2026年生物医药研发实验操作与流程考核试题集

2026年生物医药研发实验操作与流程考核试题集一、单选题（每题2分，共20题）1.在细胞培养过程中，若发现细胞出现大量聚集体，最可能的原因是？A.培养基pH值过高B.细胞密度过高C.培养皿清洁度不足D.温度波动过大2.进行酶联免疫吸附实验（ELISA）时，洗涤步骤的主要目的是？A.增强抗体与抗原的结合力B.去除未结合的酶标抗体C.提高检测信号的灵敏度D.增加样本的酸碱度3.在蛋白质纯化过程中，离子交换层析的原理是？A.疏水作用B.氢键作用C.离子交换作用D.沉淀作用4.实验室中储存危险化学品时，以下哪种做法是错误的？A.氢氧化钠与氯仿分开放置B.易燃品存放在阴凉处C.氧化剂与还原剂混放D.瓶口密封良好5.RNA提取过程中，使用TRIzol试剂的主要原理是？A.蛋白质沉淀B.RNA裂解C.DNA变性D.脂质溶解6.进行WesternBlot实验时，转移膜预杂交的目的是？A.增强抗体结合B.封闭非特异性位点C.变性蛋白质D.激活酶活性7.在动物实验中，用于麻醉小鼠的常用药物是？A.异氟烷B.氯化钾C.肾上腺素D.胰岛素8.高效液相色谱（HPLC）分析中，流动相选择的主要依据是？A.离子强度B.pH值C.溶剂极性D.色谱柱材质9.细胞凋亡检测中，AnnexinV-FITC/PI染色法主要用于区分？A.活细胞与死细胞B.凋亡细胞与坏死细胞C.增殖细胞与静止细胞D.幼稚细胞与成熟细胞10.基因编辑实验中，CRISPR-Cas9系统的核心元件是？A.gRNAB.Cas9蛋白C.sgRNAD.A和B均正确二、多选题（每题3分，共10题）1.以下哪些属于实验室生物安全等级要求？A.生物安全柜B.消毒灭菌设备C.个人防护装备D.废物处理系统2.蛋白质印迹（WesternBlot）实验中，需要使用的试剂包括？A.SDS电泳缓冲液B.转移膜封闭液C.一抗二抗混合液D.ECL发光液3.细胞培养过程中，可能导致细胞污染的因素有？A.消毒不彻底B.未经处理的水源C.非无菌操作D.培养基过期4.实验室废弃物处理方法包括？A.化学降解B.高温焚烧C.直接排放D.混合储存5.基因测序技术中，常用的平台有？A.IlluminaB.IonTorrentC.Sanger测序D.PacBio6.细胞凋亡的标志物包括？A.Caspase-3活化B.DNA片段化C.磷脂酰丝氨酸外翻D.细胞膜完整性破坏7.药物筛选实验中，常用的高通量筛选技术包括？A.微孔板读取仪B.机器人自动化系统C.流式细胞仪D.代谢组学分析8.实验室常用的灭菌方法有？A.干热灭菌B.蒸汽灭菌C.紫外线照射D.乙醇消毒9.RNA干扰（RNAi）技术的作用机制包括？A.mRNA降解B.蛋白质合成抑制C.基因转录调控D.染色质重塑10.蛋白质结构预测常用的软件有？A.AlphaFoldB.ModBaseC.Swiss-ModelD.PyMOL三、判断题（每题1分，共10题）1.细胞培养过程中，CO2培养箱的主要作用是调节pH值。（正确）2.ELISA实验中，酶标板洗涤次数越多，检测结果越准确。（错误）3.蛋白质纯化过程中，分子筛层析主要用于分离不同分子量的蛋白质。（正确）4.实验室中，易燃化学品应存放在金属柜中。（错误）5.RNA提取过程中，TRIzol试剂可同时裂解细胞并去除DNA。（正确）6.WesternBlot实验中，一抗与二抗不能互换使用。（正确）7.麻醉小鼠时，应先注射麻醉剂再进行实验操作。（正确）8.HPLC分析中，流动相极性越强，分离效果越好。（错误）9.AnnexinV-FITC/PI染色法只能检测凋亡细胞，无法区分坏死细胞。（错误）10.CRISPR-Cas9系统通过gRNA识别靶向位点。（正确）四、简答题（每题5分，共5题）1.简述细胞培养过程中，如何避免微生物污染？答：（1）严格无菌操作，包括超净工作台使用、手套消毒等；（2）培养皿和试剂定期灭菌；（3）使用无菌水或双蒸水；（4）定期更换培养基；（5）观察细胞状态，一旦发现污染立即处理。2.解释WesternBlot实验中，蛋白条带出现弥散性条纹的可能原因。答：（1）蛋白质过度变性；（2）电泳缓冲液pH值不合适；（3）抗体浓度过高；（4）样品处理不当（如反复冻融）。3.描述基因编辑实验中，如何验证CRISPR-Cas9编辑效率？答：（1）PCR检测靶向位点突变；（2）测序验证编辑准确性；（3）荧光报告基因检测。4.列举三种常用的蛋白质纯化方法及其原理。答：（1）离子交换层析：基于蛋白质电荷差异分离；（2）凝胶过滤层析：基于分子大小分离；（3）亲和层析：利用特定结合位点（如抗体）纯化。5.说明RNA干扰（RNAi）技术的基本流程。答：（1）siRNA或miRNA导入细胞；（2）RNA诱导沉默复合体（RISC）形成；（3）靶向mRNA降解或翻译抑制。五、论述题（每题10分，共2题）1.比较ELISA和流式细胞术在细胞分析中的优缺点。答：ELISA优点：-操作简便，适合大量样本检测；-定量分析准确；-成本较低。ELISA缺点：-耗时长；-易受交叉反应干扰；-适用于静态分析。流式细胞术优点：-动态分析细胞状态；-多参数同时检测；-适用于细胞分选。流式细胞术缺点：-设备昂贵；-操作复杂；-对样本要求高。总结：ELISA适合蛋白质定量，流式细胞术适合细胞功能分析。2.论述生物安全实验室的分级管理要求。答：生物安全水平1（BSL-1）：-适用于低致病性微生物；-无特殊通风要求；-常规实验室操作即可。生物安全水平2（BSL-2）：-适用于中等致病性微生物；-需配备生物安全柜；-严格限制人员进出。生物安全水平3（BSL-3）：-适用于高致病性微生物；-需负压通风系统；-限制空气排放。生物安全水平4（BSL-4）：-适用于高风险病原体；-全封闭独立建筑；-严格人员防护。管理要求：-人员培训；-监测系统；-废物处理；-应急预案。答案与解析1.B2.B3.C4.C5.B6.B7.A8.C9.B10.D11.ABD12.ABCD13.ABC14.AB15.ABCD16.ABC17.ABCD18.ABC19.ABC20.D21.正确22.错误23.正确24.错误25.正确26.正确27.正确28.错误29.错误30.正确31.细胞培养过程中，避免微生物污染需严格无菌操作、定期灭菌、使用无菌试剂、监测细胞状态等措施。32.蛋白条带弥散可能因蛋白质变性、电泳条件不当或抗体非特异性结合导致。33.验证CRISPR编辑效率可通过PCR、测序或荧光报告系统检测靶向位点突变及编辑准确性。34.离子交换层析基于电荷差异，凝胶过滤层析基于分子大小，亲和层析利用特定结合