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文档简介
2026年医学实验室技术进阶题库生物样本检测与分析题库一、单选题(每题2分,共20题)1.在处理生物样本时,以下哪种方法最能有效减少RNA降解?A.低温保存(-80℃)B.使用RNase-free试剂C.加热样本以灭活RNaseD.快速完成提取过程2.以下哪种技术最适合用于检测极低丰度的蛋白质标记物?A.ELISAB.WesternBlotC.MassSpectrometryD.PCR3.在血液样本中,游离DNA(ffDNA)的浓度通常低于细胞内基因组DNA,主要原因是什么?A.细胞膜保护作用B.DNA降解C.血小板释放D.样本溶血4.以下哪种方法可用于评估生物样本库中样本的长期稳定性?A.原位杂交B.数字PCRC.蛋白质印迹D.相对浓度测定5.在高通量测序中,adapterligation失败的主要原因可能是?A.DNA浓度过高B.adapter设计不合理C.聚合酶活性不足D.样本保存不当6.以下哪种缓冲液常用于蛋白质印迹实验的转膜过程?A.TBSB.PBSC.Tris-GlycineD.MOPS7.在代谢组学研究中,液相色谱-质谱联用(LC-MS)的优势是什么?A.高灵敏度B.操作简便C.成本低廉D.全谱分析8.以下哪种技术可用于检测样本中的微量重金属?A.流式细胞术B.原子吸收光谱C.微流控芯片D.电化学传感器9.在免疫组化实验中,背景染色过强可能的原因是?A.抗体浓度过高B.样本固定不充分C.封闭不彻底D.脱水过度10.在细胞培养样本中,检测到的外泌体含量低可能的原因是?A.细胞系污染B.提取方法不当C.样本处理时间过长D.培养基成分错误二、多选题(每题3分,共10题)1.影响生物样本检测准确性的因素包括?A.样本采集方式B.保存条件C.提取效率D.仪器校准2.在基因表达分析中,以下哪些方法可用于定量检测?A.qPCRB.RNA-seqC.NorthernBlotD.insituhybridization3.蛋白质组学研究中,以下哪些技术可用于蛋白质鉴定?A.MALDI-TOFMSB.ESI-MS/MSC.WesternBlotD.2DGelElectrophoresis4.生物样本库的质量控制措施包括?A.标本信息记录B.空白样本检测C.重复样本分析D.降解产物评估5.在代谢组学研究中,以下哪些方法可用于数据预处理?A.感应模式分析B.对齐校正C.柱前衍生化D.基线扣除6.细胞因子检测中,以下哪些方法可用于多重分析?A.LuminexB.ELISAC.流式细胞术D.数字微球7.在DNA提取过程中,以下哪些措施可提高纯度?A.蛋白酶K处理B.氯仿萃取C.无水乙醇沉淀D.活性炭吸附8.在蛋白质印迹实验中,以下哪些因素会影响结果?A.抗体浓度B.转膜条件C.电泳缓冲液D.样本加载量9.在单细胞测序中,以下哪些技术可用于细胞分离?A.FACSB.微流控芯片C.磁珠分选D.机械破碎10.在生物样本检测中,以下哪些指标可用于评估样本质量?A.RNARIN值B.DNA浓度C.蛋白质纯度D.样本污染率三、判断题(每题1分,共20题)1.低温保存(-20℃)可有效防止RNA降解。(×)2.WesternBlot适用于检测所有蛋白质。(×)3.数字PCR可绝对定量DNA。(√)4.血液样本中的游离DNA主要来自有核细胞。(√)5.生物样本库的样本应避免反复冻融。(√)6.LC-MS在代谢组学中具有高通量优势。(√)7.免疫组化实验中,封闭不充分会导致假阳性。(×)8.外泌体提取过程中,超声处理可提高回收率。(√)9.qPCR检测需要标准曲线进行定量。(√)10.蛋白质组学研究中,2DGelElectrophoresis是唯一分离方法。(×)11.生物样本库的样本应记录采集时间。(√)12.代谢组学研究中,GC-MS和LC-MS检测原理相同。(×)13.流式细胞术可检测细胞表面标志物。(√)14.蛋白质印迹中,电泳条件不影响结果。(×)15.单细胞测序适用于所有生物学研究。(×)16.DNA提取过程中,蛋白酶K可降解DNA。(×)17.蛋白质组学研究中,MassSpectrometry是唯一鉴定方法。(×)18.免疫组化中,抗体稀释度越高越好。(×)19.细胞因子检测中,Luminex可同时检测数十种指标。(√)20.生物样本库的样本应避免光照暴露。(√)四、简答题(每题5分,共5题)1.简述RNA提取过程中防止降解的三个关键步骤。答:①使用RNase-free环境;②加入RNA酶抑制剂;③低温操作(-80℃保存)。2.解释代谢组学研究中LC-MS联用技术的优势。答:①高灵敏度检测多种代谢物;②可分离复杂混合物;③结合质谱进行结构鉴定。3.描述免疫组化实验中减少背景染色的方法。答:①优化抗体浓度;②加强封闭处理;③使用高纯度抗体。4.说明单细胞测序在肿瘤研究中的应用价值。答:①解析肿瘤异质性;②发现新的生物标志物;③指导个性化治疗。5.列举三种提高蛋白质组学样品提取效率的方法。答:①超声辅助提取;②有机溶剂沉淀;③酶法降解膜蛋白。五、论述题(每题10分,共2题)1.论述生物样本库在临床研究中的重要性及质量控制要点。答:生物样本库是临床研究的基础,可提供长期、多样化的样本资源。质量控制要点包括:①样本采集标准化;②保存条件严格监控;③信息记录完整;④定期检测样本质量。2.比较RNA-seq和蛋白质组学研究的优缺点及适用场景。答:RNA-seq可检测基因表达变化,但蛋白质组学更直接反映功能状态。RNA-seq优点是灵敏度高,蛋白质组学可反映翻译后修饰。适用场景:RNA-seq用于基因表达研究,蛋白质组学用于功能验证。答案与解析一、单选题答案1.A低温保存可有效抑制RNase活性。2.CMassSpectrometry适用于极低丰度蛋白检测。3.BffDNA在循环系统中易降解。4.B数字PCR可评估样本降解程度。5.Badapter设计不合理会导致连接失败。6C.Tris-Glycine是常用转膜缓冲液。7.ALC-MS灵敏度极高,适合代谢物检测。8.B原子吸收光谱是重金属检测经典方法。9.C封闭不彻底易导致非特异性结合。10.B提取方法不当会降低外泌体回收率。二、多选题答案1.ABCD样本采集、保存、提取及仪器均影响结果。2.ABqPCR和RNA-seq可定量基因表达。3.ABMALDI-TOF和ESI-MS/MS用于蛋白质鉴定。4.ABCD样本记录、空白检测、重复分析及降解评估是关键。5.BCD对齐校正、柱前衍生化和基线扣除是常用预处理方法。6.ABLuminex和ELISA可多重检测细胞因子。7.ABC蛋白酶K、氯仿萃取和乙醇沉淀提高纯度。8.ABCD抗体、转膜、缓冲液和加载量均影响结果。9.ABCFACS、微流控和磁珠分选用于细胞分离。10.ABCDRNARIN、DNA浓度、蛋白纯度和污染率是质量指标。三、判断题答案1.×低温保存(-80℃)更有效。2.×WesternBlot需特定抗体。3.√数字PCR可绝对定量。4.√主要来自有核细胞。5.√反复冻融会降解RNA。6.√LC-MS高通量检测代谢物。7.×封闭不充分导致假阴性。8.√超声可破坏细胞膜提高回收率。9.√需标准曲线定量。10.×2DGel和液相色谱也可分离。11.√采集时间影响生物标志物稳定性。12.×GC-MS检测挥发代谢物,LC-MS检测极性代谢物。13.√流式细胞术检测表面标记物。14.×电泳条件影响蛋白迁移。15.×仅适用于特定研究。16.×蛋白酶K降解蛋白质。17.×2DGel和质谱联用也可鉴定。18.×过高稀释会导致信号减弱。19.√Luminex可检测数十种标志物。20.√光照会降解核酸。四、简答题解析1.RNA提取防止降解步骤:①RNase-free环境(使用DEPC水、一次性耗材);②加入RNase抑制剂(如RNaseAway);③低温操作(试剂盒预冷,-80℃保存RNA)。2.LC-MS联用优势:①色谱分离复杂代谢物,质谱高灵敏度检测;②可同时获取结构信息和定量数据;③适用于多种样本类型(血浆、尿液等)。3.减少免疫组化背景染色方法:①优化抗体浓度(预实验确定最佳稀释度);②加强封闭(5%BSA或脱脂奶粉,37℃封闭1-2小时);③使用高纯度抗体(兔抗人IgG纯度>98%)。4.单细胞测序应用价值:①解析肿瘤细胞异质性,发现亚克隆;②鉴定新的肿瘤标志物(如突变基因、细胞因子);③指导免疫治疗和靶向用药。5.提高蛋白质组学提取效率方法:①超声辅助(提高细胞膜通透性);②有机溶剂沉淀(如乙腈或甲醇);③酶法降解膜蛋白(如蛋白酶K)。五、论述题解析1.生物样本库重要性及质量控制:重要性:①长期存储样本,支持纵向研究;②提供多样化样本类型(血液、组织等);③促进多中心合作研究。质量控制:①采集标准化(如采血时间、抗凝剂);②保存条件(-80℃冻存,避光保存);③信息记录(样本编号、采集时间、处理过程);④定期
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