细胞冻存复苏设备运维技师（初级）考试试卷及答案

细胞冻存复苏设备运维技师（初级）考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.细胞冻存常用的低温保护剂是______。2.细胞复苏时，冻存管应快速投入______℃水浴中。3.液氮罐按功能可分为贮存式和______式。4.冻存管常用材质为______（耐低温）。5.液氮罐安全阀每______个月检查一次。6.复苏细胞离心常用转速为______r/min。7.程序降温盒的降温速率通常为______℃/min。8.液氮液面低于罐高______时需补充。9.细胞复苏后放入______培养箱培养。10.设备运维记录至少保存______年。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.细胞冻存复苏无需用到的设备是？A.液氮罐B.水浴锅C.高压灭菌锅D.离心机2.液氮罐使用错误的操作是？A.戴防冻手套B.直立放置C.倾斜倒液氮D.远离火源3.细胞长期冻存温度是？A.-80℃B.-196℃C.4℃D.37℃4.复苏冻存管取出后应立即？A.开盖B.37℃水浴C.放回-80℃D.静置5.液氮罐液位监测不包括？A.称重法B.液位计法C.目测法D.温度法6.程序降温盒的作用是？A.快速升温B.缓慢降温C.高压灭菌D.恒温7.对细胞毒性最小的低温保护剂是？A.DMSOB.甘油C.蔗糖D.甘露醇8.复苏离心后上清液应？A.保留B.弃去C.分装D.直接倒9.液氮泄漏首先应？A.补液氮B.撤离通风C.直接维修D.记录10.冻存管标记需包含？A.仅细胞名B.细胞名+冻存日期+编号C.仅日期D.随意标记三、多项选择题（每题2分，共20分）1.细胞冻存复苏关键步骤包括？A.细胞计数B.加保护剂C.程序降温D.快速复苏E.离心洗涤2.液氮罐日常维护要点？A.查安全阀B.罐口清洁C.避免碰撞D.每月称重E.换内胆3.复苏后培养注意事项？A.及时换液B.观察贴壁C.避免晃动D.立即传代E.保持湿度4.液氮罐常用配件？A.冻存架B.提桶C.液位仪D.高压袋E.水浴支架5.设备运维记录内容？A.维护日期B.设备状态C.故障处理D.液氮补充量E.操作人员6.冻存细胞浓度范围？A.1×10⁶/mlB.5×10⁶/mlC.1×10⁷/mlD.5×10⁷/mlE.1×10⁸/ml7.液氮安全注意事项？A.防皮肤接触B.禁明火C.通风D.戴护目镜E.徒手取冻存管8.复苏水浴锅要求？A.37±1℃B.水面没过冻存管C.定期清洁D.自来水E.带搅拌9.程序降温目的？A.减少冰晶B.避免损伤C.提高复苏率D.加快冻存E.保持活性10.故障排查步骤？A.确认现象B.查运维记录C.检部件D.换配件E.验证修复四、判断题（每题2分，共20分）1.DMSO可直接加入细胞悬液。（）2.液氮罐可放阳光直射处。（）3.复苏时冻存管需轻晃加速融化。（）4.冻存管可重复使用。（）5.液氮罐提桶需定期消毒。（）6.复苏离心时间5-10min。（）7.程序降温盒使用前需预冷4℃。（）8.可用明火检测液氮泄漏。（）9.复苏后立即换新鲜培养基。（）10.运维记录可代签。（）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述细胞冻存基本流程。2.液氮罐日常维护内容。3.细胞复苏失败常见原因。4.设备运维记录的重要性及填写要求。六、讨论题（每题5分，共10分）1.讨论液氮泄漏应急处理流程及注意事项。2.讨论提高细胞冻存复苏率的操作要点。---参考答案一、填空题1.二甲基亚砜（DMSO）2.373.运输4.聚丙烯（PP）5.66.10007.18.1/39.CO₂10.3二、单项选择题1-5：CCBBC6-10：BABBB三、多项选择题1.ABCDE2.ABCD3.ABCE4.ABC5.ABCDE6.ABCD7.ABCD8.ABC9.ABCE10.ABCDE四、判断题1.×2.×3.√4.×5.√6.√7.×8.×9.√10.×五、简答题1.①细胞计数，调浓度1×10⁶~5×10⁷/ml；②加预冷10%DMSO冻存液；③分装冻存管，标记信息；④放程序降温盒，-80℃过夜；⑤转液氮罐长期保存。2.①每6个月查安全阀/压力表；②每周看液氮液面，低于1/3补充；③保持罐口清洁；④每月称重监测泄漏；⑤避免碰撞/阳光；⑥提桶定期消毒。3.①细胞状态差（污染/活力低）；②DMSO未预冷/加太快；③降温速率不当；④复苏水浴温度不足/融化慢；⑤冻存管破裂；⑥未及时换液（DMSO残留）。4.重要性：追溯设备状态、保障细胞安全。填写要求：①真实准确（日期/状态/故障）；②故障记录现象/措施/结果；③液氮补充量/时间；④本人签字，保存3年。六、讨论题1.流程：①撤离人员，开通风；②戴防冻装备，关阀门；③用干冰吸附泄漏，禁用水；④记录处理过程。注意：①防缺氧，禁密闭空间；②禁明火；③皮肤接触冲温水；④通风30分钟再进入。2.要点