A.0.22μmB.0.45μmC.1.0μmD.5.0μm7.与柱压无关的因素是？A.填料粒径B.柱长C.样品浓度D.流速8.压力测试目的不包括？A.评估柱稳定性B.检测填料破碎C.测样品纯度D.确定最大耐受流速9.压力持续缓慢升高的原因是？A.缓冲液温度降低B.填料压实C.接口漏液D.泵故障10.压力测试记录不需要包含的是？A.测试日期B.柱型号C.样品名称D.压力波动曲线多项选择题（每题2分，共20分）1.压力测试必要准备工作包括？A.填料活化B.缓冲液过滤C.柱检漏D.泵校准E.样品稀释2.柱压异常升高的常见原因？A.缓冲液含杂质B.填料粒径小C.流速过快D.柱温高E.接口漏液3.压力测试需记录的参数？A.流速B.进出口压力C.平衡时间D.柱温E.上样量4.生物药层析常用填料？A.琼脂糖4BB.葡聚糖G-25C.反相C18D.正相硅胶E.DEAE树脂5.柱性能良好的指标？A.压力稳定B.无波动C.压力≤耐受值D.塔板数达标E.回收率高6.柱平衡要求包括？A.缓冲液pH与样品一致B.压力稳定C.电导稳定D.温度恒定E.上样体积达标7.压力突然下降的情况？A.接口漏液B.填料流失C.流速降低D.柱温升高E.泵故障8.压力测试适用场景？A.新柱验收B.柱再生后C.柱用100次后D.纯度检测前E.缓冲液更换后9.柱最大耐受压力影响因素？A.填料类型B.柱材质C.柱径D.柱长E.储存条件10.压力传感器校准目的？A.数据准确B.避免误判C.符合GMPD.提高柱效E.减少缓冲液消耗判断题（每题2分，共20分）1.柱压越高，柱效越好。（×）2.恒压泵可用于压力稳定性测试。（×）3.缓冲液过滤可降低柱压升高风险。（√）4.生物药柱可在100℃测试压力。（×）5.压力波动≤5%属于合格。（√）6.新柱验收必须含压力测试。（√）7.填料粒径越小，柱压越低。（×）8.柱温升高会降低柱压。（√）9.接口漏液导致柱压升高。（×）10.压力测试需记录测试人员。（√）简答题（每题5分，共20分）1.简述压力稳定性测试基本流程。答案：①准备：配制过滤缓冲液（0.22μm），检查柱接口、泵、传感器；②平衡：恒流泵以1.0mL/min泵入缓冲液，平衡30min至压力稳定；③测试：设置流速，连续记录压力（1min/次）20min；④判断：波动≤平均压力5%则合格；⑤记录：填写测试记录（日期、柱型、压力曲线等），不合格排查原因（杂质、填料破碎）。2.柱压持续缓慢升高的原因及解决方法。答案：原因：①缓冲液含颗粒堵塞；②填料压实；③缓冲液粘度升高（温度低）。解决：①停止测试，低流速反向冲洗30min；②更换过滤缓冲液重新平衡；③调整柱温至25℃；④若仍升高，检查填料是否破碎，必要时更换。3.新柱验收压力测试要点。答案：①确认柱规格与要求一致；②用指定缓冲液，控制pH±0.1、电导；③流速不超柱最大耐受压力（≤0.3MPa）；④平衡30min至压力稳定；⑤连续记录20min压力，波动≤5%；⑥记录环境温度（20-25℃）；⑦不合格联系供应商退换。4.压力传感器校准的重要性及方法。答案：重要性：保证数据准确，避免误判，符合GMP。方法：①连接标准压力源；②设置标准压力（0.1、0.2MPa），读取传感器值；③偏差超±0.01MPa则调整；④重复3次确认达标；⑤记录校准信息，贴标签。讨论题（每题5分，共10分）1.如何平衡层析柱流速与压力的关系？答案：生物药层析需兼顾流速（分离效率）与压力（柱稳定、蛋白活性）。①先确认柱最大耐受压力（如琼脂糖柱≤0.3MPa）；②流速从低到高（0.5→1.0→1.5mL/min）测试，记录压力；③流速升高时压力未超范围且波动小，可适当提高（加快分离）；④压力骤升则降低流速（避免填料破碎）；⑤结合生物药类型（亲和层析流速可稍高，离子交换适中），选“压力稳定+分离达标”的流速。2.压力测试在生物药生产中的质量控制作用。答案：①新柱验收：确保柱性能符合生产要求，避免不合格柱影响产品；②柱使用过程：定期测试（每50次），及时发现填料破碎、压实，防止柱效下降导致纯度不达标；③工艺变更：缓冲液更换、流速调整后测试，确认压力稳定，保证工艺一致性；④GMP合规：完整记录满足追溯要求；⑤风险控制：提前发现漏液、堵塞，避免生产中断或产品报废，降低成本。参考答案汇总填空题答案1.葡聚糖2.bar3.304.55.1.06.±0.17.温度8.负9.肥皂水10.0.22单项选择题答案1.B2.B3.C4.C5.B6.A7